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研究用試薬
オートファジー関連
製品カタログ 2014
飢餓状態
細菌感染
肝機能維持
LC3
心筋症
細胞死
Atg16L
Autophagy
p62
Beclin
Atg5
発生
癌化
老化
http://ruo.mbl.co.jp/
抗原提示
神経変性疾患
目次
LC3 と LC3 結合反応系...........................................................................3
LC3 に結合して選択的に分解される p62....................................................6
リン酸化部位によって機能が制御されているリン酸化 p62..............................8
Atg9 と Atg2-Atg18 複合体...................................................................10
Atg12-Atg5 共有結合体と複合体を形成する Atg16L...................................10
Atg12 結合反応系................................................................................11
栄養センサーの mTOR に制御される ULK1-Atg13-FIP200 複合体................12
クラスⅢ PI3 キナーゼ複合体としての Atg14, Beclin1, Rubicon, UVRAG.......12
オートファジー関連注目分子..................................................................14
MBL LC3 抗体のおすすめアプリケーション..............................................14
Autophagy Ab Sampler Set、My select sampler set のご紹介.....................15
オートファジー関連製品リスト...............................................................16
LC3 と LC3 結合反応系
酵母 Atg8 の哺乳類ホモログは、LC3、GABARAP (GABAA
酵母
哺乳類
Atg8
LC3
GABARAP
GATE-16
受 容 体 関 連 タ ン パ ク 質 )、GATE-16 (Golgi-associated
ATPase enhancer) の 3 つです。
その中でも LC3 の研究が最も進んでおり、哺乳類のオート
E2
Atg7
E1
Atg3
LC3
Atg7
LC3系
LC3
ファジーマーカーとして頻繁に使用されています。LC3 は翻
Atg3 LC3
訳後 (proLC3)、すぐに Atg4B あるいは Atg4A によりその C
LC3-Ⅰ
末をプロセシングされ、LC3-I となります。 LC3-I はオート
PE
ファジーが誘導されると E1、E2 に受け渡され、基質の PE
LC3
Atg4A
PE
(Phosphatidylethanolamine) と結合します。LC3-PE を LC3II と呼びます。LC3-II は LC3-I よりも分子量は大きいのですが、
Phosphatidylethanolamine
LC3
Atg4B
LC3-Ⅱ
R
proLC3
疎水性が高いため SDS-PAGE では LC3-I より移動度が大きく
なります。なお、GABARAP も GATE-16 も同様の過程を経て
PE と結合することが分かっています。
◎ Anti-LC3 抗体(code no. M152-3, clone: 4E12)を用いたオートファジーの検出 (IC, FCM)
Flow cytometry
Immunocytochemistry
Anti-LC3 栄養状態
Isotype control
Anti-LC3 クロロキン処理
50 μM クロロキン
4 hr
栄養状態
クロロキンを培地中に添加すると、リソソームとオートファゴソームの融合が阻害されます。そのため、LC3抗体を用いたICでは、オートファゴソームが細胞
内に大量に蓄積している様子が観察できます。またFCMでは、クロロキン処理細胞では蛍光強度の上昇が観察できます。
LC3
PM036
LC3
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
¥48,000
M186-3
8E10
Mo IgG2aκ 100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト LC3 (MAP1LC3B:1-120 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト LC3 (MAP1LC3B:1-120 a.a.)
¥48,000
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IP: 2 μL/300 μL of cell extract from 1x107 cells
[備 考]
LC3B に反応します。LC3A, LC3C, GATE-16, GABARAP には
IC: 1:500-1:1,000
IH: 1:1,000-1:2,000(パラフィン切片は熱処理が必要です)
FCM: 1:200
[備 考]
LC3 (MAP1LC3A、B、C) に反応します。GATE-16、GABARAP
反応しません。
< 参考文献 >
1) Jia, W., and He, Y. W., J. Immunol. 186, 5313-5322 (2011)
2) Tabata, K., et al ., Mol. Biol. Cell 21, 4162-4172 (2010)
Western blotting
とは反応しません。
< 参考文献 >
1) Tabata, K., et al ., Mol. Biol. Cell 21, 4162-4172 (2010)
2) Saitoh, T., et al ., Nature 456, 264-268 (2008)
(kDa)
37
2
3
4
(kDa)
37
5
25
15
10
MEF(飢餓状態)
6
7
8
25
20
Immunocytochemistry
NRK(飢餓状態)
1
20
LC3-I
LC3-II
15
LC3-I
LC3-II
10
Lane 1: HeLa
Lane 6: MEFAtg5−/−
Lane 2: NIH/3T3
Lane 7: MEF
Lane 3: PC12
Lane 8: MEF (6 hr. treatment with 50 μM Chloroquine)
Lane 4: CHO
MEFAtg5-/-細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
Lane 5: Mouse brain tissue
A549(飢餓状態)
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
3
LC3 (HRP-DirecT)
M186-7
8E10
HRP標識
Mo IgG2aκ
50 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト LC3 (MAP1LC3B:1-120 a.a.)
