No. 520 特集 Feature Articles 細胞の蛍光検出用試薬および蛍光標識二次抗体をご紹介 蛍光関連製品特集 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ p.4 細胞情報伝達 StressMarq 社の抗体 植物由来 Hsp 関連抗体 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ p.9 細胞培養 オリゴデンドロサイト前駆細胞/皮質ニューロンを単離培養できるキット Oligodendrocyte Progenitor Cell / Cortical Neuron Isolation Kit ・・・ p.18 遺伝子工学 細胞導入に適した mRNA を合成するキット mRNAExpress mRNA Synthesis Kit ・・・・・・・・・・・・・・・・・ p.22 OSDM PL-D に播種し直し,OGM で培養した OPC OSDM で培養した成熟オリゴデンドロサイト OSDM での培養により,ミエリンを有する成熟オリゴデンドロサイトが得られている (p.18 参照)。 p.7 120715s_p01_i.indd 2 2012/06/29 14:36:45 2 2012 年 7 月 15 日号 サイトカイン/増殖因子/ホルモン CONTENTS 特 集 蛍光関連製品特集 迅速・簡便なブタインスリン定量用 ELISA キット Mercodia ブタインスリン関連因子 ELISA キット (MRD 社) キャンペーン ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 17 ES / iPS 細胞の多能性状態を蛍光検出するキット ESC / iPSC Characterization Kit(PEP 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 4 細胞培養 食作用を蛍光観察するキット Phagocytosis Assay Kit(CAY 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ オリゴデンドロサイト前駆細胞/皮質ニューロンを単離培養できるキット 4 Oligodendrocyte Progenitor Cell / Cortical Neuron Isolation Kit (PGA 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 18 蛍光によるアポトーシス細胞検出用キット JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit(CAY 社)・・・ 5 蛍光法による細胞生死判定キット 生化学用一般試薬 Fluo Cell Double Staining Kit / Fluo Cell Counting Kit (MOB 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 細胞膜の可溶化に有用な非イオン性界面活性剤 5 MEGA-8 / MEGA-9 / MEGA-10(APC 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 19 蛍光色素を用いた細胞膜染色試薬 CellVue Kit for Fluorescent Cell Linker(MTT 社)・・・・・・・・・・・・・ 6 天然有機化合物/糖質 GFP のシグナル増幅,安定化用試薬 シアル酸糖鎖合成用試薬 7 GFP-Booster, ATTO 488(CHT 社) モニター募集 ・・・・・・・・・・・・・・・・・ シアリルガラクトース/シアリルラクトース (長良サイエンス(株))・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 19 イメージングに有用な蛍光標識二次抗体とストレプトアビジン NorthernLights 標識二次抗体/ストレプトアビジン (RSD 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ ヘパリン由来オリゴ糖(DLL 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 20 8 GAPDH を阻害する天然物 Koningic Acid((株)ティムス)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 20 抗 体 12 万点以上のラインナップを誇る抗体メーカー 遺伝子工学 Bioss 社 抗体(BIS 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 8 ヒートショックが不要なコンピテントセル Jet Competent Cell(BDL 社) キャンペーン ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 21 ギガ(109)レベルの形質転換効率! 細胞情報伝達 植物由来 Hsp 関連抗体(STQ 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 9 各種活性化物質/阻害物質(RSD 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10 Zip Competent Cell BL21 (DE3)(BDL 社) キャンペーン ・・・・・・・・・・・・・・ 21 蛍光による SIRT 活性測定アッセイキット SensoLyte SIRT Assay Kit(ANA 社) キャンペーン ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 10 mRNAExpress mRNA Synthesis Kit(SBI 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 22 Oligo Clean & Concentrator(ZYR 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 22 様々な動物種のイムノグロブリンを定量できるキット Immunoglobulin ELISA Kit(LDI 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 11 脂 質 宿主細胞由来 DNA の検出キット Host Cell DNA Kit(CYG 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 23 その他 P NMR を用いた定量的リン脂質分析受託サービス (AVT 社) 細胞導入に適した mRNA を合成するキット 高純度な DNA / RNA 精製キット 免疫化学 31 Giga Competent Cell (DH5α)(BDL 社) キャンペーン ・・・・・・・・・・・・・・・ 21 ヒートショック不要な発現用コンピテントセル ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 11 キャンペーン情報 ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 3 研究成果の製品化をお考えの方へ! ・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 3 タンパク質/酵素 目的のヒト組換え体タンパク質をヒト細胞で大量かつ迅速に産生 r-PEx 組換え体ヒトタンパク質産生受託サービス(UPE 社) ・・・ 12 コラゲナーゼ阻害・チロシナーゼ阻害・メラニン産生の研究に 皮膚研究用バイオアッセイ受託サービス((株)エーセル) ・・・・ 13 細胞外マトリックス分解酵素阻害物質スクリーニングキット (BVN 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 14 ユビキチン・プロテアソーム系の研究に有用です プロテアソーム阻害物質(RSD 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 14 Ready-to-use なウエスタンブロッティングキット ReliaBLOT Western Blot Kit(BET 社) キャンペーン ・・・・・・・・・・・・・・・・・・ 15 RTS 無細胞系タンパク質合成キット(FPR 社)・・・・・・・・・・・・・・・・・ 16 活性確認済みのヒトヘパラナーゼ 1 HepaOne Recombinant Human Heparanase-1(IST 社)・・・・・・・・・・ 17 120715s_p02-03_i.indd 2 2012/06/29 14:37:05 2012 年 7 月 15 日号 3 キャンペーンおよびモニター内容,対象製品等の詳細は,上記のフナコシホームページをご覧下さい。 PolyPlus-transfection 社 GeneTex 社 論文使用抗体 20% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日 jetPRIME, INTERFERin 20% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 9 月 30 日 ヒト超高感度 C-Peptide ELISA キット Bethyl Laboratories 社 ReliaBLOT Western Blot Kit 20% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日(p.17 参照) 30% OFF キャンペーン 期間:平成 24 年 7 月 15 日∼平成 24 年 9 月 30 日(p.15 参照) Novus biologicals 社 幹細胞マーカー抗体 40% OFF Omega Bio-tek 社 プラスミド Mini Kit Ⅰ Mercodia 社 キャンペーン 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日 期間:∼平成 24 年 9 月 30 日 Phoenix Pharmaceuticals 社 テフコ株式会社 25% OFF キャンペーン 全製品 30% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日 電気泳動槽 割引 キャンペーン 期間:∼平成 24 年 10 月 31 日 StemRD 社 PolyPlus-transfection 社 全製品 30% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日 System Biosciences 社 PSGro hESC / iPSC Medium 30% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日 AnaSpec 社 アッセイキット全品 20% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 8 月 31 日(p.10 参照) BioDynamics Laboratory 社 サマーキャンペーン 10 ∼ 25% OFF 期間:∼平成 24 年 8 月 31 日(p.21 参照) jetPRIME トランスフェクション試薬 モニター募集 (数量限定,なくなり次第終了) Oxford Biomedical Research 社 Total Antioxidant Power Kit & TBARS Assay Kit トライアル キャンペーン (数量限定,なくなり次第終了) Chromotek 社 GFP-Trap-A Kit モニター募集 (数量限定,なくなり次第終了)(p.7 参照) 研究成果の製品化をお考えの方へ! フナコシ (株)では,研究分野における更なる発展を目指して新 製品を探しております。 研究者にとって有益で付加価値の高い研究成果品がございまし たら,販売のお手伝いをさせて頂きます。 詳細については,是非当社までお問い合わせ下さい。 Tel. 03-5684-1653 Fax 03-5684-1654 e-mail:develop@funakoshi.co.jp 好評配布中 ! Cayman 社 Cayman Chemical 2012 (A4 変型版,360 ページ,英語版カタログ) 抗体,タンパク質,測定キットに加え,豊富 なラインナップの阻害物質を掲載しています。 ※カタログをご希望の方は,フナコシホームページのオンライン請求か,当 社営業担当(Fax 03-5684-1634)までお申し込み下さい。 NO T E ※本紙に記載されている価格は,2012 年 7 月 15 日現在です。 ※本紙に掲載されている製品は,すべて研究目的用にのみ販売しています。医薬品,診断用医薬品, 食品,食品検査等の用途には使用できません。 ※M印の製品は,「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律 (通称:カルタヘナ法)」使用規制対象となりますので,ご使用に際しては規制に則し,適切にお取 り扱い下さい。 ※D印の製品は,取り扱いに厳重な注意を要する製品であり,ご購入時に「使用目的確約書」が必 要になります。ご注文の際は,「使用目的確約書」に直筆でご記入の上,販売店経由で当社までお 送り下さい。確約書受領後に製品を発送させていただきます。また,これらの製品をご購入後は, 鍵の掛かる場所での保管をお願いいたします。 ※BC印の製品は,「毒物及び劇物取締法」に基づく医薬用外毒劇物です。法規制に従って,保管,廃 棄等して下さい。 ※c印の製品は,毒性があるため,取り扱いに注意または厳重な注意が必要です。 製品は,鍵の掛かる場所に保管して下さい。添付されているデータシートや商品ラベルをよくお読 み下さい。 ※A印の製品には安全にご利用いただくための警告ラベルが貼られています。表示に従って安全対策 を実施して下さい。 ※E印は,液体窒素中での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送していますが,製品到 着後,直ちに液体窒素中で保存して下さい。 ※−80 ℃ 印は,−80 ℃ での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送していますが,製品 到着後,直ちに−80 ℃ のフリーザー等に保存して下さい。 120715s_p02-03_i.indd 3 ※品名中の〈 〉は,別名を表します。(例 Anti - EGF〈Anti - Epidermal Growth Factor〉 ) ※説明文中の[ ]の数字は,Chemical Abstracts Service Registry Number(CAS番号)です。 ※略号:Mono : Monoclonal, Poly : Polyclonal, AAPu : Antigen Affinity Purified, PAPu : Protein A/G Affinity Purified, APu : Affinity Purified, Pu : Purified, AP : Alkaline Phosphatase, FAM : Mono - 5(and - 6)- Carboxyfluorescein, HRP : Horseradish Peroxidase, PE : Phycoerythrin, ChIP : Chromatin Immunoprecipitation, Dot : Dot Blotting, ELISA : Enzyme - linked Immunosorbent Assay, EMSA : Electrophoretic Mobility Shift Assay(Gel Shift Assay), FCM : Flow Cytometry, IC : Immunocytochemistry, IF : Immunofluorescence, IHC : Immunohistochemistry, IP : Immunoprecipitation, Neut : Neutralization, RIA : Radio Immuno Assay, West : Western Blotting ※外観・仕様は改善のため,予告なく変更することがあります。 ※ライフサイエンス関連分野におけるPCR用酵素およびPCR用酵素を含む製品やTaqManなどの検出 用プローブは,Life Technologies 社が特許を有しています。 使用に当たっては同社の許可が必要な場合があります。 ※記載されている会社および商品名は,各社の商標または登録商標です。 ※本紙には各メーカーから提供された画像・図表が掲載されています。なお,画像・図表の著作権は 各メーカーが保有しています。 ※表示価格に,消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので, あらかじめご了承下さい。 ※ご注文の際は, [品名,メーカー,商品コード,包装,数量]をお知らせ下さい。 2012/06/29 14:37:09 4 2012 年 7 月 15 日号 蛍光関連製品特集 NEW 染色例 細胞培養 幹細胞 抗体 ES / iPS 細胞の多能性状態を蛍光検出するキット ESC / iPSC Characterization Kit ES / iPS 細胞の多能性状態を確認できるキットです。