BD™ Phosflow Technology フローサイトメーターによる細胞内リン酸化タンパク質の解析 BDTM Phosflow Technology 細胞内シグナル伝達に関わっているタンパク質の活性化にはそのタンパク質に含まれているセリン/スレオニン、チロシン残基 のリン酸化が大きく関わっており、様々なキナーゼやホスファターゼによって制御されています。 リン酸化タンパク質は、T細胞/B細胞シグナリング、アポトーシス、細胞成長コントロール、細胞周期、細胞骨格の再構成、転 写などの重要な細胞プロセスで中心的な役割を果たしています。細胞内リン酸化タンパク質の検出は従来、ウェスタンブロッ ティング、免疫沈降、免疫組織染色などの技法が汎用されていますが、これらの技法の場合、解析時間がかかる、1つのサンプ ルで多項目の解析が難しい、比較的多くのサンプルを必要とするなどの限界がありました。 2002年、米国スタンフォード大学のギャリー・ノーラン博士の研究室より、“フローサイトメーターを用いた細胞内リン酸化 タンパク質の解析”が発表されました。BDではマルチカラー解析も可能なこの新しい技法を“BDTM Phosflow Technology”と してご紹介致します。 特長 • 全血、末梢血単核細胞などの細胞内リン酸化タンパク質をフローサイトメーターを用いて解析 • 迅速、高感度に検出 • ウェスタンブロッティング法よりも操作が簡便、測定時間短縮 • 細胞表面抗原用の蛍光標識抗体と組み合わせるなどのマルチカラー解析を実現 ウェスタンブロッティングとフローサイトメーターによる解析の比較(イメージ) A Sample 1 2 3 10 1 10 1 10 1 1 10 1 10 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 Average 1 Value 1 1 1 1 1 1 1 50 1 1 1 ~5 ~5 B 1 Western Blot 3 Flow Cytometry Cell Number C 2 1 図1 状態の異なる細胞集団におけるリン酸化の解析 10 100 1 10 100 1 10 100 Fluorescence Intensity 1 サンプル1:非リン酸化状態、 サンプル2およびサンプル3:リン酸化状態 サンプル2と3について、ウェスタンブロッティングでは大きな違いは 認められませんが、フローサイトメーターではCでみられるようにリン 酸化状態の違いを異なるパターンとして結果を得ることができます。 出典:P.O. Krutzik et al. Clinical Immunology 110 (2004) Western Blotting Flow Cytometry 細胞集団を解析 単一細胞レベルで解析 ホモジニアスなサンプルであることがことが必要 ヘテロジニアスな細胞でも解析可能 ワンパラメータ解析 マルチパラメータ解析 多くの細胞が必要 少ない細胞数でサブセット解析可能 多くの時間を要する 迅速である www.bd.com/jp/ BD Phosflow Protocol(概略)と解析パターン(イメージ) 細胞の刺激 Stimulus A Stimulus B Stimulus A+B 細胞の固定 特異的抗体の反応 Untreated cells Stim A Stim B Stim A+B リン酸化特異的抗体、 細胞表面抗原に対する抗体 Red Fluorescence 細胞膜透過処理 Green Fluorecence 図2 フローサイトメーターによる、異なるリン酸化タンパク質の解析 フローサイトメーターによる解析 BDTM Phosflow Technologyを用いることにより1度に異なるリン酸化タンパク質を 1細胞レベルで解析することができます。 出典:P.O. Krutzik et al. Clinical Immunology 110 (2004) 準備していただくもの • サンプル(全血や末梢血単核細胞など) • 細胞刺激剤 • 細胞固定試薬* • 細胞膜透過試薬* • リン酸化タンパク質特異的抗体 Phosflow Reagents* • その他特異的抗体(マルチカラー解析を実施する場合に必要となります) • Stain Buffer* * 巻末のProduct Listをご参照ください。 細胞表面抗原との同時染色解析例(Human) CD3+ CD4+ CD3+ CD4– 80 80 60 40 60 40 20 20 0 0 27.7 25.4 CD3-PerCP-Cy5.5 0 Alexa Fluor® 488 - Stat6 100 80 80 80 60 40 20 % of Max CD4-PE 20 100 % of Max CD3+ CD4 - 40 100 CD3+ CD4+ CD3 CD4 - 60 Alexa Fluor® 488 - Stat6 % of Max 46.9 % of Max 80 % of Max 100 % of Max 100 Alexa Fluor® 488 - Stat6 0.1 CD3– CD4– 100 60 40 20 0 40 20 0 Alexa Fluor® 647 - Stat3 60 0 Alexa Fluor® 647 - Stat3 Alexa Fluor® 647 - Stat3 解析例1 ヒト末梢血単核細胞をIL-6およびIL-4で刺激した場合の解析図 抗ヒト CD3 PerCP-Cy5.5、抗ヒト CD4 PE、抗ヒト リン酸化Stat6(pY641) Alexa Fluor® 488、抗ヒト リン酸化 Stat3(pY705) Alexa Fluor® 647で染色後フローサイトメーターで解析。 これらの解析図より、CD3+/CD4+、CD3+/CD4–、CD3–/CD4–の細胞集団においてStat6がリン酸化されていることが わかります。 www.bd.com/jp/ 2 細胞表面抗原との同時染色解析例(Mouse)および Protocol(概略) 4 10 3 10 2 10 1 Treated with PMA+LPS 1.91 PerCP-Cy5.5 - CD11b PerCP-Cy5.5 - CD11b Untreated 10 37.8 10 0 60.2 100 101 10 2 103 10 4 10 3 10 2 10 1 5.69 10 0 10 4 40.6 52.9 100 101 Alexa Fluor® 488 - B220 CD11b-B220+ CD11b+B22080 80 80 60 60 60 40 20 20 0 0 100 101 10 2 103 % of Max 100 % of Max 100 % of Max 100 40 103 10 4 CD11b-B220- 40 20 0 10 4 10 2 Alexa Fluor® 488 - B220 10 1 10 10 2 3 10 10 0 4 100 101 10 2 103 10 4 PE - p38 MAPK (pT180/pY182) CD11b+B220- CD11b-B220+ 80 80 80 60 60 60 40 40 20 20 0 0 0 10 1 10 10 2 3 10 10 4 % of Max 100 % of Max 100 % of Max 100 CD11b-B220- 40 20 0 0 10 1 10 10 2 3 10 10 4 0 10 1 10 10 2 3 10 10 4 Alexa Fluor® A647 - ERK1/2 (pT202/pY204) Untreated cells (unshaded) vs treated cells (shaded) 解析例2 C57BL/6 マウス脾臓細胞をPMA+LPS で刺激した場合の解析図 抗マウス CD11b PerCP-Cy5.5、抗マウス CD45R/B220 Alexa Fluor® 488、抗マウス リン酸化p38 PE、抗マウス リン酸化ERK1/2 Alexa Fluor® 647 で染色後フローサイ トメーターで解析。 これらの解析図より、 p38は主に CD11b+/B220– 細胞集団が刺激により活性化され リン酸化されていることがわかりますが、一方ERK1/2ではどの細胞集団においても リン酸化されていることがわかります。 解析例2を得るために、実施した Protocol (概略) サンプル、リン酸化タンパク質、同時に測定したい細胞表面抗原などによって周辺試薬(細胞固定試薬、細胞膜透過試 薬)の組み合わせが異なる場合があります。