LC3
¥48,000
PD014
Polyclonal
Rab IgG
リコンビナントラット LC3 (1-142 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/Preservative/Stabilizer
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
[使用法]
WB: 1:1,000
[備 考]
LC3B に反応します。LC3A, LC3C, GATE-16, GABARAP には
IC*: 文献報告あり
反応しません。
IH*: 文献報告あり
< 参考文献 >
1) Jia, W., and He, Y. W., J. Immunol. 186, 5313-5322 (2011)
2) Tabata, K., et al ., Mol. Biol. Cell 21, 4162-4172 (2010)
1
37
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Western blotting
11
(kDa)
30
25
20
15
10
2
3
4
5
LC3-I
LC3-II
14
Lane 7: Mouse spleen
Lane 8: Mouse kidney
Lane 9: MEFAtg5−/−
Lane 10: MEF
Lane 11: MEF (6 hr. treatment with 50 μM Chloroquine)
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
1: HeLa
2: A431
3: NIH/3T3
4: PC12
5: CHO
MEFAtg5−/−細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
LC3
M152-3
1
20
LC3-I
LC3-II
Lane 1: HeLa
Lane 2: NIH/3T3
Lane 3: PC12
Lane 4: CHO
Lane 5: Mouse brain
Lane 6: Mouse liver
¥42,000
< 参考文献 >
1) Kabeya, Y., et al ., J. Cell Sci. 117, 2805-2812 (2004)
2) Mizushima, N., et al ., Mol. Biol. Sci. 15, 1101-1111 (2004)
Western blotting
(kDa)
100 μL
[免疫原]
LC3
4E12
Mo IgG1κ
200 μg
¥48,000
PD015
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト LC3 (MAP1LC3B:1-120 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントラット LC3 (1-142 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Mo, Rat
[性 状]
2 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 5 μg/mL
[使用法]
IC: 1:100
IP: 5 μg/300 μL of cell extract from 1x107 cells
< 参考文献 >
1) Kabeya, Y., et al ., J. Cell Sci. 117, 2805-2812 (2004)
2) Mizushima, N., et al ., Mol. Biol. Cell 15, 1101-1111 (2004)
IC: 40 μg/mL
IH*: 文献報告あり FCM: 40 μg/mL
Immuno-EM: 20 μg/mL
Image-based FCM*: 文献報告あり
[備 考]
LC3(MAP1LC3A、B)に反応します。
¥42,000
Immunocytochemistry
< 参考文献 >
1) Thayanidhi, N., et al ., Mol. Biol. Cell 21, 1850-1863 (2010)
2) Kasai, M., et al ., J. Immunol. 183, 7278-7285 (2009)
Immunocytochemistry
Immuno-EM
AP: Autophagosome
N: Nucleus
NRK(飢餓状態)
Immuno-EM
データご提供 :
東京大学
水島 昇 先生
MEF(飢餓状態)
MEF(飢餓状態)
(x15,000)
LC3
LC3
PM046
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
M115-3
¥48,000
51-11
Mo IgG1
100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントラット LC3 (1-120 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントラット LC3 (1-142 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo, Rat
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IC: 1:100-1:200
IH*: 文献報告あり < 参考文献 >
1) Kabeya, Y., et al ., J. Cell Sci. 117, 2805-2812 (2004)
2) Mizushima, N., et al ., Mol. Biol. Cell 15, 1101-1111 (2004)
< 参考文献 >
1) Kabeya, Y., et al ., J. Cell Sci. 117, 2805-2812 (2004)
2) Mizushima, N., et al ., Mol. Biol. Cell 15, 1101-1111 (2004)
Western blotting
Immunocytochemistry
(kDa)
20
14
MEF(飢餓状態)
4
NRK(飢餓状態)
A549(飢餓状態)
1
2
LC3-I
LC3-II
Lane 1: PC12
Lane 2: PC12 (starved)
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
¥48,000
LC3 Positive Control
PM036-PN [使用法]
GATE-16
100 μL (10 tests)
¥5,000
LC3 抗体の WB用ポジティブコントロール
Western blotting
1
(kDa)
2
3
4
5
75
50
Sample: PM036-PN (10 μL/lane)
37
PM038
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
[免疫原]
GATE-16 N末端領域( 合成ペプチド)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
IH*: 文献報告あり
[備 考]
LC3、GABARAP とは反応しません。
< 参考文献 >
1) Klionsky, D. J., et al ., J. Cell Sci. 118, 7-18 (2005)
2) Tanida, I., et al ., J. Biol. Chem. 277, 13739-13744 (2002)
25
20
Western blotting
LC3-I
LC3-II
15
1
(kDa)
50
Lane 1: Anti-LC3 pAb (MBL; code no. PM036), 1:1,000
Lane 2: Anti-LC3 pAb (MBL; code no. PD014), 1:1,000
Lane 3: Anti-LC3 pAb (MBL; code no. PM046), 1:1,000
Lane 4: Anti-LC3 mAb (clone: 8E10) (MBL; code no. M186-3), 1 μg/mL
Lane 5: Anti-LC3 mAb (clone: 4E12) (MBL; code no. M152-3), 10 μg/mL
2
3
37
25
20
Lane 1: LC3 transfectant
Lane 2: GABARAP transfectant
Lane 3: GATE-16 transfectant
15
GABARAP
M135-3
Atg3
1F4
Mo IgG1
100 μg/100 μL
¥48,000
M133-3
3E8
Mo IgG2bκ 100 μg/100 μL
[免疫原]
ヒト GABARAP N末端領域( 合成ペプチド)
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg3 (1-314 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1 μg/mL
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IC*: 文献報告あり
IP: 2.5 μg/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IH*: 文献報告あり
IC: 0.5 μg/mL
< 参考文献 >
1) Klionsky, D. J., et al ., J. Cell Sci. 118, 7-18 (2005)
2) Tanida, I., et al ., J. Biol. Chem. 277, 13739-13744 (2002)
2
3
Western blotting
4
5
6
7
(kDa)
1
2
3
4
5
6
7
8
50
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: Jurkat
Lane 4: NIH/3T3
Lane 5: WR19L
Lane 6: Rat1
Lane 7: PC12
Lane 8: CHO
35
GABARAP-I
15
30
GABARAP-II
10
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: Raji
Lane 4: NIH/3T3
Lane 5: Rat1
Lane 6: PC12
Lane 7: CHO
GABARAP
PM037
Atg3
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
¥48,000
PM034
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
[免疫原]
GABARAP N末端領域( 合成ペプチド)
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg3
100 μL
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
[使用法]
WB: 1:1,000
IC: 1:100
IC: 1:50
[備 考]
GATE-16、LC3 とは反応しません。
< 参考文献 >
1) Klionsky, D. J. et al ., J. Cell Sci. 118, 7-18 (2005)
2) Tanida, I., et al ., J. Biol. Chem. 277, 13739-13744 (2002)
< 参考文献 >
1) Klionsky, D. J., et al ., J. Cell Sci. 118, 7-18 (2005)
2) Tanida, I., et al ., J. Biol. Chem. 277, 13739-13744 (2002)
Western blotting
1
2
3
50
35
25
15
Lane 1: LC3 transfectant
Lane 2: GABARAP transfectant
Lane 3: GATE-16 transfectant
¥38,000
Western blotting
(kDa)
37
20
¥48,000
< 参考文献 >
1) Klionsky, D. J., et al ., J. Cell Sci. 118, 7-18 (2005)
2) Tanida, I. et al ., J. Biol. Chem. 277, 13739-13744 (2002)
Western blotting
(kDa) 1
30
25
(kDa)
50
¥48,000
30
1
2
3
4
5
6
7
8
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: Raji
Lane 4: NIH/3T3
Lane 5: WR19L
Lane 6: Rat1
Lane 7: PC12
Lane 8: CHO
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
5
Atg4B
Atg7
M134-3
9H5
Mo IgG1
100 μg/100 μL
¥48,000
PM039
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg4B (1-393 a.a.)