ヒト 用およびマウス用の 2 種類の製品があります。 TRA-1-60 TRA-1-81 アルカリホスファターゼ Green Stain Kit(#ASK-3006G)を用いたヒト ES 細胞の染色像 品 名 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 メーカー 商品コード NEW キットに含まれる多能性マーカーについて Oct4 および Sox2 は,未分化の ES 細胞と胚性生殖細胞(EG 細胞) で高発現している転写因子です。SSEA-1 および SSEA-4 は,それ ぞれマウス ES 細胞のみ,ヒト ES 細胞表面でのみ発現している糖鎖 抗原です。TRA-1-60 および TRA-1-81 は,ヒト奇形腫幹細胞(EC 細胞) ,ヒト EG 細胞,ヒト ES 細胞で発現していますが,マウスの EC / EG / ES 細胞での発現は見られません。 ES / iPS PEP PEP ES / iPS PEP PEP 包装 / 価格(¥) Cell, Human, Characterization Kit (20 reactions) ASK-3006G Green Stain ASK-3006R Red Stain Cell, Mouse, Characterization Kit (20 reactions) ASK-3005G Green Stain ASK-3005R Red Stain 1 kit / 103,000 1 kit / 103,000 1 kit / 1 kit / 71,000 71,000 NEW 細胞培養 血球細胞 蛍光測定 食作用を蛍光観察するキット 特 長 ◆ 未分化マーカータンパク質の発現状態を解析することにより,ES / iPS 細胞の多能性状態を確認できるキットです。 ◆ 一般的な培養細胞を用いた免疫蛍光染色プロトコルに組み込むこと ができます。 ◆ Ready-to-use フォーマットで,簡便かつ迅速に多能性状態を確認 Phagocytosis Assay Kit 細胞の食作用を蛍光観察するキットです。本製品では,蛍光 標識したウサギ IgG でコートされたラテックスビーズを培地に 添加し,食作用によって取り込まれた蛍光ビーズを,フローサイ トメトリー/蛍光顕微鏡/蛍光プレートリーダーで検出します。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 できます。 ◆ 幹細胞に共通の多能性マーカーであるアルカリホスファターゼ(AP) の染色用試薬も含まれています。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ◆ 測定波長:励起 488 nm /蛍光 519 nm(Green Stain キット), 励起 590 nm /蛍光 617 nm(Red Stain キット) 特 長 ◆ 食作用に関わる調節因子などの探索に有用です。 ◆ 蛍光色素(FITC または PE)が異なる 2 種類の製品があります。 ◆ 測定波長:励起 485 nm /蛍光 535 nm(FITC) キット内容 励起 494 nm /蛍光 598 nm(PE) ヒト用 マウス用 Green Stain Red Stain Green Stain Red Stain 商品コード ASK-3006G ASK-3006R ASK-3005G ASK-3005R Anti-Oct4, rabbit-poly ● ● ● ● Anti-Sox2, rabbit-poly ● ● ● ● Anti-SSEA-4, mouse-mono ● ● − − Anti-SSEA-1, mouse-mono − − ● ● Anti-TRA-1-60, mouse-mono ● ● − − Anti-TRA-1-81, mouse-mono ● ● − − キット名 一次抗体 お問い合わせ先 試薬 二次抗体 キット内容 ● − ● − ● − ● − − ● − ● Alexa Fluor 594-labeled goat-anti-rabbit − ● − ● Fixation solution DNA staining solution Perm solution Blocking solution Mounting solution AP test solution ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ● ® Alexa Fluor 488-labeled goat-anti-rabbit ® Alexa Fluor 594-labeled goat-anti-mouse キット内容 ® 各種溶液 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 Alexa Fluor® 488-labeled goat-anti-mouse RAW264.7 細胞における食作用の蛍光顕微鏡による観察 RAW264.7 細胞を 96 ウェルプレートに播種し,一晩培養した。本製品(#600540) を添加して更に数時間インキュベートし,生細胞を Calcein AM(#400146)で 15 分間染色後,洗浄した。細胞の食作用を蛍光顕微鏡で観察した。 左図:食作用により RAW264.7 細胞に取り込まれた本製品(赤色) 右図:Calcein AM との重ね合わせ像 120715s_p04_k_n_i.indd 4 ● Latex beads-rabbit IgG-FITC complex(#500290 のみ) ● Latex beads-rabbit IgG-PE complex(#600540 のみ) ● Cell-based assay buffer tablet Phagocytosis Assay Kit, IgG CAY 500290 CAY 600540 B FITC PE ● Trypan blue 1 kit / 1 kit / 29,700 37,500 2012/06/29 14:37:31 2012 年 7 月 15 日号 細胞培養 蛍光染色 生死判定 蛍光測定 蛍光によるアポトーシス細胞検出用キット 蛍光法による細胞生死判定キット JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit Fluo Cell Double Staining Kit / Fluo Cell Counting Kit アポトーシスなどで変化したミトコンドリア膜電位差 (ΔΨ m)を蛍光検出できるキットです。親油性,陽イオン性 の蛍光色素 JC-1(5,5',6,6'-tetrachloro-1,1',3,3'tetraethylbenzimidazolylcarbocyanine iodide)を使用し た染色により,定性的かつ定量的に解析できます。 アポトーシスに伴い,ミトコンドリアは caspase 活性化物 質である cytochrome c などを放出することにより,電子伝 達系が変化し,膜電位差を消失することが知られています。こ のためミトコンドリア膜電位差は,細胞の生死を評価する指標 として利用されています。 蛍光関連製品特集 アポトーシス 膜電位消失 5 生細胞または死細胞を特異的に染色できる蛍光色素により, 細胞の生死を判定できるキットです。 特 長 ◆ キット中の Calcein-AM は疎水性が高く細胞膜を透過します。細胞 内でエステラーゼの作用により Calcein を生じ,強い緑色の蛍光を 発します(励起 490 nm /蛍光 515 nm)。 ◆ Double Staining Kit には生細胞の細胞膜を透過しない核酸染色色 素 Propidium Iodide(PI)が含まれており,死細胞を赤色蛍光で染 め分けることができます(励起 535 nm /蛍光 617 nm)。 特 長 ◆ Calcein と PI で二重染色した試料を 490 nm で励起することで, ◆ JC-1 は生細胞ではミトコンドリアに取り込まれて赤色蛍光を発しま すが,アポトーシスを起こした細胞ではミトコンドリアに取り込ま 蛍光顕微鏡により生細胞と死細胞を同時に観察できます(Double Staining Kit のみ)。 ◆ ラジオアイソトープや MTT アッセイのような可溶化処理が不要のた れず細胞質中で緑色蛍光を発します。 ◆ 蛍光顕微鏡,フローサイトメトリー,蛍光プレートリーダーを使用 め,操作が簡便です。 ◆ テトラゾリウム塩を用いた比色法と比べ高感度です。 して検出できます。 ◆ 測定波長:励起 520 ∼ 570 nm /蛍光 570 ∼ 610 nm(生細胞) ◆ 細胞毒性の測定にも応用できます。 励起 485 nm /蛍光 535 nm(アポトーシスを起こした 細胞) Calcein-AM R : acetoxymethyl Propidium Iodide 死細胞 生細胞 核 Calcein 細胞内エステラーゼの作用により 緑色蛍光を生じる HeLa 細胞を Double Staining Kit で 15 分間染色した。 キット内容 試薬 ● JC-1 reagent A:生細胞 B:死細胞 ● Assay buffer メーカー 商品コード JC-1 Mitochondrial Membrane Potential Assay Kit CAY 10009172 包装 / 価格(¥) 100 tests / 29,700 キット内容 ● Calcein-AM solution ● PI solution (Double Staining Kit のみ) 品 名 Cayman & SPI-BIO チャレンジ 他社アッセイキットを既にご使用になられているお客様に,同一測定 因子に対する Cayman 社および SPI-BIO 社の製品を無償でお試しいた だくキャンペーンです。 ※ 対象製品や,応募方法の詳細についてはフナコシホー ムページをご覧下さい。 120715s_p05_k_i.indd 5 メーカー 商品コード Fluo Cell MOB Fluo Cell MOB Double Staining Kit MFP-L224 Counting Kit MFP-C199 包装 / 価格(¥) 1 kit / 60,000 1 kit / 38,000 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 品 名 お問い合わせ先 Jurkat 細胞を 2.5 μg/ml の staurosporine で 2 時間処理し,JC-1 で染色した。未処 理の細胞は赤色を呈しているが(左図) ,staurosporine 処理細胞はミトコンドリア膜電 位差が低下し,ほとんどの細胞が緑に染色されていることから,アポトーシスを起こして いることがわかる(右図)。 DNA とのインターカレートにより 赤色蛍光を生じる 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です esterase 2012/06/29 14:38:01 6 蛍光関連製品特集 NEW 2012 年 7 月 15 日号 ×10−6 NEW 950 細胞培養 蛍光染色 900 蛍光色素を用いた細胞膜染色試薬 850 800 CellVue Kit for Fluorescent Cell Linker 培養細胞の生体染色,細胞トラッキングおよび増殖試験に最 適な蛍光色素による細胞膜染色試薬キットです。 長鎖の脂肪酸末端を持つ蛍光色素 CellVue Dye と,生理塩 やバッファー成分,有機溶媒を含まない等張水溶液である専用 希釈液 Diluent C をセットにした製品で,細胞の生存性を保持 しつつ,どのような細胞でも均一に効率良く細胞膜を染色可能 です。 特 長 750 700 650 CellVue Maroon(#C-1001) で標識した癌細胞標的小胞をマ ウス尾部の静脈から注射し,皮 下癌細胞を染色した(左)。 画像提供: Dr. Xiaoyang Qi (Children's Hospital of Cincinnati and Medical Center) and Bexion Pharmaceuticals 染色原理 蛍光色素 疎水性尾部 脂質二重層 ◆ 細胞間の移染が最小限に抑えられており,再現性の高い染色結果が 細胞質 得られます。 ◆ 迅速かつ均一な細胞膜染色が行えます。 ◆ 蛍光標識抗体や細胞機能マーカーと組み合わせて使用できます。 ◆ 細胞トラッキングや増殖モニタリングに最適です。 ◆ 紫外部および遠赤色∼近赤外までの蛍光波長を有する製品があり, 多重染色が可能です。また,既存の蛍光染色試薬と組み合わせて使 用することも可能です。 ◆ 遠赤色∼近赤外蛍光の製品は,バックグラウンドの原因となる自家 蛍光が低く抑えられており,高シグナル/ノイズ(S/N)比の結果 が得られます。 ◆ フローサイトメーターや in vivo イメージング機器でも使用可能です。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ◆ Mini Kit に は 0.1 ml,Midi Kit に は 0.2 ml,Maxi Kit に は 0.5 ml の CellVue dye stock と,それぞれのキットに適量の Diluent C が含まれています。 お問い合わせ先 試薬 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 品 名 励起/蛍光(nm) 詳 細 in vitro の細胞ラベリングや増殖研究に CellVue Lavender 420 / 461 (長波長紫外蛍光)有用。 in vitro の細胞トラッキングに有用。 CellVue Jade 478 / 508 (緑色蛍光) in vitro の細胞トラッキングに有用。 CellVue Red 567 / 588 (赤色蛍光) in vitro の細胞トラッキングや増殖モニ CellVue Maroon 647 / 667 (遠赤色蛍光) タ リ ン グ, 臓 器 細 胞 分 離 後 の 細 胞 ト ラッキングおよび免疫系細胞間の膜輸 送のモニタリングに有用。 in vitro の細胞トラッキングや増殖モニ CellVue Plum 652 / 671 (遠赤色蛍光) タリングに有用。 CellVue Burgundy 683 / 707 臓器細胞分離後の細胞トラッキングに (遠赤色/近赤外蛍光) 有用。 in vitro の細胞増殖モニタリングに有用。 CellVue NIR780 743 / 776 (近赤外蛍光) CellVue NIR815 786 / 814 短 期 間 の in vitro 細 胞 増 殖 研 究, 臓 器 (近赤外蛍光) 細胞分離後の細胞トラッキングおよび Odyssey Near Infrared Imaging System (Li-COR Biosciences 社)を用いた細 胞トラッキングに有用。 120715s_p06_k_n_i.indd 6 キット内容 ● CellVue dye stock ● Diluent C 品 名 メーカー 商品コード Fluorescent Cell Linker C-1005 MTT C-1005 MTT C-1005 MTT Fluorescent Cell Linker C-1001 MTT C-1001 MTT C-1001 MTT Fluorescent Cell Linker C-1009 MTT C-1009 MTT C-1009 MTT Fluorescent Cell Linker MTT C-1011 MTT C-1011 Fluorescent Cell Linker C-1003 MTT C-1003 MTT C-1003 MTT Fluorescent Cell Linker C-1004 MTT C-1004 MTT C-1004 MTT Fluorescent Cell Linker C-1007 MTT C-1007 MTT C-1007 MTT Fluorescent Cell Linker C-1006 MTT C-1006 MTT C-1006 MTT 包装 / 価格(¥) Kit, CellVue Mini Midi Maxi Kit, CellVue Mini Midi Maxi Kit, CellVue Mini Midi Maxi Kit, CellVue Mini Midi Kit, CellVue Mini Midi Maxi Kit, CellVue Mini Midi Maxi Kit, CellVue Mini Midi Maxi Kit, CellVue Mini Midi Maxi Lavender 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 1 kit / 1 kit / 30,000 63,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 29,000 61,000 96,000 Maroon Jade Red Plum Burgundy NIR780 NIR815 2012/06/29 14:38:26 2012 年 7 月 15 日号 7 GFP のみ 2 蛍光測定 1.5 GFP のシグナル増幅,安定化用試薬 GFP-Booster, ATTO 488 免疫細胞染色において,GFP のシグナルを増幅し,安定化 する試薬です。GFP 融合タンパク質を用いた細胞内局在観察 などに有用です。 1 GFP + GFP-Booster 0.5 蛍光関連製品特集 生化学用一般試薬 細胞染色 0 GFP のみ GFP+GFP-Booster, ATTO 488 核内で GFP 融合タンパク質を恒常的に発現している HeLa 細胞を用いて,GFP のみの 場合と,本製品を使用した場合の GFP シグナル強度を比較した。