(詳しくはアプリケーションハンドブックをご覧ください。) マウス脾臓細胞を PMA+LPS を用いて15分間刺激 BD PhosflowTM Lyse/Fix Buffer (Cat. No. 558049) を用いて細胞を固定(37℃10分間) BD PhosflowTM Perm Buffer III (Cat. No. 558050) を用いて細胞膜透過処理(氷上30分間) BD Fc BlockTM (Cat. No. 553141) を用いて、Fc Receptor を ブロック(氷上15分間) 蛍光標識抗体で細胞を染色(室温暗所30分間) フローサイトメーターによる解析 3 www.bd.com/jp/ ■ BDTM Phosflow に関する詳細な情報やProtocolにつきましては、下記ウェブサイト、もしくはアプリケーションハンドブック でもご確認いただけます。 【ウェブサイト】 http://www.bdbiosciences.com/research へアクセスしていただき、 “BDTM Phosflow Technology”をご覧ください。 【アプリケーションハンドブック】 http://www.bdbiosciences.com/documents/Phosflow_Application_Handbook.pdf へアクセスしていただき “Techniques for Phospho Protein Analysis Application Handbook 1st Edition”をご覧ください。 テクニカルデータシートの入手方法 本誌で紹介されている製品のテクニカルデータシートは 弊社ウェブサイトよりダウンロードすることができます。 BDのウェブサイトにアクセスします。(http://www.bd.com/jp/) 左端の「製品情報」をクリックします。 バイオサイエンスの中の「試薬・抗体」をクリックします。 右下のカラム「データシート検索」をクリックします。 データシート検索用の画面が表示されます。 〜ここでお気に入りに登録することをお奨めします。〜 検索がヒットするとこのような画面が出てきます。 右から2番目のTDS(テクニカルデータシート)をクリックします。 抗体の必要な情報が、PDFファイル形式で入手できます。 www.bd.com/jp/ 4 Product List Antibodies - Single Color Description React Clone Isotype Format Size Hu J1-223,371 Ms IgG1,κ PE 50 tests 558275 40,000 Akt (pS473) Hu M89-61 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560404 40,000 NEW Alexa Fluor® 647 50 tests 560343 40,000 NEW PE 50 tests 560378 40,000 NEW Purified 50 tests 560397 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 50 tests 560048 40,000 Akt1 (PKBα, RAC-PK) BLNK (pY84) Hu Hu 55 J117-1278 Ms IgG1,κ Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560050 40,000 PE 50 tests 560049 40,000 50 tests 558444 40,000 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor 647 50 tests 558443 40,000 PE 50 tests 558442 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558693 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558692 40,000 PE 50 tests 558688 40,000 ® BLNK (SLP-65, BASH, BCA) Btk Hu, Ms Hu Btk (pY551) & Itk (pY511) Hu 2B11 53/Btk 24a/BTK(Y551) Ms IgG2a,κ Ms IgG2a Ms IgG1 Alexa Fluor® 647 50 tests 558528 40,000 PE 50 tests 558527 40,000 50 tests 558130 40,000 Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor 647 50 tests 558134 40,000 PE 50 tests 558129 40,000 ® βCatenin (pS45) c-Cbl (pY700) Hu Hu K63-363 47/c-Cbl Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ c-Cbl (pY774) Hu 29/c-Cbl Ms IgG1 CD3ζ(pY142) (CD247) Hu K25-407,69 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558666 40,000 PE 50 tests 558638 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558101 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558100 40,000 PE 50 tests 558087 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558103 40,000 PE 50 tests 558102 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558486 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558489 40,000 PE 50 tests 558448 40,000 40,000 CD221 (pY1131) (IGF-1 Receptor) Hu K74-218 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558588 CD22 (pY822) Ms 12a/CD22 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560075 40,000 PE 50 tests 560076 40,000 50 tests 558435 40,000 CREB (pS133)/ATF-1(pS63) Hu J151-21 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor 647 50 tests 558434 40,000 PE 50 tests 558436 40,000 ® EGFR (pY845) Hu 12A3 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558523 40,000 EGFR (pY1173) Hu 9H2 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558524 40,000 elF4E (pS209) Hu J77-925 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560240 40,000 PE 50 tests 560229 40,000 eNOS Elk-1 (pS383) Hu Hu 33/eNOS M21-1721 Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560102 40,000 PE 50 tests 560103 40,000 50 tests 560417 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor 647 50 tests 560413 40,000 NEW PE 50 tests 560412 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 50 tests 612592 40,000 ® ERK1/2 (pT202/pY204) Hu, Ms, Rat 20A Ms IgG1 Alexa Fluor® 647 50 tests 612593 40,000 PE 50 tests 612566 40,000 PerCP-Cy5.5 50 tests 560115 40,000 PE-Cy7 50 tests 560116 40,000 Pacific Blue 50 tests 560314 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558525 40,000 TM ERK2 5 Cat. No. 