[免疫原]
ヒト Atg7C末端領域( 合成ペプチド)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo(-), Rat(-), Hm(-)
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1 μg/mL
[使用法]
WB: 1:1,000-1:2,000
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
< 参考文献 >
1) Yoshimura, K., et al ., Autophagy 2, 200-208 (2006)
2) Kumanomidou, T., et al ., J. Mol. Biol. 355, 612-618 (2006)
< 参考文献 >
1) Komatsu, M., et al ., J. Cell Biol. 169, 425-434 (2005)
2) Yu, L., et al ., Science 304, 1500-1502 (2004)
Western blotting
(kDa)
1
2
3
4
5
6
Western blotting
7
(kDa)
97
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: Raji
Lane 4: NIH/3T3
Lane 5: Rat1
Lane 6: PC12
Lane 7: CHO
66
45
¥38,000
1
2
3
4
5
75
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: Raji
Lane 4: HL-60
Lane 5: Jurkat
50
LC3 に結合して選択的に分解される p62
p62/SQSTM1 は LC3 に直接結合し、オートファジーにおい
■ Immunohistochemistry
て選択的に分解される基質と考えられている注目分子です。
抗 p62/SQSTM1 抗体は WB、IP、IC、IH の様々なアプリケー
ションに使用できることから、p62 による疾病発症と分子レベ
ルの動態観察に有用です。
ユビキチン結合タンパク質 p62/SQSTM1 は TRAF6, ERK,
aPKC などのシグナル伝達を担う多彩な分子群と相互作用す
るためスカフォールドタンパク質と考えられています。最近、
p62 はオートファゴソームマーカーである LC3 に直接結合し、
オートファジーにより選択的に分解される事が判明しました。
Human Liver Carcinoma
(Female, age 48, Grade Ⅱ)
実際、肝臓または脳特異的オートファジー欠損マウスにおいて
は、p62 は過剰に蓄積し、ユビキチン・p62 陽性の封入体が
形成されました。重要なことに、ユビキチン・ p62 陽性封入体
抗体:Anti-p62 pAb (code no. PM045)
ヒト肝臓癌組織においてp62陽性封入体が検出されました。
は、アルツハイマー病、パーキンソン病、筋萎縮性側索硬化症
などの神経変性疾患やアルコール性肝炎、脂肪肝、肝癌患者組
織においても確認されています。現在、これら疾患の発症とオー
トファジーによる p62 代謝不全の関連に注目が集まっています。
p62/SQSTM1
M162-3
5F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト p62 (120-440 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo(-), Rat(-), Hm(-)
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IP: 2 μg/250 μL of cell extract from 2.5x106 cells
¥48,000
IC: 5 μg/mL
IH: 2-10 μg/mL(パラフィン切片は熱処理が必要です。)
FCM: 2 μg/mL
< 参考文献 >
1) Ichimura, Y., et al ., J. Biol. Chem. 283, 22847-22857 (2008)
2) Komatsu, M., et al ., Cell 131, 1149-1163 (2007)
6
Immunohistochemistry
Immunoprecipitation
(kDa)
1
2
75
50
37
Human liver carcinoma
p62
IgG heavy chain
Sample: HeLa
Lane 1: Isotype control
(MBL; code no. M075-3)
Lane 2: Anti-p62 mAb (M162-3)
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
p62/SQSTM1
M162-A48 5F2
Alexa Fluor® 488
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト p62 (120-440 a.a.)
p62/SQSTM1
¥58,000
PM045
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト p62 (120-440 a.a.)
[交差性]
Hu
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
1 mg/mL in PBS/1% BSA/0.09% NaN3
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
IC: 2 μg/mL
[使用法]
WB: 1:1,000
FCM: 1 μg/mL
IP: 2 μL/300 μL of cell extract from 1x107 cells
IC: 1:500
IH: 1:1,000(パラフィン切片は熱処理が必要です。)
< 参考文献 >
1) Ichimura, Y., et al ., J. Biol. Chem. 283, 22847-22857 (2008)
2) Komatsu, M., et al ., Cell 131, 1149-1163 (2007)
¥38,000
< 参考文献 >
1) Myeku, N., and Figueiredo-Pereira, M. E., J. Biol. Chem. 286, 22426-22440 (2011)
2) Waguri, S., and Komatsu, M., Methods Enzymol. 453, 181-196 (2009)
Immunocytochemistry
Western blotting
(kDa)
1
2
3
4
5
6
100
75
p62
50
A549(飢餓状態)
Lane 1: HeLa
Lane 2: 293T
Lane 3: MEF
Lane 4: NIH/3T3
Lane 5: PC12
Lane 6: CHO
37
A549(栄養状態)
25
p62/SQSTM1
M162-A59 5F2
Alexa Fluor® 594
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
p62 C-terminal
¥58,000
PM066
Polyclonal
Guinea Pig Ig (aff.) 100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト p62 (120-440 a.a.)
[免疫原]
ヒト p62 C末端領域( 合成ペプチド)
[交差性]
Hu
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
1 mg/mL in PBS/1% BSA/0.09% NaN3
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
IC: 5 μg/mL
[使用法]
WB: 1:1,000
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IC: 1:500
IH: 1:100
< 参考文献 >
1) Ichimura, Y., et al ., J. Biol. Chem. 283, 22847-22857 (2008)
2) Komatsu, M., et al ., Cell 131, 1149-1163 (2007)
Immunocytochemistry
< 参考文献 >
1) Komatsu, M., et al ., Cell 131, 1149-1163 (2007)
2) Moscat, J., et al ., Mol. Cell 23, 631-640 (2006)
Western blotting
(kDa)
100
75
A549(飢餓状態)
p62/SQSTM1
2
3
4
5
6
7
8
9
Immunohistochemistry
10
p62
25
Alexa Fluor® 647
Mo IgG1κ
1
37
A549(栄養状態)
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
M162-A64 5F2
100 μg/100 μL
¥58,000
1:
2:
3:
4:
5:
HeLa
293T
MEF
NIH/3T3
PC12
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
6: CHO
7: Mouse brain
8: Mouse liver
9: Mouse spleen
10: Mouse kidney
Human liver carcinoma
p62 C-terminal (HRP-DirecT)
PM066-7
Polyclonal
HRP標識
Guinea Pig Ig (aff.) 50 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト p62 (120-440 a.a.)