本製品で処理した場合, シグナル強度が約 2 倍となった。 GFP を用いた細胞染色の問題点 GFP(Green Fluorescent Protein)はオワンクラゲ由来の緑色 蛍光タンパク質です。組換え技術による GFP 融合タンパク質を用い た細胞内局在の観察など,バイオイメージングの分野で広く活用され ています。しかし GFP の蛍光は,核染色試薬 BrdU の検出に必要な HCl 処理や,FISH のためのクリックケミストリー試薬による標識反応, 熱変性処理などにより GFP シグナルが減弱してしまうという問題点 があります。本製品は,これらの染色処理を行った細胞における GFP シグナルを増強します。 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) GFP-Booster, ATTO 488 CHT gba488 100μg / 49,000 ■ RFP-Booster, ATTO 594 免疫細胞染色において,RFP のシグナルを増幅し,共染色を可能に する試薬です。RFP 融合タンパク質を用いた細胞内局在観察などに有 用です。 ※ RFP-Booster についての詳細は,フナコシホームページ(http:// www.funakoshi.co.jp/contents/5632)をご覧下さい。 特 長 RFP-Booster, ATTO 594 CHT rba594 ◆ 本製品は GFP と特異的に結合するラクダ科動物抗体由来タンパク質 「GFP-Trap」*を蛍光色素 ATTO 488 で標識した試薬です。細胞内 の GFP に特異的に結合し,ATTO 488 の蛍光により GFP のシグ ナルを増幅します。 ◆ 固定・透徹・ブロッキング処理を行った後,本製品をブロッキング 溶液で 1:200 の濃度になるように希釈し,約1時間インキュベー 常のプロトコルに容易に組み込めます。 ◆ wtGFP のほか,eGFP,YFP,eYFP のシグナル増幅にも使用でき 49,000 モニター募集 期間:在庫がなくなり次第終了 GFP 結合ビーズを用いたアフィニティ精製によって,細 胞 か ら GFP 融 合 タ ン パ ク 質 を 単 離 で き る キ ッ ト で す。 GFP と特異的に結合するラクダ科動物抗体由来タンパク質 「GFP-Trap」をアガロースビーズに結合させた製品(GFPTrap-A Kit)です。詳細はフナコシホームページ(http:// www.funakoshi.co.jp/contents/6034)をご覧下さい。 ます(CFP,eCFP には使用できません)。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です トするだけの簡単な操作です。 ◆ 処理した細胞は DAPI などの DNA 染色試薬による染色も可能で,通 GFP-Trap-A Kit モニター募集 100μg / ◆ 測定波長:励起 501 nm /蛍光 523 nm お問い合わせ先 ※ GFB-Booster は,GFP が変性する前にご使用下さい。 * GFP-Trap の詳細については,フナコシホームページ(http://www. funakoshi.co.jp/contents/3711)をご覧下さい。 試薬 組み合わせた文様です。 この組み合わせ方から,別 名としては『卍崩し』や『卍繋ぎ』があります。 この文 GFP-Dnmt1 を恒常的に発現しているマウス C2C12 細胞を用いて,クリックケミスト リー試薬で処理後,本製品による GFP シグナルの増強を行い,観察した。通常,クリッ クケミストリー試薬処理により GFP の蛍光は消失するが,本製品で処理した細胞では GFP シグナルが確認できた。 左:クリックケミストリー試薬による DNA 染色像(赤色) 中:GFP-Dnmt1 の発現を本製品で増強した(緑色) 右:DAPI(青色)との三重染色像 様の歴史は古く,桃山時代の頃から人々の暮らしを 飾ってきました。紋織物の綸子(りんず)に使用され る,代表的な文様の一つです。 染物の模様だけでなく,組子障子や欄間といった FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 『紗綾形』は,卍(まんじ)模様を斜めに連続させて 建築の装飾にも取り入れられています。 120715s_p07_k_i.indd 7 2012/06/29 14:39:07 8 蛍光関連製品特集 NEW 2012 年 7 月 15 日号 NEW 抗体 二次抗体 蛍光色素 イメージングに有用な蛍光標識二次抗体とストレプトアビジン NorthernLights 標識二次抗体/ ストレプトアビジン 強い蛍光を発し,退色しにくく,アルコールやキシレンを含 む溶液中でも安定な蛍光色素である NorthernLights(NL) を結合した二次抗体とストレプトアビジンです。 ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。 10μm マウス側坐核の有棘神経細胞に順行性トレーサーであ るビオシチンを導入し,NL557 標識ストレプトアビ ジンを用いて神経トレーシングを行った。 NL637 の励起/蛍光スペクトル 蛍光色素 励起/蛍光波長(nm) 類似色素 NL493 493 / 514 Alexa Fluor® 488, Fluorescein, FITC NL557 557 / 574 Phycoerythrin, Rhodamine Red X NL637 637 / 658 Alexa Fluor® 645, APC, Cy5 商品コード 品 名 抗原種 抗 体 Anti-IgG (H + L), Sheep Sheep 性状:AAPu,吸収処理:Bovine/Human/Mouse/Rabbit, 濃度:1 mg/ml 免疫動物 (クローン) 適用 メーカー 包 装 NL557 NL637 価格(¥) Donkey-Poly FCM, IC, IHC RSD NL012 NL010 NL011 0.5 ml 24,000 Rabbit Donkey-Poly FCM, IC, 性状:AAPu,吸収処理:Bovine/Goat/Human/Mouse/Rabbit, IHC 濃度:1 mg/ml RSD NL006 NL004 NL005 0.5 ml 24,000 RSD NL009 NL007 NL008 0.5 ml 24,000 FCM, IC, IHC RSD NL015 NL013 NL014 0.5 ml 24,000 Donkey-Poly FCM, IC, IHC RSD NL003 NL001 NL002 0.5 ml 24,000 FCM, IC, IHC RSD NL018 NL016 NL017 0.5 ml 24,000 FCM, IC, IHC RSD 0.5 ml 24,000 NL997 NL999 NL998 Anti-IgG (H + L), Rabbit NEW 標識 NL493 Anti-IgG (H + L), Mouse Mouse 性状:AAPu,吸収処理:Bovine/Goat/Human/Rabbit, 濃度:1 mg/ml Anti-IgG (H + L), Rat Rat Donkey-Poly FCM, IC, IHC Goat-Poly 性状:AAPu,吸収処理:Mouse,濃度:1 mg/ml Anti-IgG (H + L), Goat Goat 性状:AAPu,吸収処理:Human/Mouse/Rabbit/Rat, 濃度:1 mg/ml Anti-IgY (H + L), Chicken Chicken Goat-Poly 性状:AAPu,濃度:1 mg/ml Streptavidin − 濃度:1 mg/ml 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 特 長 NEW 抗体 一次抗体 標識体 ◆ 未標識抗体は下記のアプリケーションに適用可能です(一部適用外 の抗体もあります)。 お問い合わせ先 メーカー名:Bioss URL:http://www.bioss-usa.com/ Bioss 社は米国のボストンに本拠を置く抗体メーカー で,各種標識抗体を多数取り扱っています。 試薬 12 万点以上のラインナップを誇る抗体メーカー ・West ・ELISA ・IP ・IF ・IHC ・FCM ◆ 未標識抗体を各種標識物で標識した製品もあります。 ※ 標識の種類については,お問い合わせ下さい。 価 格 ● 未標識抗体:¥39,000 ∼ 50,000/100 μg FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 ● 標識抗体:¥41,000 ∼ 60,000/100 μg Bioss 社 抗体 ※ 標識抗体は注文後に標識を行います。標識には通常納期より約 2 週間要します。 約 6,700 種類の一次抗体製品があります。一次抗体へご希 望の標識を行うことにより,取り扱い可能な製品数は 12 万点 以上の豊富なラインナップとなります。 製品の検索方法(http://www.funakoshi.co.jp/searches/) ② ① 抗体:抗 IAA 抗体(#bs-0902M) 試料:シロイヌナズナ組織パラフィ ン包埋切片 因子名(英語) BIS ③ ④ 120715s_p08_k_n_i.indd 8 フナコシホームページの 製品検索ページにアクセ スし,左記の項目に必要 事項を入力して検索して 下さい。 2012/06/29 14:39:57 2012 年 7 月 15 日号 NEW 細胞情報伝達 植物 Hsp 関連製品 Hsp StressMarq Biosciences 社では,各種熱ショックタンパク質関 連製品を多数取り扱っています。 詳細はフナコシホームページをご覧下さい。 ■ Hsp ELISA Kit http://www.funakoshi.co.jp/contents/5443 ■ Hsp90 組換え体/阻害物質 http://www.funakoshi.co.jp/contents/3485 ■ Hsp 関連抗体 http://www.funakoshi.co.jp/contents/3450 植物由来 Hsp 関連抗体 植物の Hsp(Heat shock protein)に交差する抗体です。 精製 Hsp16.6 細胞中の全タンパク質(5μg) (kDa) 0.5 1 2(ng) Δ16.6 WT 170 細胞情報伝達 Ɠ൭NJǍƢƍ̖ƴƳǓLJƠƨᲛ 9 NEW 72 好評配布中 ! StressMarq Biosciences 社 2011 / 2012 Product Catalog 34 17 (A4 変型版,約 110 ページ,英語版カタログ) WT:野生型 Δ16.6:Hsp16.6 欠損型 熱ショックタンパク質,細胞情報伝達,イオ ンチャネル関連の組換え体タンパク質,抗体, 免疫染色用キット,阻害物質などをご紹介し ています。 ←Hsp16.6 11 抗 Hsp16.6 抗体(#SPC-307D)を用いたウエスタンブロッティング像 ※カタログをご希望の方は,フナコシホームページのオンライン請求か,当社 営業担当(Fax 03-5684-1634)までお申し込み下さい。 品 名 Anti-DnaJ, Alga 抗原種 免疫動物 (クローン) Chlamydomonas reinhardtii Rabbit-Poly Chlamydomonas reinhardtii Rabbit-Poly Synechocysis. PCC 6803 Rabbit-Poly 性状:Serum,交差性:Chlamydomonas reinhardtii Anti-DnaK, Alga 性状:Serum,交差性:Chlamydomonas reinhardtii Anti-Hsp16.6, Cyanobacteria Anti-Hsp17.6, Plant Rabbit-Poly 性状:Serum,交差性:Arabidopsis thaliana Anti-Hsp17.7, Plant Rabbit-Poly 性状:Serum,交差性:Arabidopsis thaliana Anti-Hsp21, Plant Rabbit-Poly 性状:Serum,交差性:Arabidopsis thaliana Rabbit-Poly Anti-Hsp70B, Plant Rabbit-Poly Wheat Germ 性状:Serum,交差性:Cucurbita pepo/Pisum sativum /Tritium sp. 性状:Serum,交差性:Chlamydomonas reinhardtii Anti-Hsp70/Hsc70, Plant Phaseolus aureus 性状:PAPu,クラス:IgG1,交差性:植物 Rabbit-Poly 性状:Serum,交差性:Chlamydomonas reinhardtii Anti-Hsp101, Maize, C-terminal〈Anti-ClpB〉 Zea mays Rabbit-Poly Anti-Hsp101, Plant, N-terminal〈Anti-ClpB〉 Rabbit-Poly Anti-Hsp101, Plant, C-terminal〈Anti-ClpB〉 Rabbit-Poly Arabidopsis thaliana 性状:Serum,交差性:Agave tequilana (monocot)/Arabidopsis thaliana Arabidopsis thaliana 性状:Serum,交差性:Agave tequilana (monocot)/Arabidopsis thaliana 120715s_p09_k_n_i.indd 9 − − − − − − − − − − 包 装 価格(¥) West STQ SPC-300B 200μl 41,000 West STQ SPC-301B 200μl 41,000 West STQ SPC-307D 100μl 41,000 West STQ SPC-308B 200μl 41,000 West STQ SPC-309B 200μl 41,000 West STQ SPC-310D 100μl 41,000 ELISA, IP, West STQ SPC-302D 100μl 41,000 IP, West STQ SPC-315D 100μl 41,000 ELISA, West STQ SMC-120D 100μg 37,000 IP, West STQ SPC-317D 100μl 41,000 West STQ SPC-306B 200μl 41,000 West STQ SPC-304B 200μl 41,000 West STQ SPC-305B 200μl 41,000 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 性状:Serum,交差性:Zea mays − 商品コード 試薬 Anti-Hsp90C, Plant Mouse-Mono (5G1-95) − メーカー お問い合わせ先 Anti-Hsc70, Plant − 適用 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 性状:Serum,交差性:Synechocysis. PCC 6803 標識 2012/06/29 14:40:28 10 細胞情報伝達 NEW 2012 年 7 月 15 日号 NEW 細胞情報伝達 生理活性物質 阻害物質 20%OFF AnaSpec 社アッセイキット全品 20% OFF キャンペーン 期間:∼平成 24 年 8 月 31 日 各種活性化物質/阻害物質 ※旧 Tocris Biosciences 社の製品です。 ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 細胞情報伝達 エピジェネティクス 品 名 メーカー 商品コード Hesperadin Hydrochloride RSD 3988/10 RSD 3988/50 包装 / 価格(¥) 10 mg / 72,000 50 mg / 302,000 Aurora B キナーゼの ATP 競合的阻害物質(IC50 = 250 nM)。染色体の整列と分離を防 ぎ,倍数性の誘導,ヒストン H3-Ser10 のリン酸化を防ぐ。紡錘体集合チェックポイントを 無効にし,monastrol- および taxol 処理をした HeLa 細胞において有糸分裂を停止させる。 HDAC 蛍光による SIRT 活性測定アッセイキット SensoLyte SIRT Assay Kit SIRT(Sirtuin)の酵素活性を 2 ステップで高感度に検出で きるキットです。SIRT との反応で脱アセチル化させた基質を Developer により開裂し,それにより生じる蛍光を測定しま す。Developer の作用により,基質からクエンチャーが外れ る FRET Kit(#72155,#72189)と,緑色蛍光色素が放 出される Green Kit(#72156,#72188)があります。 [422513-13-1],M.W.:575.64,純度:> 99%,形状:ベージュ色固体 20 (S)-Hydroxycholesterol RSD 4474/10 10 mg / 44,000 特 長 ◆ 96 ウェルフォーマットで 100 回分のアッセイに必要な試薬が含ま れています。 ◆ 操作は 1 時間以内に完了します。 Hedgehog シグナリング経路の Smoothened(Smo)タンパク質のアロステリック活 性化物質。