® ® Sistema per la ricerca di Virus Respiratori in campioni biologici (espettorato, tamponi, BAL) Il Kit ProDect® CHIP RV fornisce un grandissimo contributo nello studio delle sindromi respiratorie acute, permettendo la rivelazione contemporanea di molteplici patogeni respiratori virali. Il sistema comprende: reattivi di amplificazione (-20°C), reattivi di rivelazione (+4°C). Materiale necessario non fornito: sistema di estrazione dell’acido nucleico (ProDect VIRAL NUCLEIC ACID EXTRACTION o sistemi tipo Roche), enzimi per la retrotrascrizione. Le sindromi respiratorie acute hanno quadri anatomo-clinici simili che possono avere eziologia assai differente. E’ indispensabile una duplice diagnosi: clinica-strumentale, volta a definire la localizzazione e la tipologia del processo infiammatorio ed eziologica, con l’identificazione certa dell’agente causale. Numerosi protocolli e linee guida per la diagnosi e la terapia delle sindromi respiratorie acute sono stati proposti (British Thoracic Society, American Thoracic Society etc.): nessun insieme di standards può efficacemente adattarsi alla moltitudine di variabili che determinano e condizionano un buon giudizio clinico. Il sistema consente di rivelare l’eventuale presenza di uno o piu’ dei seguenti patogeni: •ADENOVIRUS (ADV) •INFLUENZA A (IA), INFLUENZA B (IB) •PARAINFLUENZA1 (P1), PARAINFLUENZA2 (P2), PARAINFLUENZA3 (P3) •VIRUS RESPIRATORIO SINCIZIALE (RSV) •METAPNEUMOVIRUS (HMPV) •INFLUENZA A H1N1 •INFLUENZA AVIARIA (AV H5N1) SGQ 07/2009-03 ® ® ESTRAZIONE DELL’ACIDO NUCLEICO DURATION: TEMPO DI ESECUZIONE: 4,5 HOURS 4,5 ORE RETROTRASCRIZIONE E PCR MULTIPLEX ANALISI DEI RISULTATI JANUS AUTOMATED WORKSTATION MICROPIASTRA 96 CHIP IBRIDAZIONE Strep/AP Sonda specifica RIVELAZIONE COLORIMETRICA LETTURA Il sistema prevede l’utilizzo di chip sui quali sono state preventivamente immobilizzate le sonde specifiche per i patogeni in oggetto. L’acido nucleico estratto dal campione è quindi sottoposto a retrotrascrizione ed amplificazione genica tramite RT-PCR Multiplex. I primers utilizzati sono marcati con Biotina e di conseguenza anche gli amplificati che ne derivano. Questi, denaturati, sono fatti quindi ibridare su chip (1 h di incubazione a temperatura ed agitazione controllata). Segue il lavaggio e l’aggiunta di una soluzione contenente Streptavidina coniugata con fosfatasi alcalina (AP) (30 minuti di incubazione a RT). Dopo un ulteriore lavaggio, l’aggiunta del cromogeno/substrato (NBT-BCIP; 15’ minuti di incubazione a RT al buio), media la reazione colorimetrica alla base della rivelazione. La presenza della sequenza bersaglio è evidenziata dalla formazione di un precipitato di colore bruno in corrispondenza della relativa sonda: ogni differente positivo da vita a patterns specifici. Il sistema rileva mediamente sino a 12.5 pg/l delle sequenze bersaglio per ciascun tipo. Sede Legale: Via Bellini , 9 · 09128 Cagliari · Uff. e Lab.: Viale Monastir, 112 · 09122 Cagliari · Tel. 070 281636 · 070 2099001 · Fax 070 281668 C.C.I.A.A. n° 227000 · C.F. e PART. IVA N° 02827760923 · Capitale Sociale € 120.000,00 Interamente Versati Indirizzo e-mail: biocs@tin.it - Indirizzo web: www.biocs.it - UNI EN ISO 9001:2000 – UNI EN ISO 13485: 2004 CERTIFICATO N° 671 – N° 10003
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