[免疫原]
ヒト p62 C末端領域( 合成ペプチド)
[交差性]
Hu
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
1 mg/mL in PBS/1% BSA/0.09% NaN3
[性 状]
PBS/Preservative/Stabilizer
[使用法]
IC: 5 μg/mL
[使用法]
WB: 1:1,000
FCM: 1 μg/mL
< 参考文献 >
1) Komatsu, M., et al ., Cell 131, 1149-1163 (2007)
2) Moscat, J., et al ., Mol. Cell 23, 631-640 (2006)
< 参考文献 >
1) Ichimura, Y., et al ., J. Biol. Chem. 283, 22847-22857 (2008)
2) Komatsu, M., et al ., Cell 131, 1149-1163 (2007)
Western blotting
(kDa)
Immunocytochemistry
100
75
50
37
25
A549(飢餓状態)
¥38,000
1 2
3 4
5
6 7
8 9
10
Lane
Lane
Lane
p62 Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
¥48,000
1: HeLa
2: HEK293T
3: MEF
4: NIH/3T3
5: PC12
6: CHO
7: Mouse brain
8: Mouse liver
9: Mouse spleen
10: Mouse kidney
A549(栄養状態)
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
7
リン酸化部位によって機能が制御されているリン酸化 p62
p62 はユビキチン化タンパク質凝集体に結合し、
ター分子として働くことが提唱されています。近
年、p62 は様々な部位がリン酸化され、それぞれ
Ser405 (マウス)
Ser403 (ヒト)
Ser351 (マウス)
Ser349 (ヒト)
その凝集体をオートファゴソームへ導くアダプ
p62
PB1
zz
TB
LIR KIR
UBA
の部位のリン酸化により p62 の機能が制御され
ていることが見いだされました。
p62 の Ser403 がリン酸化されると、ポリユビキチン鎖と p62 の親和性が上昇し、ポリユビキチン化タンパク質のオート
ファジーによる分解が促進されることが報告されました。これにより、アルツハイマー病、パーキンソン病、ハンチントン病など、
細胞内に異常に蓄積したタンパク質(凝集体)が細胞の機能を障害することで発症すると考えられている神経変性疾患において、
p62 の Ser403 のリン酸化を特異的に促進する薬剤の開発が治療への応用につながる可能性が示唆されています。
p62 の Ser351 がリン酸化されると、ユビキチンリガーゼアダプタータンパク質である Keap1 との結合親和性が著しく上
昇します。リン酸化 p62 (Ser351) が Keap1 と結合することにより、多くの抗酸化タンパク質の遺伝子発現を制御している
転写因子 Nrf2 が安定化して核内へ移行し、一連の生体防御遺伝子の発現を誘導します。(リン酸化 p62 と Keap1 の複合体は、
最終的にオートファジーにより分解されます。)また、Nrf2 の安定化により細胞増殖関連遺伝子の発現も上昇するため、リン
酸化 p62(Ser351)と Keap1 との相互作用に対する阻害剤が、がんの治療薬になる可能性も報告されています。
Phospho-p62 (Ser403)
Phospho-p62 (Ser403)
D343-3
4F6
Rat IgG2aκ 100 μg/100 μL
D344-3
¥48,000
4C8
Rat IgG2aκ 100 μg/100 μL
[免疫原]
ヒト p62 (396-410 a.a.)( 合成ペプチド)
[免疫原]
ヒト p62 (396-410 a.a.)( 合成ペプチド)
[交差性]
Hu, Mo
[交差性]
Hu, Mo
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 5 μg/mL
[使用法]
WB: 5 μg/mL
IH: 10 μg/mL
IH: 5 μg/mL
< 参考文献 >
1) Matsumoto, G., et al ., Mol. Cell. 44, 279-289 (2011)
Immunohistochemistry
Western blotting
(kDa)
1
2
< 参考文献 >
1) Matsumoto, G., et al ., Mol. Cell. 44, 279-289 (2011)
3
4
150
100
GFP-tagged Phospho-p62
75
Phospho-p62
50
37
Lane 1: GFP-tagged human p62/Neuro2a
Lane 2: GFP-tagged human p62/Neuro2a,
Bafilomycin A1-treated (1 μM, 24 hr.)
Lane 3: MEFAtg5-/Lane 4: MEF
25
20
GFP-tagged human p62発現Neuro2a細胞ご提供:
順天堂大学 貫名 信行 先生・松本 弦 先生
MEFAtg5−/−細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
Atg5 conditional knockout
Wild type
Brown: Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb (D343-3)
Blue: Hematoxylin
サンプルご提供:順天堂大学 貫名 信行 先生・松本 弦 先生
Immunohistochemistry
Atg5 conditional knockout
Wild type
Brown: Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb (D343-3)
Blue: Hematoxylin
サンプルご提供:順天堂大学 貫名 信行 先生・松本 弦 先生
8
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
¥48,000
Phospho-p62 (Ser351)
PM074
Polyclonal
NRF2
Rab Ig (aff.)
100 μL
¥48,000
PM069
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
[免疫原]
マウス p62 (346-359 a.a.)( 合成ペプチド)
[免疫原]
リコンビナントヒト NRF2 (1-605 a.a.)
100 μL
[交差性]
Hu, Mo
[交差性]
Hu, Mo(w), Rat(w), Hm(w)
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:500
[使用法]
WB: 1:1,000
IC: 1:500
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IH: 1:1,000
IC: 1:1,000
IH: 1:1,000
< 参考文献 >
1) Ichimura, Y., et al ., Mol. Cell 51, 618-631 (2013)
< 参考文献 >
1) Taguchi, K., et al., Genes Cell 16, 123-140 (2011)
2) Komatsu, M., et al ., Nat. Cell Biol. 12, 213-223 (2010)
3) Nguyen, T., et al ., J. Biol. Chem. 284, 13291-13295 (2009)
Western blotting
(kDa)
150
100
75
1
2
3
4
5
6
Western blotting
(kDa)
150
Phospho-p62 (Ser351)
50
1
2
3
Lane 1: MEF, sodium arsenite-treated
(10 μM, 12 hr.)
Lane 2: MEF
Lane 3: MEFAtg5-/-
Lane 4: huH-1
Lane 5: huH-1, λ-phosphatase-treated
Lane 6: p62-knockout huH-1
亜ヒ酸ナトリウム処理MEF細胞、p62ノックアウトhuH-1細胞ご提供:
新潟大学 小松 雅明 先生・東京都医学総合研究所 一村 義信 先生
MEFAtg5−/−細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
Immunocytochemistry
Immunocytochemistry
4
100
37
¥48,000
NRF2
75
50
Lane 1: NRF2 transfectant
Lane 2: 293T
Lane 3: HeLa
Lane 4: A549
HeLa
Immunohistochemistry
MEF, sodium arsenite-treated MEF
(20 μM, 6hr)
huH-1
Green: Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser351) pAb (PM074)
Blue: DAPI
亜ヒ酸ナトリウム処理MEF細胞ご提供:
新潟大学 小松 雅明 先生・東京都医学総合研究所 一村 義信 先生
NRF2
M200-3
1F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト NRF2 (1-605 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IC: 0.5 μg/mL
IH: 1 μg/mL
¥48,000
Human cancer tissue
Upper: Lung carcinoma (different fields)
Lower: Colon carcinoma (different fields)
< 参考文献 >
1) Nguyen, T., et al ., J. Biol. Chem. 284, 13291-13295 (2009)
Western blotting
(kDa)
1
2
3
4 5
150
100
75
Immunoprecipitation
(kDa)
1
2
150
100
75
50
50
37
Lane 1: NRF2 transfectant
Lane 2: HeLa
Lane 3: PC12
Lane 4: CHO
Lane 5: NIH/3T3
Immunocytochemistry
HeLa
Sample: HeLa
Lane 1: Isotype control
(MBL; code no. M075-3)
Lane 2: Anti-NRF2 mAb (M200-3)
Immunohistochemistry
Human lung carcinoma
Brown: Anti-NRF2 mAb (M200-3)
Blue: Hematoxylin
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
9
Atg9 と Atg2-Atg18 複合体
オートファジーが細胞内のどこで誘導されるかは不明ですが、酵母においては Atg タンパク質が集中して集まる前オートファゴ
ソーム構造体(pre-autophagosomal structure: PAS)がその形成開始部位と考えられています。
ATG9 遺伝子を欠損した出芽酵母では多くの Atg タンパク質が PAS 局在を失うことから、Atg9 は PAS 形成の初期に何らかの
機能をしていると考えられています。PAS 上の Atg9 には Atg2 と Atg18 の複合体が結合しています。Atg18 はホスホイノシチド