シクロパミン結合部位とは異なる部位に結合する。Hedgehog シグナリングを 活性化する(NIH 3T3 細胞において Hh レポーター遺伝子の転写誘導を行う(EC50 =∼ ◆ SIRT 阻害物質のスクリーニングにも有用です。 ◆ 測定波長:励起 490 nm /蛍光 520 nm 3 μM) )。一次繊毛において Smo 蓄積を誘導し,骨形成活性を示し,liver X レセプター(LXR) を活性化する。[516-72-3],M.W.:402.65,純度:> 95%,形状:白色固体 UNC 0638 RSD 4343/10 RSD 4343/50 10 mg / 60,000 50 mg / 262,000 キット内容 ● SIRT substrate * ● Standard ● NAD + * ● Nicotinamide 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ● SIRT human recombinant * ● SIRT developer ● Assay buffer ヒストンメチルトランスフェラーゼ(HMTase)である G9a と GLP の選択的阻害物質 ,> 10,000 nM(他の HMTase) )。MCF-7 (IC50:< 15 nM(G9a),19 nM(GLP) 細胞において H3K9 のジメチル化を強力に阻害する(IC50 = 70 nM)。[1255517-77-1], *キットにより内容が異なります。 ※蛍光測定用マイクロプレート(黒色プレートを推奨)は含まれていません。 ※測定には蛍光プレートリーダーが必要です。 M.W.:523.24,純度:> 99%,形状:白色固体 お問い合わせ先 VU 0364439 RSD 4371/10 RSD 4371/50 品 名 10 mg / 46,000 50 mg / 191,000 mGlu4 レセプターのポジティブアロステリックモジュレーター(PAM)。EC50 = 19.8 試薬 nM(ヒト mGlu4,in vitro )。[1246086-78-1],M.W.:422.29,純度:> 99%, 形状:オフホワイト色粉末 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 VU 29 RSD RSD 4458/10 4458/50 10 mg / 50,000 50 mg / 217,000 通常 メーカー 商品コード SIRT1 Assay Kit, ANA 72155 ANA 72156 SIRT2 Assay Kit, ANA 72189 ANA 72188 キャンペーン 包装 / 価格(¥) 価格(¥) Fluorimetric (100 assays) −80℃ SensoLyte 520 FRET −80℃ SensoLyte Green Fluorimetric (100 assays) −80℃ SensoLyte 520 FRET −80℃ SensoLyte Green 1 kit / 1 kit / 79,000 69,000 63,200 55,200 1 kit / 1 kit / 79,000 79,000 63,200 63,200 好評配布中! AnaSpec 社 アッセイキットミニカタログ 2012 ラット mGlu5 レセプターの強力なアロステリック増強物質(EC50 = 9 nM)。MPEP エピジェネティクス,MMP,アポトーシスお よびその他の情報伝達研究に有用なキット製 品をご紹介しています。 (#1212)のアロステリック部位に結合する(Ki app = 244 nM)。mGlu1 と mGlu2 レ セプターよりも mGlu5 に対して選択的に働く(EC50 = 557 nM(mGlu1),1.51μM (mGlu2))。CDPPB(RSD 社 #3235)のアナログ。[890764-36-0], M.W.:384.39,純度:> 99%,形状:黄色固体 120715s_p10_k_n_p_i.indd 10 ※ご希望の方は,フナコシホームページのオンライン請求か,当社営業担当 (Fax 03-5684-1634)までお申し込み下さい。 2012/06/29 15:24:47 2012 年 7 月 15 日号 NEW イムノグロブリン 脂質 リン脂質 ELISA 様々な動物種のイムノグロブリンを定量できるキット Immunoglobulin ELISA Kit 様々な動物種のイムノグロブリンを,サンドイッチ法により, 高感度かつ短時間に比色定量できる ELISA キットです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 測定受託 31 P NMR を用いた定量的 リン脂質分析受託サービス NEW 31 特 長 脂 質 P NMR(核磁気共鳴)を用いて,定量的なリン脂質の分 析を行う受託サービスです。Avanti Polar Lipid 社は,脂質 合成のスペシャリストとして高い技術力と経験を有しており, 優れた分析サービスをご提供しています。 特 長 ◆ ニワトリ/イヌ/モルモット/サル/マウス/ラット/七面鳥用の 免疫化学 NEW 免疫化学 11 ◆ 31P NMR を用いたリン脂質の定量分析法は,従来の HPLC 法と比 キットがあります。 ◆ 操作は約 2.5 時間で終了します。 較して,以下の点で優れています。 ◆ 測定波長:450 nm ・試料の前処理が容易 ・単一点キャリブレーションが可能 ◆ 包装:1 × 96 tests ・検出限界が高い ・解析時間が短い ◆ 天然由来または合成リン脂質試料から,クラス定量的な分析を行い,構 キット内容 NEW 成成分を同定できます。合成リン脂質の精製度決定にも利用できます。 ◆ NMR 溶媒として界面活性剤を使用したシステムと,pH・温度条件 ● Anti-immunoglobulin coated 96 well plate の最適化により,解像度の高い分析が可能です。 ● HRP conjugate reagent ● Reference standard (lyophilized) PI PC PE LPC PA LPA ● Immunoglobulin diluent PG LPE 分析例 ● Wash solution ● TMB reagent (One-Step) ● Stop solution (1N HCl) [メーカー:LDI] Monkey * * #5010-3-HS,#5017-3 ではサル以外の動物由来のイムノグロブ リンを用いています。 リン脂質の種類 LPA PA PG LPE PE LPC PI PC 2.0 nM 0.09 1.05 0.15 0.45 3.38 0.35 1.67 3.34 1.5 1.0 0.5 0.0 ー0.5 (ppm) 1.75 3.39 2.5 3.47 0.38 3.0 M.W. (g/mol) 468.5 746.0 820.0 492.5 770.0 534.5 907.0 812.0 平均 wt/wt% 0.4(±0.07) 7.0(±0.14) 1.1(±0.12) 2.0(±0.02) 23.1(±0.74) 1.7(±0.20) 13.5(±0.70) 24.1(±0.70) 31 P NMR による大豆レシチンの分析 大豆レシチンは大豆に由来する PC(ホスファチジルコリン),PE(ホスファチジルエタノー ルアミン) ,PI(ホスファチジルイノシトール),PA(ホスファチジル酸)の一般的な天 然原料で,主に 16:0,18:2 脂肪酸を含む。 31 P NMR で分析した。構成脂質成分として, 大豆レシチン(∼ 10 mg/ml)を試料とし, PA,LPA,PG,PE,LPE,PI,PC,LPC が検出された。10 回分析した結果から, 平均 wt/wt%を算出した。 ※実際の納品データに,標準偏差値は含まれません。詳細についてはお問い合わせ下さい。 ご注文方法/価格 FAX 03 5 - 684 6 - 539 TEL 03 5 - 684 1 - 645 Turkey 3.5 受託 Rat 70,000 70,000 66,000 66,000 66,000 66,000 70,000 70,000 66,000 57,000 57,000 57,000 57,000 57,000 57,000 66,000 57,000 57,000 70,000 70,000 お問い合わせ先 Mouse 価格(¥) 0.15 0.45 Guinea Pig 血清,血漿,卵黄抽出物 1.563 ∼ 100 血清,血漿,卵黄抽出物 1.56 ∼ 100 血清,血漿 2.5 ∼ 160 血清,血漿 4.7 ∼ 300 血清,血漿 3.13 ∼ 100 血清,血漿 3.91 ∼ 250 血清,血漿 3.125 ∼ 100 血清,血漿 2.5 ∼ 40 血清,血漿,体液 0.93 ∼ 30.0 血清,血漿 7.81 ∼ 500 血清,血漿 1.56 ∼ 50 血清,血漿 0.195 ∼ 6.25 血清,血漿 0.195 ∼ 6.25 血清,血漿 0.78 ∼ 25 血清,血漿 7.81 ∼ 500 血清,血漿,体液 2.34 ∼ 75 血清,血漿 1.95 ∼ 125 血清,血漿 1.95 ∼ 125 血清,血漿,卵黄抽出物 1.563 ∼ 100 血清,血漿,卵黄抽出物 3.13 ∼ 200 0.10 Dog 測定範囲 (ng/ml) 1.05 Chicken IgG (IgY) IgM IgG IgM IgG IgM IgG IgE IgA IgG IgG1 IgG2a IgG2b IgG3 IgM IgA IgG IgM IgG (IgY) IgM 試 料 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 5010-5 5015-5 5010-4 5015-4 5010-7 5015-7 5010-3-HS 5017-3 5016-1 5010-1 5010-1A 5010-1B 5010-1C 5010-1D 5015-1 5016-2 5010-2 5015-2 5010-6 5015-6 Ig 0.10 商品コード 動物種 詳細は当社受託・特注品業務担当までお問い合わせ下さい。 120715s_p11_k_n_i.indd 11 2012/06/29 14:41:08 12 2012 年 7 月 15 日号 タンパク質/酵素 目的のヒト組換え体タンパク質をヒト細胞で大量かつ迅速に産生 NEW r-PEx 組換え体ヒトタンパク質産生 受託サービス NEW タンパク質の産生実績例 タンパク質/酵素 タンパク質発現 作製受託 U-Protein Express 社のタンパク質発現プラットフォーム r-PEx 技術により,翻訳後修飾された高品質な組換え体タンパ ク質を作製する受託サービスです。目的タンパク質の遺伝子配 列またはタンパク質配列情報のみでご依頼いただけます。 タンパク質 SEAP IgG1 Complement B * 1(文献 1. ) Complement C2a(文献 2. ) Complement C3 Glycoprotein Ⅰ b α TAFI * 1(文献 3. ) β 2-Glycoprotein Ⅰ* 2 HEK293E 細胞中での発現レベル(mg/L) 100 25 ∼ 60 12 15 ∼ 20 2∼3 4 3∼4 10 ∼ 15 * 1 HEK293ES 細胞を用いて産生。 * 2 HEK293E 細胞および HEK293ES 細胞を用いて産生。 参考文献 1. Milder, F. J., et al., Nat. Struct. Mol. Biol. , 14 (3), 224 ∼ 228 特 長 (2007). ◆ タンパク質の産生に要する時間が 8 週間程度と,非常に迅速です。 ◆ TEV プロテアーゼ切断サイト,複数のタグ(6×His,Strep,Fc, FLAG)を含む pUPE ベクターをご用意しています。また,細胞内 発現用,分泌発現用のベクターも選択できます。 ◆ HEK293E 細胞を用いて目的遺伝子を発現させ,糖鎖修飾が適切に 2. Milder, F. J., et al., Structure , 14 (10), 1587 ∼ 1597 (2006). 3. Marx, P. F., et al., Blood , 112 (7), 2803 ∼ 2809 (2008). ご用意いただくもの 目的タンパク質の遺伝子配列またはタンパク質配列をお知らせ下さ い。また,下記のオプションにも対応します。 行われたタンパク質を 1 ∼ 100 mg 産生します。 ◆ また,HEK293ES 細胞を用いて,N 結合型糖鎖を欠損した結晶化 ■ オプション ● お客様に,トランスフェクショングレードのプラスミド DNA(任意 グレードタンパク質を産生することも可能です。 ◆ 非常に低いエンドトキシンレベルの精製タンパク質をご提供します。 ※ P. pastoris ,E. coli を用いる発現系でのご依頼も承ります。 の発現ベクターに組み込まれたもの)を提供していただく。 ● お客様に目的遺伝子を pUPE 発現ベクターにライゲーションしてい ただき,トランスフェクショングレードのプラスミド DNA を必要量 サービス概要図 提供していただく。 ※ pUPE 発現ベクターの使用に際し,ライセンス契約を締結していた だく必要があります。 ● お客様に,目的遺伝子の挿入されたプラスミド DNA を送付していた 目的遺伝子 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です だき,U-Protein Express 社がトランスフェクション用のプラスミ . PCR/遺伝子合成 HⅠ Ⅰ 制限酵素認識部位の付いた cDNA 2 週間 ドを作製する。 ● U-Protein Express 社が目的の cDNA と 1 種類の pUPE ベクター とをライゲーションさせ,トランスフェクショングレードのプラス . pUPE 発現ベクターとライゲーション ミドを作製し,トランスフェクションを行う。 ● U-Protein Express 社が目的の cDNA と 6 種類の pUPE ベクター お問い合わせ先 とをライゲーションさせ,目的タンパク質の産生に適したベクター . HEK293E 細胞で一過性発現させる(4 ml) (kDa) -150 - 75 - 50 - 25 2 週間 トランスフェクションを行う。 PAGE を行い,HEK293E 細胞内での目的タンパク質の 産生を確認する 発現させたタンパク質の発送方法 受託 - 15 . HEK293E 細胞を大量培養する(1 ∼ 30 L) を選択し,トランスフェクショングレードのプラスミドを作製し, 1 週間 以下のいずれかの方法からご選択下さい。 FAX 03 5 - 684 6 - 539 TEL 03 5 - 684 1 - 645 ● 1 ステップ精製したタンパク質の状態で送付する。 ● 複数ステップ精製したタンパク質の状態で送付する。 ※ 精製度は,精製するタンパク質の種類により異なります。詳細は, 当社受託・特注品業務担当までお問い合わせ下さい。 . 目的タンパク質を精製し,品質検査を行う (%) 100 (mAU) 1,000 80 60 40 20 0 750 500 250 0 0 ご注文方法/価格 1 週間 ご注文方法,お見積り等の詳細は,当社受託・特注品業務担当までお 問い合わせ下さい。 20 40 60 80 100 120 Ve(ml) 120715s_p12_n_i.indd 12 2012/06/29 14:41:29 2012 年 7 月 15 日号 活性測定 測定受託 タンパク質/酵素 NEW タンパク質/酵素 基本試験内容 ● 使用酵素:チロシナーゼ(マッシュルーム)など ● 酵素活性:DOPA クロム産生測定(吸光度測定) コラゲナーゼ阻害・チロシナーゼ阻害・メラニン産生の研究に 13 ● 陽性対照:コウジ酸 ● 予備試験:測定物質 7 段階濃度(n = 3) 皮膚研究用バイオアッセイ 受託サービス ● 本試験:測定物質 5 段階濃度(n = 5) ,変色程度を示す写真(左図 参照),IC50 値算出 天然素材由来物質など測定物質の,コラゲナーゼ活性阻害作 用,チロシナーゼ活性阻害作用,メラニン産生抑制効果を試験 する受託サービスです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 NEW ■ メラニン産生抑制試験 マウス B16 メラノーマ細胞を用いて測定物質のメラニン産生抑制効 果を試験します。 ■ コラゲナーゼ阻害試験 40μm コラゲナーゼを使用して測定物質の阻害効果を試験します。コラゲ ナーゼはコラーゲンを分解する酵素で,その酵素活性を阻害することに よりコラーゲンの蓄積が促進すると考えられています。 皮膚組織など美容系のみならず,癌転移においてもコラゲナーゼが活 コラーゲン三重らせん構造 加水分解 コラゲナーゼ 測定物質 コラゲナーゼ酵素活性(units/ml) 性化することから,その阻害による癌転移抑制効果が期待されています。 0.25 B16 細胞におけるメラニン産生(陰性コントロール) IC50=0.74μM 13.1% 0.2 23.4% 38.5% 0.15 68.3% 0.1 40μm 72.2% 0.05 0 2 無添加 0.016 0.08 0.4 測定物質濃度(μM) 10 コラゲナーゼ酵素活性阻害率(試薬結果例) 基本試験内容 フェニルチオ尿素添加下におけるメラニン産生(陽性コントロール) ● 測定項目:コラゲナーゼ活性(蛍光法) ● 予備試験:測定物質 7 段階濃度(n = 2) ● 本試験:測定物質 5 段階濃度(n = 3),IC50 値算出 ■ チロシナーゼ活性阻害試験 測定物質のチロシナーゼ(マッシュルーム)活性阻害効果を検証する IC50=1.92 nM 80 60 40 20 0 PTU 生量を測定します。 