希望小売価格(円) AKT (pT308) www.bd.com/jp/ Hu, Ms G263-7 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558526 40,000 PE 50 tests 558530 40,000 NEW Antibodies - Single Color Description Ezrin (pY353) FAK (pS910) React Clone Hu I66-386 Hu K73-480 Isotype Ms IgG1,κ Ms IgG2b,κ Format Size Cat. No. 希望小売価格(円) Alexa Fluor® 488 50 tests 558627 Alexa Fluor® 647 50 tests 558628 40,000 40,000 PE 50 tests 558601 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558544 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558545 40,000 PE 50 tests 558540 40,000 Histon H3 (pS28) Hu, Ms HTA28 Rat IgG2a,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558217 40,000 IRAK4 Hu L29-525 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560315 40,000 NEW PE 50 tests 560303 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 50 tests 558629 40,000 IRF-7 (pS477/pS479) IRF-7 Hu Hu K47-671 K40-321 Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 558630 40,000 PE 50 tests 558621 40,000 50 tests 558706 40,000 NEW 50 tests 558707 40,000 NEW PE Alexa Fluor 488 ® IRS-1 (pY896) Hu K9-211 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor 647 50 tests 558441 40,000 PE 50 tests 558440 40,000 ® JNK (pT183/pY185) Hu Polyclonal Rabbit IgG Purified 50 tests 558268 40,000 LAT (pY171) Hu I58-1169 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 558519 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558518 40,000 PE 50 tests 558487 40,000 50 tests 558430 40,000 LAT (pY226) Hu J96-1238,58,93 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor 647 50 tests 558432 40,000 PE 50 tests 558433 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558504 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558505 40,000 PE 50 tests 558496 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 557879 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558577 40,000 PE 50 tests 558552 40,000 ® Lck Lck (pY505) Hu Hu MOL 171 4/Lck-Y505 Ms IgG1,κ Ms IgG1 MEK1/2 (pS222) Hu Polyclonal Rabbit IgG Purified 50 tests 558281 40,000 MEK1(pS298) Hu J114-64 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560192 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560043 40,000 PE 50 tests 560042 40,000 MEK1 MEK2 NF-κB p65 (pS529) Chick Hu Hu 25/MEK1 96/MEK2 K10-895,12,50 Ms IgG2a,κ Ms IgG2a,κ Ms IgG2b,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560101 40,000 PE 50 tests 560099 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560387 40,000 NEW PE 50 tests 560388 40,000 NEW Alexa Fluor 488 50 tests 558421 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558422 40,000 PE 50 tests 558423 40,000 PE-Cy 7 50 tests 560335 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 612594 40,000 ® TM p38 MAPK (pT180/pY182) Hu, Ms, Rat 36 Ms IgG1 Alexa Fluor® 647 50 tests 612595 40,000 PE 50 tests 612565 40,000 50 tests 560406 40,000 NEW 50 tests 560313 40,000 NEW TM PerCP-Cy 5.5 Pacific Blue TM p53 (acK382) Hu L82-51 Ms IgG1,κ Alexa Fluor 647 50 tests 560231 40,000 p53 (pS37) Hu J159-641,79 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560282 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560280 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558558 40,000 Ms IgG2b,κ p120 Catenin (pS268) Hu 9A,390 p120 Catenin (pS288) Hu 17/Catenin(cl.17) Ms IgG2a NEW ® Alexa Fluor® 647 50 tests 558559 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558562 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558561 40,000 PE 50 tests 