3- リン酸(PI3P)と結合することが知られていますが、この複合体の機能は現在までのところ不明です。ATG18 と ATG2 に変異
をもつ酵母では PAS に Atg9 が高度に蓄積することが示されています。一方、オートファゴソーム上には Atg9 は局在しないことから、
PAS から Atg9 が離脱する仕組みが存在しているはずです。Atg2-Atg18 複合体がその過程に関与しているのかもしれません。
Atg2A
Atg9A
PD041
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
¥48,000
PD042
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg2A (700-1,400 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントマウス Atg9A (506-839 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
[使用法]
WB: 1:500
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IP: 2.5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IC: 1:400
IC: 1:400
< 参考文献 >
1) Velikkakath, A. K., et al ., Mol. Biol. Cell 23, 896-909 (2012)
Western blotting
1
(kDa)
2
< 参考文献 >
1) Itakura, E., et al ., J. Cell Sci. 125, 1488-1499 (2012)
Immunoprecipitation
Immunocytochemistry
3
(kDa) 1 2
4
250
Atg2A
150
Lane
Lane
Lane
Lane
100
1:
2:
3:
4:
293T
MEF
PC12
CHO
¥48,000
Immunocytochemistry
150
Lane 1: Isotype control
(MBL; code no. PM035)
Lane 2: Anti-Atg9A pAb (PD042)
100
Atg9A
75
IgG
50
HeLa(飢餓状態)
A549
Atg12-Atg5 共有結合体と複合体を形成する Atg16L
Atg16L は Atg12-Atg5 共有結合体と約 800 kDa の複合体を形成しています(次ページ Atg12 結合反応系参照)。この
Atg16L 複合体は栄養飢餓状態では隔離膜に局在し、LC3 とホスファチジルエタノールアミン (PE) の結合を促進します。また、
Atg16L 遺伝子欠損マウスではオートファゴソームの形成が認められないことから、Atg16L はオートファジーに必須の因子で
ある事が明らかとなっています。
Atg16L は酵母 Atg16 と高い相同性を持っていますが、酵母 Atg16L と異なり C 末端に大きな WD リピートドメインを持っ
ています。原因不明の炎症性腸疾患であるクローン病の感受性 1 塩基多型 (SNP) がこの WD リピート中に見出されており、ク
ローン病と Atg16L との関連の更なる解析が待たれます。
Atg16L
M150-3
Atg16L
1F12
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
¥48,000
PM040
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト ATG16L1 TV2 (85-588 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト ATG16L1 TV2 (85-588 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1 μg/mL
[使用法]
WB: 1:1,000
IH*: 文献報告あり
IP: 2.5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
<参考文献>
IC: 1:200-1:500
1) Matsushita, M., et al ., J. Biol. Chem. 282, 6763-6772 (2007)
Image-based FCM*: 文献報告あり
Western blotting
(kDa)
2
3
4
5
6
7
97
Atg16L
66
β
α
45
30
10
1
< 参考文献 >
1) Matsushita, M., et al ., J. Biol. Chem. 282, 6763-6772 (2007)
Immunoprecipitation
Lane 1: HeLa
Lane 2: 293T
Lane 3: Jurkat
Lane 4: Raji
Lane 5: NIH/3T3
Lane 6: WR19L
Lane 7: Rat1
(kDa)
75
50
1
2
Sample: HeLa
Atg16Lβ
Atg16Lα
IgG heavy chain
Lane 1: Isotype control
Lane 2: Anti-Atg16L pAb (PM040)
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
¥38,000
Atg12 結合反応系
E1
Atg7
E2
Atg12
Atg10
Atg7
ユビキチン様タンパク質である Atg12 は他のユビキチン様タンパク質と異
なって C 末がグリシンであり、プロセシングを受けません。E1 は Atg8 と共
Atg12系
Atg12
Atg12 Atg10
通の Atg7 です。E2 である Atg10 に渡されたのち、基質の Atg5 に転移され
ます。この Atg12-Atg5 結合体は Atg16 と複合体を形成します。Atg16 は自
基質 Atg5 Atg12
己多量体化するため、Atg12-Atg5-Atg16 結合体はより大きな複合体を形成
します。この複合体の機能は不明ですが、酵母では前オートファゴソーム構
Atg5 Atg12
造体である PAS への局在に必須であることが示されています。
Atg16
Atg16
Atg5 Atg12
Atg5
Atg12
PM050
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
¥38,000
M154-3
6E5
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
[免疫原]
ヒト Atg5 の C末端領域( 合成ペプチド)
[免疫原]
ヒト Atg12 の internal reagion( 合成ペプチド)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm(-)
[交差性]
Hu, Mo(-), Rat(-), Hm(-)
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:500
[使用法]
WB: 1 μg/mL
[ 備 考 ] Atg5-Atg12 複合体に反応します。
IP: 5 μg/250 μL of cell extract from 1x107 cells
< 参考文献 >
1) Myeku, N., and Figueiredo-Pereira, M. E., J. Biol. Chem. 286, 22426-22440 (2011)
2) Hanada, T., et al ., J. Biol. Chem. 282, 37298-37302 (2007)
IC: 10 μg/mL
[備 考]
1
2
3
4
5
6
ヒト Atg5-Atg12 複合体に反応します。Atg12 は大半が Atg5 と複
合体を形成して存在しているため、Atg12 モノマーはほとんど検出
Western blotting
(kDa)
されません。
7
< 参考文献 >
1) Mizushima, N., et al ., J. Cell Sci. 116, 1679-1688 (2003)
2) Mizushima, N., et al ., FEBS Lett. 532, 450-454 (2002)
100
75
Atg5-Atg12 complex
50
Immunoprecipitation
37
(kDa)
1
2
3
4
5
Mouse IgG
75
Lane 1: MEFAtg5-/Lane 2: MEF
Lane 3: NIH/3T3
Lane 4: HeLa
¥48,000
Atg5-Atg12 complex
50
Lane 5: 293T
Lane 6: NRK
Lane 7: PC12
35
30
MEFAtg5-/-細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
Sample:
Lane 1, 2, 5: HeLa
Lane 3, 4: 293T
Lane 1, 3: Isotype control
Lane 2, 4: Anti-Atg12 mAb (M154-3)
Atg5
Atg10
M153-3
4D3
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
¥48,000
M151-3
5A7
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg5 (1-275 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg10 (1-220 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat(-), Hm
[交差性]
Hu
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 2-5 μg/mL
[使用法]
WB: 2 μg/mL
[備 考]
Atg5-Atg12 複合体に反応しますが、Atg5 モノマーには反応しま
IH*: 文献報告あり
せん。
< 参考文献 >
1) Nemoto, T. et al ., J. Biol. Chem. 278, 39517-39526 (2003)
2) Kabeya, Y. et al ., EMBO J. 19, 5720-5728 (2000)
< 参考文献 >
1) Hanada, T., et al ., J. Biol. Chem. 282, 37298-37302 (2007)
2) Pyo, J. O., et al ., J. Biol. Chem. 280, 20722-20729 (2005)
Western blotting
(kDa)
105
75
50
30
25
15
1
2
3
Western blotting
(kDa)
4
5
6
50
Atg5-Atg12 complex
Lane1: MEFAtg5-/Lane2: MEF
Lane3: NIH/3T3
Lane4: CHO
Lane5: HeLa
Lane6: 293T
¥48,000
35
30
25
1
2
3
4
Lane
Lane
Lane
Lane
1: HeLa
2: 293T
3: A431
4: Myc tag-Atg10
Myc tag-Atg10
Atg10
MEFAtg5-/-細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
11
栄養センサーの mTOR に制御される
ULK1-Atg13-FIP200 複合体
ULK1/Atg1 はオートファジーに必須のセリンスレオニンキナーゼです。哺乳類において ULK1 は普段 Atg13 と FIP200 と
ともに巨大な複合体を形成していますが、Atg13 と ULK1 は mTOR(target of rapamycin)によって高レベルにリン酸化され
ることで不活化しています。一方、栄養が枯渇すると、mTOR は ULK1-Atg13-FIP200 複合体から解離し、ULK1 と Atg13