2 0.33 1.11 3.33 測定物質濃度(nM) 11.1 メラニン産生阻害率(試験結果例) 3 IC50=0.062μM 100 基本試験内容 80 60 ● 使用細胞:マウス B16 メラノーマ細胞 40 20 ● 培養条件:テオフィリン添加 0 0.001 0.01 0.1 測定物質濃度(μM) 1 10 ● 測定項目:細胞内メラニン量 ● 陽性対照:PTU(フェニルチオ尿素) チロシナーゼ(マッシュルーム由来) を用いた酵素試験(試験結果例) ● 予備試験:細胞毒性試験,測定物質 7 段階濃度(n = 3) ● 本試験:試験物質 5 段階濃度(n = 5),IC50 値算出 ご注文方法/価格/納期 詳細は,当社受託・特注品業務担当までお問い合わせ下さい。 120715s_p13_n_i.indd 13 FAX 03 5 - 684 6 - 539 TEL 03 5 - 684 1 - 645 溶媒のみ コウジ酸 受託 1. コントロール(陰性コントロール) 2. 測定物質 3. コウジ酸(陽性コントロール) チロシナーゼ活性阻害率(%) 1 0.11 お問い合わせ先 試験です。L-DOPA を基質としてチロシナーゼによる DOPA クロム産 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です メラニン産生阻害率(%) ● 使用酵素:各種コラゲナーゼ(MMP) 2012/06/29 14:42:00 14 タンパク質/酵素 NEW 2012 年 7 月 15 日号 NEW NEW タンパク質/酵素 タンパク質/酵素 細胞外マトリックス アッセイキット プロテアソーム 機能解析 ユビキチン・プロテアソーム系の研究に有用です 細胞外マトリックス分解酵素 阻害物質スクリーニングキット プロテアソーム阻害物質 細 胞 外 マ ト リ ッ ク ス 分 解 酵 素(MMP-1 / 3 ま た は Neutrophil elastase) に よ り 切 断 さ れ る と 蛍 光 を 生 じ る FRET(Fluorescence Resonance Energy Transfer) ペ プチドを用いて,蛍光法で酵素阻害物質をスクリーニングする キットです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 プロテアソーム阻害物質です。プロテアソームの機能解析に 有用です。 ※旧 BostonBiochem 社の製品です。 ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの商標登録です。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 品 名 メーカー 商品コード 特 長 包装 / 価格(¥) b-AP15〈VLX1500〉 RSD I-197-200 RSD I-197-01M ◆ 操作は簡便で,多数の試料を 45 分間以内に測定できます。 200μg / 1 mg / 32,000 88,000 ◆ MMP-3 については,活性測定用のキットもあります(#K783-100: 。 下記参照) 19S プロテアソームに含まれる脱ユビキチン酵素 USP14 および UCHL5 を,強力かつ可 商品コード スクリーニング対象 測定波長 コントロール 阻害物質 K794-100 MMP-1 阻害物質 励起 490 nm /蛍光 520 nm GM6001 K793-100 MMP-3 阻害物質 励起 325 nm /蛍光 393 nm SPCK K782-100 Neutrophil elastase 阻害物質 励起 400 nm /蛍光 505 nm キット内容 逆的に阻害し(IC50 = 2.1 μM) ,その結果,細胞内のポリユビキチン鎖が蓄積する。固形 腫瘍モデルでの腫瘍進行の阻害や,急性骨髄性白血病モデルでの組織浸潤の阻害が確認され ている。細胞膜透過性を有する。DMSO に可溶。M.W.:419,純度:> 98%(HPLC), 形状:DMSO 溶液 Clasto -Lactacystin β -Lactone RSD I-100-200 RSD I-102-01M O 200μg / 48,000 1 mg / 193,000 NH O ● Assay buffer ● Enzyme ● Substrate ● Inhibitor control ※キットにより内容が異なります。 ※キットにプレートは含まれていません。 ※測定には蛍光プレートリーダーが必要です。 質。細胞透過性を有する。DMSO および MeCN に可溶(< 20 mg/ml)。 M.W.:213.24,化学式:C10H15NO4,純度:> 95%(HPLC) 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) Epoxomicin RSD I-110-200 RSD I-112-01M O N お問い合わせ先 88,000 1 kit / 88,000 1 kit / 69,000 O N N O 1 kit / 200μg / 48,000 1 mg / 193,000 O O N O MMP-1 Inhibitor Screening Kit (100 assays) BVN K794-100 MMP-3 Inhibitor Screening Kit (100 assays) BVN K793-100 Neutrophil Elastase Inhibitor Screening Kit (100 assays) BVN K782-100 OH O プロテアソームの触媒βサブユニットに共有結合して作用する,強力かつ高選択性の阻害物 O プロテアソームに対する強力かつ選択的な不可逆的阻害物質。細胞透過性を有する。主に, プロテアソームのキモトリプシン様活性を阻害する。DMSO に可溶(< 15 mg/ml)。 M.W.:554.7,化学式:C28H50N4O7,純度:> 95%(HPLC) ■ MMP-3 Activity Assay Kit MMP-3 による切断で蛍光を生じる FRET ペプチドを用いて,酵素 Lactacystin RSD I-115-500 RSD I-116-01M O Me N 500μg / 1 mg / O S Me HO HO NHAc CO2 H Me 活性を測定するキットです。 48,000 88,000 試薬 プロテアソームの触媒βサブユニットに共有結合して作用する,強力で選択性の高い阻害物 質。細胞透過性を有する。DMSO および MeCN に可溶(< 20 mg/ml)。 キット内容 M.W.:376.4,純度:> 98%(HPLC) FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 ● MMP-3 assay buffer ● Mca standard ● MMP-3 substrate ● MMP-3 positive control Z-Leu-Leu-Nva-CHO〈MG-115〉 RSD I-135-05M 5 mg / O N N N 品 名 メーカー 商品コード MMP-3 Activity Assay Kit (100 assays) BVN K783-100 11,000 O O O H O 包装 / 価格(¥) 20S プロテアソームのキモトリプシン様ペプチダーゼ活性の可逆的阻害物質。細胞透過性を 1 kit / 73,000 有する。カルパインおよびカテプシンの活性も阻害する。DMSO に可溶(< 15 mg/ml)。 M.W.:461.61,化学式:C25H39N3O5,純度:> 95%(HPLC) ※ R&D Systems 社では,旧 BostonBiochem 社の各種ユビキチン 関連製品を幅広く取りそろえています。詳細はフナコシホームペー ジの製品検索をご利用いただくか,当社テクニカルサポート(試薬 担当)までお問い合わせ下さい。 120715s_p14_k_n_i.indd 14 2012/06/29 14:42:24 2012 年 7 月 15 日号 30%OFF タンパク質/酵素 ReliaBLOT Western Blot Kit 30% OFF キャンペーン キット内容 ● Precast SDS-PAGE gel cassete ● LDS sample buffer 期間:平成 24 年 7 月 15 日∼平成 24 年 9 月 30 日 ● DTT reducing agent NEW タンパク質/酵素 電気泳動 ウエスタンブロット Ready-to-use なウエスタンブロッティングキット 15 ● Pre-stained protein marker ● Running buffer NEW ● Transfer buffer ● Nitrocellulose membrane / filter sandwich ● HRP-conjugated anti-rabbit secondary antibody ● Chemiluminescent HRP substrate ReliaBLOT Western Blot Kit SDS-PAGE 用プレキャストゲルおよびニトロセルロース膜, 各種バッファー類がセットになったウエスタンブロッティング 用キットです。HRP 標識二次抗体もセットになっており,ウ サギ一次抗体を用いたウエスタンブロッティングが Ready-touse で行えます。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 特 長 ◆ 電気泳動・転写・検出までを行うことができ,試薬はすべて Ready- 通常 品 名 メーカー 商品コード ReliaBLOT Western Blot Kit, 10×10 cm, 12 well WB101-40812K C BET 4-8% WB101-41212K C BET 4-12% WB101-42012K C BET 4-20% WB101-01212K C BET 12% ReliaBLOT Western Blot Kit, 10×8 cm, 12 well WB102-40812K C BET 4-8% WB102-41212K C BET 4-12% WB102-42012K C BET 4-20% WB102-01212K C BET 12% 1 kit / 1 kit / 1 kit / 1 kit / 50,000 50,000 50,000 50,000 35,000 35,000 35,000 35,000 1 kit / 1 kit / 1 kit / 1 kit / 50,000 50,000 50,000 50,000 35,000 35,000 35,000 35,000 28,000 28,000 28,000 28,000 19,600 19,600 19,600 19,600 28,000 28,000 28,000 28,000 19,600 19,600 19,600 19,600 ■ ReliaBLOT Western Blot Gel 別売品 to-use です*。 ◆ アクリルアミド濃度と,ゲルサイズが異なる 8 種類の製品からお選 びいただけます。 ◆ ゲルとニトロセルロース膜は,それぞれ 5 枚ずつ付属しています。 ◆ ニトロセルロース膜は,あらかじめ 8.3×7.3 cm にカット済みです。 ◆ HRP 標識抗ウサギ二次抗体と HRP 基質が付属しており,検出まで 行えます。 ◆ 個別に,ゲルやバッファーをご購入することも可能です(右記参照)。 ReliaBLOT Western Blot Gels, 10×10 cm, 12 well WB101-40812G C BET 4-8% 10 gels / WB101-01212G C BET 12% 10 gels / WB101-42012G C BET 4-20% 10 gels / WB101-41212G C BET 4-12% 10 gels / ReliaBLOT Western Blot Gels, 10×8 cm, 12 well WB102-40812G C BET 4-8% 10 gels / WB102-01212G C BET 12% 10 gels / WB102-42012G C BET 4-20% 10 gels / WB102-41212G C BET 4-12% 10 gels / ■ その他の別売品 メタノールは付属していません。 通常 品 名 (kDa) (kDa) 195 195 142 142 142 96 71 48 48 142 71 96 48 33 28 28 22 22 71 12 28 22 10 48 33 4 ∼ 8% 4 ∼ 12% 12 10 4 ∼ 20% 12% 20,000 14,000 10,000 7,000 34,000 23,800 3,000 2,100 40,000 28,000 56,000 39,200 Luminol solution(component A)55 ml と Peroxide buffersolution(component B) 55 ml を含む。 ゲルのアクリルアミド濃度による移動度の違い ReliaBLOT pre-stained protein marker を,ReliaBLOT SDS-PAGE gel を 用 い て 150 V で 1 時間泳動した後,ニトロセルロース膜に 20 V で 2 時間転写した。 120715s_p15_k_n_p_i.indd 15 品 名 メーカー 商品コード Anti-IgG (H + L), Rabbit, Goat-Poly, HRP BET A120-101P Anti-IgG (H + L), Mouse, Goat-Poly, HRP BET A90-116P 包装 / 価格(¥) 1 mg / 20,000 1 mg / 20,000 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 33 4,200 試薬 33 6,000 お問い合わせ先 71 96 キャンペーン 包装 / 価格(¥) 価格(¥) ReliaBLOT LDS Sample Buffer, 4× BET WB104-10 10 ml / ReliaBLOT Running Buffer, 20× BET WB105-500 500 ml / ReliaBLOT Transfer Buffer, 10× BET WB106-500 500 ml / ReliaBLOT Nitrocellulose Membrane/Filter Sandwiches BET WB107-20 20 packs / ReliaBLOT DTT Reducing Agent BET WB108 1 ml / ReliaBLOT Pre-stained Protein Marker BET WB103-600 0.6 ml / ReliaBLOT Chemiluminescent HRP Substrate BET WB110 110 ml / 195 96 195 メーカー 商品コード (kDa) 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です * 泳動装置,転写装置,ブロッキングバッファー,洗浄用バッファー, (kDa) キャンペーン 包装 / 価格(¥) 価格(¥) 2012/06/29 14:42:45 16 2012 年 7 月 15 日号 タンパク質/酵素 に対応した T7 プロモーター,リボソーム結合部位,T7 ターミネーター を含む直鎖状 DNA * 1 または環状プラスミド* 2 をテンプレートとして タンパク質/酵素 使用できます。 タンパク質発現 ■ RTS E. coli Disulfide Kit RTS 無細胞系タンパク質合成キット 反応液中で転写・翻訳とジスルフィド結合形成が行えるキットです。 機能活性を有するタンパク質合成の収量を最大限に高めるために最適化 E. coli または小麦胚芽ライセートを用いた無細胞系のタンパ ク質合成キットです。迅速かつ高効率にタンパク質が合成でき ます。in vitro でタンパク質を合成するため,宿主に対して毒 性を持つタンパク質の合成が可能です。 された E. coli ライセート,GroE シャペロンやレドックスバッファー などが含まれています。E. coli 発現系に対応した環状プラスミド* 2 を テンプレートとして使用できます。 ■ DnaK / GroE Supplement(可溶化用サプリメント) 発現させたタンパク質が不溶化,またはミスフォールドした場合に, 共通の特長 これを改善させるために添加する各種シャペロン分子サプリメントで ◆ E. coli または小麦胚芽ライセートにテンプレートと必要な試薬を混 す。RTS の E. coli 系キット用に最適化されたプロトコールが用意され 合してインキュベートするだけで,タンパク質が合成できます。 ているので,これらのキットと簡単に組み合わせることができます。目 ◆ キ ッ ト に 含 ま れ る CECF(Continuous Exchange Cell Free 的タンパク質のサイズ制限なく使用可能な DnaK Supplement と, Protein Synthesis)Reaction Device は透析膜を利用した画期的 20 ∼ 60 kDa のサイズで使用可能な GroE Supplement があります。 なシステム(RTS 100 E. coli HY Kit を除く)によりタンパク質 ■ RTS Wheat Germ CECF Kit 合成の過程で生産される合成阻害物質を除去できるため,効率的な 小麦胚芽無細胞タンパク質合成システムに対応した構造を持つ環状プ 長時間の反応が可能となり,タンパク質の収量が格段に向上します。 ラスミド* 3,直鎖状 DNA * 4 または mRNA を用いてタンパク質を効率 ◆ テンプレート DNA に 6 × His タグなどのエピトープタグ配列を挿 的に合成できます。真核生物由来 cDNA の発現に適しており,E. coli 入することにより,ウエスタンブロッティングによる発現の確認や ライセートを用いた無細胞発現系において十分なタンパク質発現が得ら 精製が可能です。 れなかった試料に用いることで,収量や可溶性の改善を期待できます。 Batch * 1 直 鎖 状 DNA の 合 成 に は RTS E. coli LinTempGenSet, His-tag (#2401000)の使用をお勧めします。 * 2 発現プラスミドの構築には RTS pIVEX His-tag, 2nd Gen. Vector Set(#2401010)の使用をお勧めします。 * 3 発 現 プ ラ ス ミ ド の 構 築 に は RTS pIVEX Wheat Germ His6-tag, Vector Set(#2402010)の使用をお勧めします。 * 4 直鎖状 DNA の合成には RTS Wheat Germ LinTempGenSet, Histag (#2402000) の使用をお勧めします。 * 5 テンプレート DNA の由来や配列の影響により,タンパク質合成量が期 待収量に満たない場合があります。 * 6 Eppendorf Thermomixer comfort が必要です。詳細は当社テクニカ ルサポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。 CECF ①テンプレート DNA 1 2 4 6 8 24 1 2 4 6 8 24 hrs ②ラ イ セ ー ト 中 で の T7 RNA ポリメラーゼによる 転写 ③翻訳 CECF の使用により,タンパク質合成 ④目的タンパク質 が継続して行われ,収量が格段に向上し ている(右)。 無細胞タンパク質合成システムの原理 ■ RTS E. coli HY Kit 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です E. coli 用 T7 プロモーター発現系で制御されたプラスミドまたは PCR 産物を用いてタンパク質を効率的に合成できます。E. coli 発現系 品 名 RTS 100 E. coli HY Kit お問い合わせ先 RTS 500 E. coli HY Kit, Proteo Master * 6 RTS 9000 E. coli HY Kit * 6 RTS 100 E. coli Disulfide Kit * 6 RTS 500 E. coli Disulfide Kit * 6 RTS 100 Wheat Germ CECF Kit * 6 RTS 500 Wheat Germ CECF Kit * 6 使用可能な テンプレート L, P L, P P P P P L, P, R L, P, R 反応液の 容量 50 μl 50 μl 1 ml 10 ml 50 μl 1 ml 50 μl 1 ml [メーカー:FPR] 期待収量* 5 (1 反応当たり) ∼ 20 μg ∼ 20 μg ∼ 6 mg ∼ 50 mg ∼ 80 μg ∼ 2 mg ∼数 10 μg ∼数 100 μg 反応時間 反応数 ∼ 6 時間 ∼ 6 時間 ∼ 24 時間 4 ∼ 24 時間 ∼ 24 時間 ∼ 24 時間 ∼ 24 時間 24 96 5 1 24 5 24 ∼ 24 時間 5 保存 −80℃ −80℃ 試薬 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 商品コード 包装 価格(¥) 2401100 2401110 2401500 2401900 2401120 2401520 2402100 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 1 kit 64,000 174,000 174,000 331,000 77,000 247,000 98,000 2402500 1 kit 286,000 商品コード 包装 価格(¥) 2401000 1 kit 31,000 2401010 1 set 28,000 2402000 1 kit 31,000 2402010 1 set 28,000 ■ RTS Kit 用テンプレート作製キット 品 名 RTS 100 E. coli LinTempGenSet, His-tag (96 reactions) RTS pIVEX His-tag, 2nd Gen. Vector Set RTS Wheat Germ LinTempGenSet, His-tag (96 reactions) RTS pIVEX Wheat Germ His6-tag Vector Set [メーカー:FPR] 説 明 RTS 100 E. coli HY Kit(#2401100, #2401110)用の直鎖状 DNA テンプレートを PCR によ り構築するキット。N 末端または C 末端に 6 × His タグを付加できる。 E. coli 無細胞合成系に適したプラスミドベクターのセット。N 末端または C 末端に 6×His タグを含むタンパク質を発現できる。 RTS 100/500 Wheat Germ CECF Kit(#2402100, #2402500)用の直鎖状 DNA テンプレー トを PCR により構築するキット。N 末端または C 末端に 6×His タグを付加できる。 小麦胚芽ライセートを用いた無細胞合成系に適したプラスミドベクターのセット。N 末端または C 末端 に 6 × His タグを含むタンパク質を発現できる。 ■ 可溶化用サプリメント/精製用レジン RTS DnaK Supplement シャペロン分子である DnaK, DnaJ, GroE を含む E. coli ライセート溶液。タンパク質の凝集を防ぎ, RTS GroE Supplement E. coli 内シャペロン分子のひとつである GroE(GroEL および GroES)を含む溶液。GroE は細胞内タ ミスフォールドしたタンパク質のリフォールディングを行う。 ンパク質のおよそ 10 ∼ 30%のフォールディングに関与していると考えられる。目的タンパク質のサ [メーカー:FPR] 2401020 5 × 180 μl 31,000 2401030 5 × 125 μl 31,000 2400060 10 ml 22,000 イズが 20 ∼ 60 kDa の場合に使用可能。 PerfectPro Ni-NTA Superflow FPLC でも使用可能な 6 × His タグ融合タンパク質精製用のニッケルレジン。高い結合能(5 ∼ 50 mg 6 × His-tagged protein/ml resin)を有し,1 ステップで精製できる。 120715s_p16_k_i.indd 16 2012/06/29 14:43:04 2012 年 7 月 15 日号 タンパク質/酵素 酵素 ◆ モノクローナル抗体を使用しているため,ロット間の差が少なくなっ ています。 活性確認済みのヒトヘパラナーゼ 1 ◆ すべての Calibrator(液状または凍結乾燥で出荷)は濃度別に調製 HepaOne Recombinant Human Heparanase-1 ◆ ほとんどの試薬は Ready-to-use になっています*。 タンパク質/酵素 共通の特長 Ɠ൭NJǍƢƍ̖ƴƳǓLJƠƨᲛ 17 されているため,標準曲線の作成が容易です。 ◆ 試薬は着色されているため,分注操作のミスを減らすことができます。 ◆ 検出用抗体に酵素標識抗体を用いているため,ビオチン標識抗体を 用いている場合よりもインキュベーションの回数が1回少なくなっ ており,操作時間を短縮できます。 ◆ 試料と検出用抗体を同時に反応させるため操作時間が大幅に短縮さ れています。 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) Heparanase-1, Human, Recombinant, HepaOne〈HPA1〉 IST INS-26-0-0000-94A −80℃ for Academic 300 ng / 101,000 IST INS-26-0-0000-94I −80℃ for Commercial Entities 300 ng / 152,000 IST INS-26-0-0000-93A −80℃ for Academic 1μg / 280,000 IST INS-26-0-0000-93I −80℃ for Commercial Entities 1μg / 420,000 ◆ 測定波長:450 nm *一部の試薬は調製が必要です。詳細は製品添付のマニュアルをご覧下さい。 ■ C-Peptide ELISA Kit ブタの C-Peptide を測定するキットです。C-Peptide はインスリンと サイトカイン/増殖因子/ホルモン ヒトへパラナーゼ 1 の組換え体タンパク質です。本製品は InSight Biopharmaceuticals 社が特許を取得しており,活 性があることも確認済みの信頼性の高い製品です。 NEW 1:1 の関係で産生されますが,インスリンよりも長期間安定なため, C-Peptide量の測定により正確なインスリン産生量を知ることができます。 産生:CHO 細胞,純度:> 95%,形状:酢酸バッファー溶液 ◆ ブタ C-peptide 以外のインスリン関連因子との交差性はほとんどあ HepaOne ご購入時のご注意 りません。 ※大学・官公庁の研究所(Academic)にご所属の方と,営利団体・ 企業(Commercial Entities)にご所属の方とでは価格が異なります。 ※本製品をご注文の際は,ご使用者確認書が必要となります。フナコ シホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/download/)に掲 載の InSight Biopharmaceuticals 社製品ご使用者確認書に必要事 項をご記入の上,販売店担当者にお渡し下さい。 ◆ 測定試料:血清,血漿(EDTA 処理),培地 ◆ 必要試料量:10 μl ◆ 測定範囲:20 ∼ 1,200 pmol/L ◆ 感度:10 pmol/L ◆ インキュベーション時間:120 分+ 60 分+ 15 分 品 名 メーカー 商品コード NEW 肥満 ELISA ■ Insulin ELISA Kit ブタのインスリンを測定するキットです。 ◆ High Range キット(#10-1223-01)は,測定範囲が広く,高濃 迅速・簡便なブタインスリン定量用 ELISA キット 2 種類のモノクローナル抗体を使用したサンドイッチ法によ りブタインスリン関連因子を比色定量する Mercodia ELISA Kit シリーズの ELISA キットです。 キット名 商品コード 必要試料量(μl) 測定範囲(μg/L) 感度(μg/L) インキュベーション時間(分) ELISA Kit 10-1200-01 25 0.02 ∼ 1.5 0.01 120 + 15 High Range ELISA Kit 10-1223-01 10 2.5 ∼ 75 0.313 60 + 15 インスリンとその関連因子 インスリンは糖代謝を調節する主要なホルモンの一つです。ランゲ ルハンス島のβ細胞で生合成されたプロインスリンはプロセッシング を受けて C-Peptide とインスリンとなり,両者とも門脈循環へ分泌さ れます。インスリンは血中のグルコース濃度に依存して分泌され,血 糖降下をはじめとする多くの生理活性が知られています。 1 kit / 1 kit / 64,000 72,000 ※掲載品以外にも,ヒトおよび各種動物用のインスリン ELISA キットや, 多数の糖尿病・肥満関連因子 ELISA キットを取りそろえています。詳細は, フナコシホームページの製品検索をご利用いただくか,当社テクニカルサ ポート(試薬担当)までお問い合わせ下さい。 ヒト超高感度 C-Peptide ELISA キットキャンペーン 20%OFF 期間:∼平成 24 年 7 月 31 日 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 Insulin, Porcine, ELISA Kit, Mercodia (96 well) MRD 10-1200-01 MRD 10-1223-01 High Range 試薬 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ◆ 測定試料:血清,血漿(EDTA,クエン酸,ヘパリン処理) お問い合わせ先 Mercodia ブタインスリン 関連因子 ELISA キット 度のブタインスリン定量が可能です。そのため,高い希釈倍率での 試料調製は必要ありません。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です サイトカイン/増殖因子/ホルモン 包装 / 価格(¥) C-Peptide, Porcine, ELISA Kit, Specific, Mercodia (96 well) MRD 10-1256-01 1 kit / 101,000 詳細はフナコシホームページ(http://www.funakoshi. co.jp/contents/6014)をご覧下さい。 120715s_p17_k_n_i.indd 17 2012/06/29 14:43:22 18 2012 年 7 月 15 日号 細胞培養 NEW and differentiation medium(#OSDM)を用いて培養することに 細胞培養 神経 より,成熟オリゴデンドロサイトに分化させることができます。 ◆ NG2 glia / OPC の単離を目的とした Starter Kit(#OPC-SK)も あ り ま す。 デ ィ ッ シ ュ か ら の 回 収 時 に 剥 離 用 試 薬(Mild メーカー名:P. Glia URL:http://www.pglia.com/ NEW ◆ 単離した OPC は,別売品の分化用培地 Oligodendrocyte survival dissociation solution) を 使 用 せ ず に, よ り 未 熟 な NG2 glia / P. Glia 社は,ドイツ・フランケン地方に本拠を置くメー カーで,神経系細胞の各種培養用試薬を取りそろえています。 オリゴデンドロサイト前駆細胞/皮質ニューロンを単離培養できるキット OPC を単離できます。 ◆ 単離できる細胞の表現型: NG2 + A2B5 + GD3 + O4 + GalC −(Isolation Kit), NG2 + A2B5 + GD3 + O4 +(Starter Kit) Oligodendrocyte Progenitor Cell / Cortical Neuron Isolation Kit マウスまたはラットの脳から,オリゴデンドロサイト前駆細 胞(Oligodendrocyte Progenitor Cell:OPC), ま た は 皮 質ニューロン(Cortical Neuron)を単離培養できるキットで す。細胞の種類による接着性の違いに着目し,P. Glia 社が独 自に開発したディッシュ「Multiple Adhesion Dish(MAD)」 と,各種培地を用いて,迅速かつ容易に単離培養が行えます。 OSDM PL-D に播種し直し,OGM で培養した OPC OSDM で培養した成熟オリゴデンドロサイト OSDM での培養により,ミエリンを有する成熟オリゴデンドロサイトが得られている。 キット内容 ● Cell dissociation solution 1 ∼ 3 ● Oligodendrocyte growth medium 原 理 ● Multiple adhesion dish for oligodendrocyte 細胞の基質マトリックスへの接着や細胞同士の接着は,細胞の種類に ● Mild dissociation solution * ● Poly-lysine containing dish * よって異なり,その接着力も弱いものから非常に強いものまで様々です。 ● Separation density medium ● Cell stainer, 40 μm * 本キットに含まれる Multiple Adhesion Dish(MAD)は,ディッシュ 底面に多様性のある細胞結合領域を結合させたユニークな製品です。オ リゴデンドロサイトやニューロンは MAD への接着力が非常に弱いた め,他の細胞をディッシュに接着させた状態で容易に単離できます。さ 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です らに各種培地を用いて特定の条件下で培養することにより,目的の種類 の細胞を得ることもできます。 脳組織由来細胞 目的の神経細胞: OPC または 皮質ニューロン MAD への細胞接着力 弱い 強い 最も強い お問い合わせ先 MAD ● Basal support medium * Starter Kit(#OPC-SK)には含まれていません。 