のリン酸化レベルが減少します。それによって、ULK1-Atg13-FIP200 複合体は隔離膜に局在化するとともに ULK1 のキナー
ゼ活性が回復し、オートファジーが進行すると考えられています。
Atg13
Atg13
PD036
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
¥48,000
M183-3
5G4
Mo IgG2aκ 100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg13 (1-518 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg13 (1-518 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo(-)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:500
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IP: 4 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IP: 2 μg/300 μL cell extract from 3x106 cells
< 参考文献 >
1) Ganley, I. G. et al ., J. Biol. Chem. 284, 12297-12305 (2009)
2) Jung, C. H. et al ., Mol. Biol. Cell 20, 1992-2003 (2009)
< 参考文献 >
1) Ganley, I. G. et al ., J. Biol. Chem. 284, 12297-12305 (2009)
2) Hosokawa, N., et al ., Mol. Biol. Cell. 20, 1981-1991 (2009)
Western blotting
(kDa)
1
2
Western blotting
3
(kDa)
50
1
2
3
4
5
6
100
100
75
¥48,000
75
Atg13
Atg13
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: A549
50
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
1:
2:
3:
4:
5:
6:
HeLa
293T
NIH3T3
MEF
Rat1
CHO
クラスⅢ PI3 キナーゼ複合体としての
Atg14, Beclin1, Rubicon, UVRAG
酵母 Atg14 はオートファジー必須因子として同
定されていましたが、その哺乳類ホモログは見つ
かっていませんでした。近年哺乳類ホモログとし
オートファゴソーム形成
Atg5Atg12 etc.
p62
ubiquitin
て Atg14L が同定されました。Atg14L は Beclin1、
Vps34、p150 とクラス III PI3K 複合体を形成して
います。この Atg14L 複合体は隔離膜への局在を示
オートファゴソーム融合過程
LC3
融合
し、オートファジー初期段階におけるオートファゴ
ソーム形成の正の制御因子として機能していること
Atg14L
UVRAG
がわかっています。また、Atg14L は隔離膜やオー
Beclin1
Beclin1
トファゴソームに加えて小胞体膜にも局在する事が
hVps34
p150
hVps34
UVRAG
Endosome/
lysosome
p150
Beclin1 Rubicon
hVps34
p150
わかっており、オートファゴソーム形成に小胞体が
重要な役割を果たしている可能性も示唆されていま
す。
輸送
エンドサイトーシス過程
一方、Beclin1、hVps34、p150、Rubicon、UVRAG 複合体は、オートファゴソーム / リソソーム融合過程 (Autophagosome
maturation) 及びエンドサイトーシス過程を制御することが報告されています。これらのことから、オートファジーとエンドサ
イトーシスという 2 つの重要な細胞機能を、Beclin1 を介して Atg14L と Rubicon が調節している可能性が考えられています。
12
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
Atg14
UVRAG
PD026
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
M160-3
¥48,000
1H4
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg14 (167-404 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト UVRAG (389-699 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm(-)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:500
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3 x106 cells
< 参考文献 >
1) Liang, C., et al ., Autophagy 3, 69-71 (2007)
2) Liang, C., et al ., Nat. Cell Biol. 8, 688-699 (2006)
< 参考文献 >
1) Matsunaga, K., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 385-396 (2009)
2) Itakura. E., et al ., Mol. Biol. Cell. 19, 5360-5372 (2008)
Western blotting
Immunoprecipitation
(kDa)
1
(kDa)
2
1
2
3
4
5
6
100
75
75
Atg14
IgG heavy chain
Sample: HeLa
Lane 1: Isotype control (MBL; code no. PM035)
Lane 2: Anti-Atg14 pAb (PD026)
50
37
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
50
37
1:
2:
3:
4:
5:
6:
HeLa
Jurkat
NIH3T3
WR19L
Rat1
CHO
Rubicon
Atg14
M184-3
4H8
Mo IgG2aκ 100 μg/100 μL
M170-3
¥48,000
1H6
Mo IgG2aκ 100 μg/100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Atg14 (167-404 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト Rubicon (722-972 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo(-), Rat(-)
[交差性]
Hu, Mo(-)
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1 μg/mL
[使用法]
WB: 1 μg/mL
IP: 2 μg/300 μL cell extract from 3x106 cells
< 参考文献 >
1) Matsunaga, K., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 385-396 (2009)
2) Zhong, Y., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 468-476 (2009)
< 参考文献 >
1) Zhong, Y., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 468-476 (2009)
2) Matsunaga, K., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 385-396 (2009)
Western blotting
(kDa)
1
2
3
4
¥48,000
Western blotting
(kDa)
1
2
3
5
150
100
75
Atg14
50
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
37
25
Rubicon
100
1: Atg14 transfectant
2: HeLa
3: 293T
4: A549
5: Jurkat
Lane 1: Rubicon transfectant
Lane 2: HeLa
Lane 3: A549
75
Rubicon
Beclin 1
PD017
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
PD027
¥38,000
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
[免疫原]
リコンビナントヒト Beclin 1 (1-450 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト Rubicon (722-972 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo(-)
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:1,000
[使用法]
WB: 1:1,000
IP: 2.5 μL/200 μL of cell extract from 5x106 cells
IP: 5 μL/300 μL of cell extract from 3x106 cells
IC: 1:100
IH*: 文献報告あり
< 参考文献 >
1) Matsunaga, K., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 385-396 (2009)
2) Zhong, Y., et al ., Nat. Cell Biol. 11, 468-476 (2009)
< 参考文献 >
1) Yu, L., et al ., Science 304, 1500-1502 (2004)
2) Kihara, A., et al ., EMBO Rep. 2, 330-335 (2001)
Western blotting
(kDa)
¥48,000
1
2
3
4
5
6
75
7
¥48,000
Western blotting
(kDa)
1
2
3
4
150
100
Rubicon
Nonspecific band
75
50
35
Lane 1: 293T
Lane 2: HeLa
Lane 3: Raji
Lane 4: NIH/3T3
Lane 5: WR19L
Lane 6: PC12
Lane 7: CHO
Lane 1: Rubicon transfectant
Lane 2: 293T
Lane 3: A549
Lane 4: HeLa
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
13
オートファジー関連注目分子
Syntaxin-17
VMP1
PM072
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100μL
¥38,000
PM076
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100μL
[免疫原]
リコンビナントヒト VMP1(131-217 a.a.)
[免疫原]
リコンビナントヒト Syntaxin-17 (1-302 a.a.)
[交差性]
Hu, Mo, Rat, Hm
[交差性]
Hu, Mo(-), Rat(-)
[性 状]
PBS/50% glycerol, pH 7.2
[性 状]
1 mg/mL in PBS/50% glycerol, pH 7.2
[使用法]
WB: 1:500
[使用法]
WB: 1:1,000
IP: 5 μL/2x106 cells/sample
IP: 2.5 μg/sample
IC: 1:2,000
< 参考文献 >
1) Itakura, E., et al ., Autophagy. 6, 764-76 (2010)
2) Itakura, E., et al ., J. Cell Biol. 192, 17-27 (2011)
< 参考文献 >
1) Itakura, E., et al ., Cell 151, 1256–1269 (2012)
Western blotting
(kDa)
150
100
75
1
2
3
4
5
6
7
8
50
37
25
20
¥48,000
Immunocytochemistry
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
Lane
1: VMP1 transfectant
2: 293T
3: A431
4: NIH/3T3
5: MEF
6: NRK
7: PC12
8: CHO
Green: Anti-Syntaxin-17 (Human) pAb (PM076)
Blue: DAPI
A549
MBL LC3 抗体のおすすめアプリケーション
PM036
M152-3
Polyclonal
様々なアプリケーションに使用できます
WB
IP
[ 免疫原 ]
[ 備 考 ]
[ 交差性 ]
IC
30
1
2
(kDa)
30
10
20
Lane
Lane
Lane
Lane
(kDa)
30
LC3-I
HA-LC3-I
LC3-II
HA-LC3-II
15
IC
WB
IP
FCM
Immuno
-EM
ヒト LC3B
LC3 A、B に反応します。
Hu, Mo, Rat, Hm
Immunocytochemistry
Western blotting
HeLa
3 NIH/3T3
4
1 2 3 4
25
20
細胞染色に最適です
[ 免疫原 ]
[ 備 考 ]
[ 交差性 ]
FCM
ヒト LC3B
LC3 A、B、C に反応します。
Hu, Mo, Rat, Hm
Immunoprecipitation
(kDa)
IH
Monoclonal (4E12)
Lane 1, 3: Normal Rabbit IgG
(MBL; code no. PM035)
Lane 2, 4:pAb
Anti-LC3
1: Anti-HA-tag
(MBL;pAb
code no. 561)
2: Anti-LC3 pAb(MBL;
(MBL;code
codeno.
no.PM036)
PM036)
3: Anti-LC3 mAb (MBL; code no. M115-3)
4: Anti-LC3 pAb (MBL; code no. PD014)
20
14
1
2
LC3-I
LC3-II
Lane 1: MEFAtg5−/−
Lane 2: Wild-type MEF
MEFAtg5-/-細胞ご提供:
東京大学 水島 昇 先生
Immunohistochemistry
NRK(飢餓状態)
NRK(栄養状態)
M186-3
Monoclonal (8E10)
WB でクリアーなデータが得られます WB
[ 免疫原 ]
[ 備 考 ]
[ 交差性 ]
ヒト LC3B
LC3 B に反応します。
Hu, Mo, Rat, Hm
Western blotting
Normal human liver
Normal human pancreas
Flow cytometry
(kDa)
37
1
2
3
4
(kDa)
37
5
25
10
Isotype control
Anti-LC3 栄養状態
Anti-LC3 クロロキン処理
14
7
8
25
20
15
6
20
LC3-I
LC3-II
15
10
LC3-I
LC3-II
Lane 1: HeLa
Lane 6: MEFAtg5−/−
Lane 2: NIH/3T3
Lane 7: MEF
Lane 3: PC12
Lane 8: MEF (6 hr. treatment with 50 μM Chloroquine)
Lane 4: CHO
MEFAtg5-/-細胞ご提供:東京大学 水島 昇 先生
Lane 5: Mouse brain tissue
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
Autophagy Ab Sampler Set
~人気の MBL オートファジー関連抗体をセットにしてご提供~
● オートファジー研究を始められる方
Anti-LC3
×3種類
LC3 positive
control
Anti-p62
Anti-Beclin 1
Anti-Atg5
Anti-Atg16L
● MBL オートファジー抗体を試してみたい方
● 数種類の抗体を少量ずつ揃えたい方
にオススメです!
製品コード
8485
製品名
包装
価格(税別)
Autophagy Ab Sampler Set
Antibodies: 25 μL each,
Positive control: 10 tests
¥80,000
<構成品>
製品コード
抗体名
クローン
アイソタイプ
容量
使用法
交差性
PM036Y
Anti-LC3 pAb
Polyclonal
Rabbit IgG
25 μL
WB, IP, FCM, IC, IH
Hu, Mo, Rat, Hm
M186-3Y
Anti-LC3 mAb
8E10
Mouse IgG2aκ
25 μL
WB
Hu, Mo, Rat, Hm
M152-3Y
Anti-LC3 mAb
4E12
Mouse IgG1κ
25 μL
WB, IP, FCM, IC, Immuno-EM
Hu, Mo, Rat, Hm
PD017Y
Anti-Beclin 1 pAb
Polyclonal
Rabbit Ig (aff.)
25 μL
WB, IP, IC
Hu, Mo, Rat, Hm
PM040Y
Anti-Atg16L pAb
Polyclonal
Rabbit Ig (aff.)
25 μL
WB, IP, IC
Hu, Mo, Rat, Hm
PM045Y
Anti-p62 (SQSTM1) pAb
Polyclonal
Rabbit Ig (aff.)
25 μL
WB, IP, IC, IH
Hu, Mo, Rat, Hm
PM050Y
Anti-Atg5 pAb
Polyclonal
Rabbit Ig (aff.)