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) Oligodendrocyte Progenitor Cell Isolation Kit PGA OPC-K Oligodendrocyte Progenitor Cell Starter Kit PGA OPC-SK 1 kit / 100,000 1 kit / 72,000 2×10 ml / 7,000 ■ 別売品 Oligodendrocyte Survival & Differentiation Medium PGA OSDM 無血清のオリゴデンドロサイト分化用培地。脳組織由来のオリゴデンドロサイト前駆細胞を 成熟オリゴデンドロサイトに分化させる。 細胞結合領域(multiple cell binding site) 細胞剥離用試薬 単離された OPC または 皮質ニューロン ■ Cortical Neuron Isolation Kit OPC=オリゴデンドロサイト前駆細胞 MAD=multiple adhesion dish 試薬 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 ■ Oligodendrocyte Progenitor Cell Isolation Kit 特 長 特 長 ◆ 新生マウスまたはラット(0 ∼ 1 日齢)の脳組織から,皮質ニュー ロンを 1 ステップ,わずか 1 日で単離できるキットです。 ◆ キットにはニューロン単離用のディッシュ(#MAD-N)を始め,脳組 織分散用の試薬,単離後のニューロン培養用培地などが含まれています。 ◆ マウス(3 日齢)またはラット(2 日齢)の脳組織から,オリゴデ ◆ 脳 組 織 を 分 散 し た 後,Neuronal growth medium を 加 え た ンドロサイト前駆細胞(OPC)を 1 ステップ,わずか 2 日間で単離 Multiple adhesion dish に播種し,1 日間インキュベートするだけ できるキットです。 で皮質ニューロンが得られます。 ◆ キットには OPC 単離用の Multiple adhesion dish を始め,脳組織分 ◆ 得られた皮質ニューロンは,別売品の Poly-lysine containing dish 散用の試薬や単離後の OPC を培養するための培地(Oligodendrocyte (#PL-D)などコーティング済みのディッシュと Neuronal growth growth medium:OGM) ,さらに細胞収量を増加させるためのオプ medium で さ ら に 増 殖 さ せ る こ と が で き ま す。 ま た,P.glia ションとして Poly-lysine コーティングしたディッシュも含まれてお defined neural medium( り,Ready-to-use で OPC の単離培養が行えます。 Oligodendrocyte survival and differentiation medium(別売品: 120715s_p18-19_k_n_i.indd 18 別 売 品:#P.Neural) や 2012/06/29 14:43:41 2012 年 7 月 15 日号 品 名 メーカー 商品コード + − ◆ 単離できる細胞の表現型:L1 TUJ-1 A2B5 包装 / 価格(¥) MEGA-9〈N -Nonanoyl-N -Methylglucamide〉 APC A3893.0001 APC A3893.0005 − 1g/ 5g/ 11,000 39,000 細胞培養 #OSDM)を用いて OPC と共培養し,Myelination assay を行う こともできます。 19 [85261-19-4],CMC:25 mM(H2O),M.W.:335.44,純度:> 99%(HPLC) MEGA-10〈N -Decanoyl-N -Methylglucamide〉 APC A4761.0001 APC A4761.0005 1g/ 5g/ 11,000 39,000 NEW 天然有機化合物/糖質 キット内容 免疫 シアル酸糖鎖合成用試薬 ● Cell dissociation solution 1 ∼ 3 ● Multiple adhesion dish (for neuron) ● Mild dissociation solution ● Basal support medium ● Neuronal growth medium ● Cell stainer, 40 μm 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) 1 kit / 64,000 ※ キット別売品や関連製品の詳細は,フナコシホームページ(http:// www.funakoshi.co.jp/contents/6202)をご覧下さい。 シアリルガラクトース/ シアリルラクトース NEW シアル酸(N −アセチルノイラミン酸)含有糖鎖(シアル酸 含有糖鎖保護体)は,細胞間の認識や免疫反応などに関与してい ます。シアル酸含有糖鎖は天然物に微量にしか含まれておらず, 非常に高価な値段で販売されていますが,長良サイエンス株式会 社では二糖のシアル酸含有糖鎖をグラム単位で大量合成するこ とに成功したため,安価にご提供することが可能になりました。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 NEW ■ シアリルガラクトース 生化学用一般試薬 膜タンパク質 精製 細胞膜の可溶化に有用な非イオン性界面活性剤 Protected 3'- α -Sialylgalactose〈Protected NeuAc α (2 → 3)-D-Gal〉 OAc OAc OBn CO CH OH NGR SG002010 10 mg / 20,000 AcO O O O OCH AcNH O NGR SG002100 100 mg / 90,000 MEGA-8 / MEGA-9 / MEGA-10 Protected 6'- α -Sialylgalactose〈Protected NeuAc α (2 → 6)-D-Gal〉 OAc OAc NGR SG001010 10 mg / 20,000 CO CH AcO O NGR SG001100 100 mg / 90,000 O AcNH 2 3 AcO 3 AcO O O BnO OCH3 OBn M.W.:939.95,純度:≧ 98%(TLC) OAc OH OAc O ◆ 可溶化後の膜タンパク質の変性を抑える非イオン性の界面活性剤です。 ◆ 臨界ミセル濃度(CMC)が高いため,透析によって簡単に除去する かつ安価な製品です。 ◆ Octyl β-D-glucosideと同様の優れた性能を有し, O OCH3 OBn AcO M.W.:939.95,純度:≧ 98%(TLC) OH OH N OH OH M.W.:1,372.46,純度:≧ 98%(TLC) n=5:MEGA-8 n=6:MEGA-9 n=7:MEGA-10 Protected 6'- α -Sialyllactose〈Protected NeuAc α (2 → 6)-D-Gal-β (1 → 4)-D-Glc〉 NGR SL001010 10 mg / 28,000 NGR SL001100 100 mg / 140,000 MEGA-8 / MEGA-9 / MEGA-10 の化学構造 参考文献 M.W.:1,372.46,純度:≧ 98%(TLC) Hildreth, J. E. K., Biochem. J. , 207, 363 ∼ 366 (1982). MEGA-8〈Octanoyl-N -Methylglucamide〉〈OMEGA〉 APC A1386.0001 APC A1386.0005 1g/ 5g/ 10,000 39,000 [85316-98-9],CMC:79 mM(H2O),M.W.:321.42,純度:> 99%(HPLC) Protected 6'- β -Sialyllactose〈Protected NeuAc β (2 → 6)-D-Gal-β (1 → 4)-D-Glc〉 NGR SL003010 10 mg / 45,000 NGR SL003100 100 mg / 270,000 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 ニタリングしながら精製することができます。 Protected 3'- α -Sialyllactose〈Protected NeuAc α (2 → 3)-D-Gal-β (1 → 4)-D-Glc〉 NGR SL002010 10 mg / 28,000 NGR SL002100 100 mg / 140,000 試薬 ◆ UV 透過性のため,吸光度測定の際に干渉せず,タンパク質濃度をモ O O BnO CO2CH3 ■ シアリルラクトース ことができます。 CH3-[CH2]n-CH2 O お問い合わせ先 AcO AcNH 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 2 OH 特 長 120715s_p18-19_k_n_i.indd 19 OBn Protected 6'- β -Sialylgalactose〈Protected NeuAc β (2 → 6)-D-Gal〉 NGR SG003010 10 mg / 30,000 NGR SG003100 100 mg / 180,000 OH NEW 3 M.W.:939.95,純度:≧ 98%(TLC) 細胞膜の可溶化能が高く,また簡単に透析で除去することが できる非イオン性界面活性剤です。 CH3 天然有機化合物/糖質 Cortical Neuron Isolation Kit PGA CN-K NEW [85261-20-7],CMC:6 ∼ 7 mM(H2O),M.W.:349.47,純度:> 99%(HPLC) 生化学用一般試薬 1 日齢マウスの脳組織由来細胞をニューロン 用 Multiple adhesion dish と Neuronal growth medium で 1 日 間 培 養 し,Mild dissociation solution 処 理 に よ り 皮 質 ニューロンを回収した。回収したニューロン を Poly-L-lysine コートしたチャンバーに播 種し,2 日間培養後,抗 L1-CAM 抗体で免 疫蛍光染色を行った。 M.W.:1,372.46,純度:≧ 98%(TLC) 2012/06/29 14:43:48 20 天然有機化合物/糖質 NEW 2012 年 7 月 15 日号 NEW 天然有機化合物/糖質 天然有機化合物/糖質 糖質 糖代謝 抗腫瘍活性 GAPDH を阻害する天然物 ヘパリン由来オリゴ糖 高品質の糖化合物を製造する Dextra Laboratories 社の製 品ラインナップの中から,酵素処理によってヘパリンから調製 したオリゴ糖をご紹介します。 Koningic Acid ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) dp2 Saccharide〈Disaccharide〉 DLL ID1002 1 mg / 18,000 1 mg / 32,000 1 mg / 32,000 1 mg / 32,000 1 mg / 32,000 M.W.:600 dp4 Saccharide〈Tetrasaccharide〉 DLL ID1004 M.W.:1,200(平均値) dp6 Saccharide〈Hexasaccharide〉 DLL ID1006 M.W.:1,800(平均値) dp8 Saccharide〈Octasaccharide〉 DLL ID1008 M.W.:2,400(平均値) dp10 Saccharide〈Decasaccharide〉 DLL ID1010 コニンギン酸とは コニンギン酸(Koningic Acid:KA)はトリコデルマ菌の一種で ある Trichoderma koningii から単離されたセスキテルペンラクトン 1 で ,解糖系酵素 GAPDH(グリセルアルデヒド -3- リン酸デヒドロ ゲナーゼ)の特異的阻害物質です。 GAPDH は解糖系に必須の酵素で,グリセルアルデヒド -3- リン酸 を 1,3- ビスホスホグリセリン酸に酸化する反応を触媒します。コニ ンギン酸はその触媒部位の Cys 残基に結合することにより,GAPDH 2 4 を不可逆的に阻害します ∼ 。培養細胞においては 10 ∼ 50 μM の 1, 5 濃度で GAPDH を阻害し ,またグルコース依存的な ATP 減少を誘 5, 6 導します 。このため,がん細胞など糖代謝への依存度が高い細胞に おいては,コニンギン酸は急激な ATP 枯渇をもたらし細胞死を誘導 します。 M.W.:3,000(平均値) dp12 Saccharide〈Dodecasaccharide〉 DLL ID1012 糖代謝の活発ながん細胞 1 mg / 37,000 グルコース ATP 1 mg / 37,000 ATP 1 mg / 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 4 ATP お問い合わせ先 38,000 1 mg / 38,000 × ピルビン酸 代替代謝での ATP 供給による ATP 枯渇による 1 mg / GAP KA × ピルビン酸 38,000 M.W.:5,200(平均値) dp20 Saccharide DLL ID1020 DHAP KA 4 ATP 1 mg / 軽度の ATP 減少 F-6-P F-1, 6-BP GAP 37,000 G-6-P ATP F-1, 6-BP DHAP M.W.:4,650(平均値) dp18 Saccharide DLL ID1018 強度の ATP 枯渇 F-6-P M.W.:4,100(平均値) dp16 Saccharide DLL ID1016 グルコース ATP G-6-P M.W.:3,550(平均値) dp14 Saccharide〈Tetradecasaccharide〉 DLL ID1014 正 常 細 胞 細胞死 細胞生存 M.W.:5,750(平均値) dp22 Saccharide DLL ID1022 参考文献 2. Sakai, K., et al., Biochim. Biophys. Acta , 952 (3), 297 ∼ 303 (1988). M.W.:6,300(平均値) dp24 Saccharide DLL ID1024 3. Sakai, K., et al., Biochim. Biophys. Acta , 1077 (2), 192∼196 (1991). 1 mg / 38,000 4. Kato, M., et al., Biochim. Biophys. Acta , 1120 (1), 113∼116 (1992). 5. Kumagai, S., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. , 365 (2), M.W.:6,800(平均値) 試薬 dp26 Saccharide DLL ID1026 1. Endo, A., et al., J. Antibiot. (Tokyo) , 38 (7), 920 ∼ 925 (1985). 362 ∼ 368 (2008). FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 1 mg / 38,000 1 mg / 38,000 6. Colell, A., et al., Cell Death Differ. , 16 (12), 1573 ∼ 1581 (2009). M.W.:7,400(平均値) Mixed Oligosaccharides (>dp26) DLL ID1028 dp26 以上のオリゴサッカライドの混合物。M.W.:9,000(平均値) ※ 2 mg の製品もあります。詳細は,フナコシホームページ(http:// www.funakoshi.co.jp/contents/6002)をご覧下さい。 120715s_p20_k_n_i.indd 20 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) Koningic Acid〈コニンギン酸〉〈Heptelidic Acid〉 O KTM KA-01-2 O H O KTM KA-01-5 2 mg / 5 mg / H 45,000 90,000 COOH [57710-57-3],M.W.:280.32,純度:> 80%(HPLC)形状:100 mM DMSO 溶液 2012/06/29 14:44:18 2012 年 7 月 15 日号 ギガ(109)レベルの形質転換効率! Giga Competent Cell (DH5α) 期間:∼平成 24 年 8 月 31 日 遺伝子工学 10 ∼ 25%OFF BioDynamics Laboratory 社 サマーキャンペーン 21 DNA クローニング,ライブラリー構築などに有用な,極め て高い形質転換効率を有するコンピテントセルです。 遺伝子工学 形質転換 特 長 クローニング ◆ 形質転換効率:> 1 × 109 cfu/ μg DNA(pBR322) ヒートショックが不要なコンピテントセル ◆ クローニング,ライブラリー作製に適しています。 Jet Competent Cell ◆ lac Z が含まれるプラスミドベクターを用いた場合,青白スクリーニ 特 長 ◆ ヒートショックとプレーティング前の培養操作が不要で,約 10 分 で形質転換操作が完了します。 ◆ 添 付 の 回 復 培 地(Recovery medium) に よ り, > 1×108 ングが可能です。 ◆ 1 回で使いきれるように 100 μl ずつチューブに分注されています。 ◆ − 80℃で 6 か月間保存しても,形質転換効率はほとんど低下しま せん。 形質転換効率(×108 cfu) コンピテントセルを用いた形質転換操作では,一般的にヒー ト シ ョ ッ ク と そ の 後 の 培 養 操 作 が 必 要 に な り ま す。Jet Competent Cell は BioDynamics Laboratory 社の高度な 技術により開発された,ヒートショックおよびその後の培養操 作が不要なコンピテントセルです。 30 形質 転 換効率 109 20 10 0 A B cfu/ μg(pBR322)の高い形質転換効率が得られます。 C Giga 本製品および各社コンピテントセルの形質転換効率: cfu/ μg(100 μl)を,プラスミド pBR322 を用い, 各 2 回測定した。A は A 社 DH5 αコンピテントセ ル,B は B 社 DH5 αコンピテントセル,C は C 社 高効率 DH5 αコンピテントセル,Giga は本製品を 示す。 他社製品との比較 ◆ 1 回で使い切れるように 100 μl ずつチューブに分注されています。 ◆ − 80℃で 12 か月間保存しても, 形質転換効率はほとんど低下しません。 通常 品 名 メーカー 商品コード DH5 α , Giga Competent E. coli Cell BDL DS229M −80℃ BDL DS229G −80℃ 操作方法概略 プラスミド DNA キャンペーン 包装 / 価格(¥) 価格(¥) 5×100μl / 10×100μl / 18,000 32,000 14,400 25,600 SOC medium 添付。形質転換効率:> 1×109 cfu/μg 回復培地を入れた新しい 1.5 ml チューブにコン ピテントセルを入れる。 凍結したコンピテントセルを氷 上で解凍し,プラスミド DNA を加え,5 分間インキュベート する。 Zip Competent Cell BL21(DE3) 室温で 5 分間インキュ ベートし,プレーティン グする。 プラスミド DNA メーカー 商品コード DH5 α , Jet Competent E. coli Cell BDL DS225S −80℃ Mini −80℃ BDL DS225 通常 キャンペーン 包装 / 価格(¥) 価格(¥) 2×100μl / 10×100μl / 5,000 18,000 4,000 14,400 10×100μl / 18,000 14,400 凍結したコンピテントセルを氷 上 で 解 凍 し,プ ラ ス ミ ド DNA を 加 え,5 分 間 イ ン キ ュ ベ ー トする。 約 5 分で 形質転換 操作が完了 回復培地(Recovery medium)添付。 ■ 関連製品 DH5 α , Competent E. coli Cell −80℃ BDL DS220 品 名 SOC medium 添付。形質転換効率:> 2×108 cfu/μg(pBR322) JM109, Competent E. coli Cell −80℃ BDL DS210 10×100μl / メーカー 商品コード BL21 (DE3), Zip Competent E. coli Cell −80℃ M BDL DS255 18,000 14,400 通常 キャンペーン 包装 / 価格(¥) 価格(¥) 10×100μl / 20,000 16,000 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 品 名 試薬 チューブからコンピテ ントセルをプレーティ ングする。 お問い合わせ先 Zip Competent Cell は タ ン パ ク 質 発 現 用 BL21(DE3) 株の迅速な形質転換を可能にしたコンピテントセルです。プラ スミド DNA を本製品に加え,ヒートショックおよびその後の 培養をせずに,そのままプレーティングできます。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ヒートショック不要な発現用コンピテントセル 形質転換効率:≧ 1 × 106 cfu/ μg SOC medium 添付。形質転換効率:> 2×108 cfu/μg(pBR322) 120715s_p21_k_p_i.indd 21 2012/06/29 14:44:38 22 2012 年 7 月 15 日号 遺伝子工学 NEW 遺伝子工学 RNA 合成 細胞導入に適した mRNA を合成するキット NEW mRNAExpress mRNA Synthesis Kit キット内容 ● pMRNAXP vector ● Phosphatase buffer ● Tail PCR primer mix ● RNase-free phosphatase ● Nuclease-free water ● Collection tube ● Reaction buffer ● Binding buffer ● NTP / Cap mix ● Washing buffer ● T7 RNA polymerase mix ● RNase-free DNase 哺乳動物細胞への導入に適した高純度な mRNA を合成する キットです。 ● Elution buffer ● Collection tube with filter cartridge ● Sequencing primers (forward / reverse) 品 名 メーカー 商品コード 特 長 包装 / 価格(¥) mRNA Synthesis Kit, mRNAExpress (5 reactions) SBI MR-KIT-1 ◆ 高濃度かつ高純度の mRNA を,強力な T7 RNA Polymerase によ り大量(20 ∼ 40 μg)に合成できます。 ◆ ARCA(anti-reverse cap analog) ,修飾核酸(5-methylcytidine- 1 kit / 162,000 ■ 細胞導入用試薬 RNAFection Transfection Reagent SBI MR750A-1 50μl / 24,000 5'-triphosphate および pseudouridine-5'-triphosphate)と,poly A Tail を有する mRNA を合成できます。そのため,作製した mRNA NEW の安定性が向上し,また宿主細胞への免疫応答を減少させます。 遺伝子工学 ◆ Phosphatase 処理により,RNA 末端の 5'-triphosphate を除去 核酸 精製 するため,宿主細胞への免疫応答を減少させます。 ◆ mRNA であるため,宿主細胞のゲノムに組み込まれることがありま せん。 ◆ キットにはスピンカラムが含まれており,合成した mRNA はそのま ま使用できます。 ◆ 合成した RNA の導入量を調節することにより,一過性発現レベルの 調節を容易に行えます(下図参照)。 高純度な DNA / RNA 精製キット Oligo Clean & Concentrator 標識反応や酵素反応後の反応液などから,有機変性剤やクロ ロホルムを使用せずに,DNA / RNA を高純度で精製するキッ トです。96 ウェルフォーマットのキットもあります。 ◆ 別売りの細胞導入試薬 RNAFection を用いることで,線維芽細胞や リンパ球を含む幅広い細胞種に導入できます。また,卵母細胞への マイクロインジェクションや,in vitro 翻訳にも使用できます。 シホームページ(http://www.funakoshi.co.jp/contents/5600) をご覧下さい。 T7 Promoter pUC Ori お問い合わせ先 5 UTR ◆ 高 純 度 な DNA,RNA が 得 ら れ ま す(A260/A280 > 1.8, A260/A230 > 1.8)。 ◆ 色素,蛍光試薬,ラベル試薬,塩,酵素,ヌクレオチド,短鎖オリ ゴを完全に除去します。 Multiple Cloning Site pMRNAxp RⅠ ◆ 逆転写反応後の DNA の精製にも効果的です。 ◆ 精製した DNA,RNA はハイブリダイゼーション,シークエンシング, PCR,ライゲーションなどに使えます。 ◆ 少 量 の 水 で 溶 出 で き ま す(#D4060, #D4061: ≧ 6 μ l, AmpR 3 UTR HⅠ poly A Tail #D4062,#D4063:≧ 10 μl)。 ◆ 精製可能な核酸の長さ:≧ 16 nt,最大 23 kb 試薬 ◆ 精製可能な核酸の種類:一本鎖(ss)および二本鎖(ds)DNA,RNA ◆ 結合量:ssDNA / RNA 10 μg,dsDNA 5 μg FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 ◆ 回収率:> 90% (≦ 5%) , Tween-20 (≦ 5%) , ◆ 対応可能な界面活性剤 : Triton X-100 Sarkosyl(≦ 5%),SDS(≦ 0.1%) HEK293 細胞への導入例 HEK293 細胞に図中で示した量の mRNAExpress GFP を導入した。 オリゴヌクレオチドの長さ(mer) 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ※ 本システムを用いて作製した,作製済み mRNA については,フナコ 特 長 本製品 他社製品 60 40 30 20 10 0 20 40 60 回収率(%) 80 100 オリゴヌクレオチドの回収率 120715s_p22-23_k_n_i.indd 22 2012/06/29 14:44:56 2012 年 7 月 15 日号 dNTPs 0 20 40 60 保持率(%) 80 100 ● DNA precipitation buffer ● DNA extraction buffer ● DNA wash buffer ● Deep well extraction plate with sealing mat(96 Well Plate Kit のみ) ヌクレオチドの除去 ● DNA standard set A ∼ H 品 名 メーカー 商品コード Oligo Clean & Concentrator Kit ZYR D4060 ZYR D4061 ● Proteinase K 包装 / 価格(¥) 50 preps 200 preps 1 kit / 1 kit / 15,000 58,000 * キット内容:Oligo binding buffer, DNA wash buffer , Zymo-spin Ⅰ C column, Collection tube ZR-96 Oligo Clean & Concentrator Kit ZYR D4062 2 × 96 preps ZYR D4063 4 × 96 preps 1 kit / 1 kit / 39,000 75,000 * キット内容:Oligo binding buffer, DNA wash buffer , Zymo-spin Ⅰ -96 plate, Collection plate, Elution plate, Cover foil * DNA,RNA の両方に使用できます。 NEW 遺伝子工学 DNA タンパク質発現 宿主細胞由来 DNA の検出キット Host Cell DNA Kit ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 NEW ● Quant-iT PicoGreen® dsDNA reagent solution ● Assay plate with plate sealing foil ● 2 ml sterile microfuge tube(Tube Kit のみ) ※PicoGreen は Life Technologies 社の登録商標です。同社ライセンスに 基づき,本キットに使用されています。 品 名 メーカー 商品コード 包装 / 価格(¥) CHO Host Cell DNA Kit CYG D550T in CYG D550W in E. coli Host Cell DNA Kit CYG D410T in CYG D410W in NS/0 Host Cell DNA Kit CYG D220T in CYG D220W in Tubes (50 tests) 96 Well Plate (96 tests) 1 kit / 1 kit / 79,000 79,000 Tubes (50 tests) 96 Well Plate (96 tests) 1 kit / 1 kit / 79,000 79,000 Tubes (50 tests) 96 Well Plate (96 tests) 1 kit / 1 kit / 79,000 79,000 ■ DNA Extraction Kit Host Cell DNA Kit に含まれている DNA 抽出試薬をセットにした キットです。優れた DNA 共沈試薬によりチューブ底やウェル底からペ レットが遊離するのを抑え,タンパク質等の生体液体試料中に残存した わずかな DNA を抽出できます。 特 長 ◆ DNA の抽出操作を 2 ml チューブで行うキットと,96 ウェルプレー トで行うキットがあります。 ◆ 抽出操作は 90 分以内に完了します。 ◆ 生体試料中に含まれるわずか 1 pg/ml 以下の混在 DNA を,高効率 宿主細胞由来 DNA の混在について トで行うキットがあります。 ◆ 96 ウェルプレートによるキットは,迅速かつハイスループットな操 作が可能で,多試料の場合に個別に行うよりも誤操作を低減できます。 ◆ DNA 抽出から検出まで,操作は 2 時間以内に完了します。 ◆ 測定波長:励起 485 nm /蛍光 525 nm(カットオフ:515 nm) ※正確な測定結果を得るために,操作途中に DNA がコンタミネーションし ないよう,ご注意下さい。 ● Proteinase K ● DNA precipitation buffer ● DNA extraction buffer ● DNA wash buffer ● 2 ml sterile microfuge tube(Tube Kit のみ) ● Deep well extraction plate with sealing mat(96 Well Plate Kit のみ) 品 名 メーカー 商品コード DNA Extraction Kit CYG D100T CYG D100W 包装 / 価格(¥) in Tubes (50 tests) in 96 Well Plate (96 tests) 1 kit / 1 kit / 44,000 44,000 FAX 03 5 - 684 1 - 775 TEL 03 5 - 684 1 - 620 ◆ DNA の抽出操作を 2 ml チューブで行うキットと,96 ウェルプレー キット内容 試薬 特 長 ムによる解析などに使用できます。 ◆ DNA 共沈試薬は qPCR 等の反応に影響を与えません。 お問い合わせ先 ワクチンやバイオ医薬品の製造研究において,CHO 細胞,NS/0 細 胞,E. coli を使用した組換え体タンパク質の生産法は,費用対効果の 高い手法ですが,生産・精製工程で宿主細胞由来の DNA が混入する リスクが残されています。医薬品などを介して由来宿主細胞から癌遺 伝子が転移する可能性を考慮し,世界保健機関では医薬品における宿 主細胞由来の混入 DNA を,1 投与当たり 10 ng 以下と定めています。 で抽出できます。 ◆ 得られた DNA 試料は DNA 染色や,qPCR,微量 DNA 検出システ 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 組換え体タンパク質中に混在する,宿主細胞由来の DNA を 検出するキットです。DNA 共沈試薬により微量 DNA を抽出 できる DNA 抽出試薬と,DNA 検出試薬 PicoGreen および 宿主細胞由来 DNA スタンダードを使用して,試料中に混在す る宿主細胞由来 DNA を高度に検出・定量します。宿主細胞と して CHO 細胞,E. coli ,NS/0 細胞用のキットがあります。 120715s_p22-23_k_n_i.indd 23 遺伝子工学 キット内容 6 mer 23 2012/06/29 14:45:00 24 2012 年 7 月 15 日号 カタログ発刊のお知らせ カタログをご希望の方は, 当社地区販売店までお申込み下さい。 販売店 〒113-0033 東京都文京区本郷2丁目9番7号 http://www.funakoshi.co.jp/ e-mail : info@funakoshi.co.jp 印刷用の紙にリサイ クルできます 不要となった際は, 古紙回収・リサイク ルに出してください ※本紙に記載されている価格は,2012 年 7 月 15 日現在です。 120715s_p24_i.indd 24 試薬に関して : Tel.03-5684-1620 Fax 03-5684-1775 e-mail : reagent@funakoshi.co.jp 機器に関して : Tel.03-5684-1619 Fax 03-5684-5643 e-mail : kiki@funakoshi.co.jp ZB-V07N-02( 2012.7, № 520 ) 2012/06/29 14:45:18
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