25 μL
WB
Hu, Mo, Rat
PM036-PNY
Positive control for anti-LC3 antibody
100 μL
WB
My select
自由に選べる♪ サンプラーセット
● セット内容をカスタマイズできるサービスをご用意いたしました。
● 対象製品からお好きな抗体を 5 本以上お選びください。
● まとめ買いで更にお買い求めやすくなりますので、この機会に是非ご検討下さい。
※ My select sampler set 対象製品は、通常製品の 5 分の 1 容量となっております。
!
good
d!
goo数種類の抗体を
研究の立ち上げ時に!
少量ずつ揃えたい時に!
◎まとめ買いでどんどんお得♪
5~6 本
割引なし
7~9 本
10~12 本
13~15 本
5% OFF 10% OFF 15% OFF
16 本~
20% OFF
対象製品一覧・ご注文方法はウェブへ!
対象分野
● オートファジー抗体
● Loading control 抗体
● オルガネラマーカー抗体
● アイソタイプコントロール抗体
MBL 自由に選べる
検索
http://ruo.mbl.co.jp/special/my_select_sampler_set.html
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (-) 交差性なし (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified 使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
15
● オートファジー関連製品リスト
コード No.
製品名
クローン
アイソタイプ
容量
使用法
交差性
価格(税別)
PD041
Anti-Atg2A pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IP
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
M133-3
Anti-Atg3 mAb
3E8
Mo IgG2bκ
100 μg/100 μL
WB, IC, IP
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PM034
Anti-Atg3 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC
Hu, Mo, Rat, Hm
¥38,000
M134-3
Anti-Atg4B mAb
9H5
Mo IgG1
100 μg/100 μL
WB
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
M153-3
Anti-Atg5 mAb
4D3
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB
Hu, Mo, Hm
¥48,000
PM050
Anti-Atg5 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB
Hu, Mo, Rat
¥38,000
PM039
Anti-Atg7 (Human) pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IP
Hu
¥38,000
PD042
Anti-Atg9A pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IP, IC
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
M151-3
Anti-Atg10 (Human) mAb
5A7
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB, IH*
Hu
¥48,000
M154-3
Anti-Atg12 (Human) mAb
6E5
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB, IP, IC
Hu
¥48,000
M183-3
Anti-Atg13 mAb
5G4
Mo IgG2aκ
100 μg/100 μL
WB, IP
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PD036
Anti-Atg13 (Human) pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IP
Hu
¥48,000
M184-3
Anti-Atg14 (Human) mAb
4H8
Mo IgG2aκ
100 μg/100 μL
WB, IP
Hu
¥48,000
PD026
Anti-Atg14 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IP
Hu, Mo, Rat
¥48,000
M150-3
Anti-Atg16L mAb
1F12
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB, IH*
Hu, Mo, Rat
¥48,000
PM040
Anti-Atg16L pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IP, Image-based FCM*
Hu, Mo, Rat, Hm
¥38,000
PD017
Anti-Beclin 1 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IP, IH*
Hu, Mo, Rat, Hm
¥38,000
M135-3
Anti-GABARAP mAb
1F4
Mo IgG1
100 μg/100 μL
WB, lC*, IH*
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PM037
Anti-GABARAP pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PM038
Anti-GATE-16 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IH*
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
M115-3
Anti-LC3 mAb
51-11
Mo IgG1
100 μg/100 μL
WB, IH*
Hu, Mo, Rat
¥48,000
¥48,000
M152-3
Anti-LC3 mAb
4E12
Mo IgG1κ
200 μg/100 μL
WB, IC, IP, IH*, FCM, Immuno-EM,
Hu, Mo, Rat, Hm
Image-based FCM*
M186-3
Anti-LC3 mAb
8E10
Mo IgG2aκ
100 μg/100 μL
WB
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
M186-7
Anti-LC3 mAb-HRP-DirecT
8E10
Mo IgG2aκ
50 μL
WB
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PD014
Anti-LC3 pAb
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
WB, IC*, IH*
Hu, Mo, Rat, Hm
¥42,000
PD015
Anti-LC3 pAb
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
IC
Mo, Rat
¥42,000
PM036
Anti-LC3 pAb
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
WB, IC, IP, IH, FCM
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PM036-PN
LC3 Positive Control
PM046
Anti-LC3 pAb
Polyclonal
Rab IgG
100 μL
WB, IC
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
M200-3
Anti-NRF2 mAb
1F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB, IC, IP, IH
Hu, Mo, Rat
¥48,000
WB, IC, IP, IH
Hu, Mo(w), Rat(w),
Hm(w)
¥48,000
PM069
100μL (10 tests) WB
Anti-NRF2 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
¥5,000
PM045
Anti-p62 (SQSTM1) pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IP, IH
Hu, Mo, Rat, Hm
¥38,000
M162-3
Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb
5F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB, IC, IP, IH, FCM
Hu
¥48,000
M162-A48
Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb-Alexa Fluor ® 488 5F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
IC, FCM
Hu
¥58,000
M162-A59
Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb-Alexa Fluor ® 594 5F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
IC
Hu
¥58,000
M162-A64
Anti-p62 (SQSTM1) (Human) mAb-Alexa Fluor ® 647 5F2
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
IC, FCM
Hu
¥58,000
PM066
Anti-p62 C-terminal pAb
Polyclonal
Guinea Pig
Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IP, IH
Hu, Mo, Rat, Hm
¥38,000
PM066-7
Anti-p62 C-terminal pAb-HRP-DirecT
Polyclonal
Guinea Pig
Ig (aff.)
50 μL
WB
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
D343-3
Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb
4F6
Rat IgG2aκ
100 μg/100 μL
WB, IH
Hu, Mo
¥48,000
D344-3
Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser403) mAb
4C8
Rat IgG2aκ
100 μg/100 μL
WB, IH
Hu, Mo
¥48,000
PM074
Anti-Phospho-p62 (SQSTM1) (Ser351) pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IH
Hu, Mo
¥48,000
M170-3
Anti-Rubicon (Human) mAb
1H6
Mo IgG2aκ
100 μg/100 μL
WB
Hu
¥48,000
PD027
Anti-Rubicon (Human) pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IP
Hu
¥48,000
PM076
Anti-Syntaxin-17 (Human) pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IC, IP
Hu
¥48,000
M160-3
Anti-UVRAG mAb
1H4
Mo IgG1κ
100 μg/100 μL
WB
Hu, Mo, Rat, Hm
¥48,000
PM072
Anti-VMP1 pAb
Polyclonal
Rab Ig (aff.)
100 μL
WB, IP
Hu, Mo, Rat, Hm
¥38,000
交差性 : Hu: Human, Mo: Mouse, Rab: Rabbit, Hm: Hamster (w) 交差性弱い (aff.): affinity purified
使用法 : WB: Western Blotting, IP: Immunoprecipitation, FCM: Flow Cytometry, IC: Immunocytochemistry, IH: Immunohistochemistry, Immuno-EM: Immuno-electron microscopy
*: 論文で報告されております(MBL では未確認)
。
価格は 2014 年 6 月現在のものです。
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2014.06
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