558567 40,000 www.bd.com/jp/ NEW 6 Product List Antibodies - Single Color Description p120 Catenin (pS879) p120 Catenin (pT310) p120 Catenin (pT916) p130Cas (pY249) React Hu Hu Hu Hu PDGF Receptorβ(pY771) (CD140b) Hu, Ms PDGF Receptorβ(pY857) (CD140b) Hu, Ms 22/p120(pT310) 1/Catenin J169-757,12,2 J23-1044 J24-618 Isotype Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ Ms IgG2b,κ Ms IgG2b,κ Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ PDGF Receptorβ(pY1009) (CD140b) Hu, Ms J25-602 Ms IgG2b,κ PDGF Receptorβ(pY1021) (CD140b) Hu J105-412 Ms IgG1,κ PDPK1 (pS241) Hu J66-653,44,17 Ms IgG1,κ PKA RIIα (pS99) Hu I65-856-286 Ms IgG1,κ PKA RIIβ (pS114) Hu 47/PKA Ms IgG1,κ PKCα PKCα (pT497) Hu Hu, Ms 3/PKC K14-984 Ms IgG2a,κ Ms IgG1,κ PKCα (pT638) Hu 35/PKC Ms IgG1 PKCθ Hu 27 Ms IgG2a,κ PLCγ1 Hu 10/PLCgamma Ms IgG1,κ PLCγ1 (pY783) Hu 27/PLC Ms IgG1 PLCγ2 (pY759) Hu K86-689,37 Ms IgG1,κ PLC-γ2 PLK1 (pT210) 7 Clone K114-1011 www.bd.com/jp/ Hu Hu K86-1161 K50-483 Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ Format Size Cat. No. 希望小売価格(円) Alexa Fluor® 647 50 tests 558635 PE 50 tests 558634 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558667 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558668 40,000 PE 50 tests 558596 40,000 Alexa Fluor 488 50 tests 558669 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558670 40,000 PE 50 tests 558637 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558546 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558547 40,000 PE 50 tests 558538 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558424 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558425 40,000 ® 40,000 PE 50 tests 558426 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558427 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558428 40,000 PE 50 tests 558429 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558323 40,000 PE 50 tests 558322 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558419 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558418 40,000 PE 50 tests 558417 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560090 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560091 40,000 PE 50 tests 560092 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560164 40,000 PE 50 tests 560165 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560204 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560205 40,000 Alexa Fluor 488 50 tests 560242 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560243 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560139 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560140 40,000 PE 50 tests 560141 40,000 PE 50 tests 560267 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560266 40,000 PE 50 tests 560216 40,000 ® APC 50 tests 560344 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558566 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558565 40,000 PE 50 tests 558575 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 557884 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 557883 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558507 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558498 40,000 PE 50 tests 558490 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560135 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560136 40,000 PE 50 tests 560134 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558446 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558447 40,000 PE 50 tests 558445 40,000 NEW NEW Antibodies - Single Color Description PTEN React Hu Clone A2B1 Isotype Ms IgG1,κ Format Size Cat. No. 希望小売価格(円) Alexa Fluor® 647 50 tests 560003 40,000 PE 50 tests 560002 40,000 50 tests 558008 40,000 Phosphotyrosine Hu, Ms, Rat PY20 Ms IgG2b PE Pyk2 (pY402) Hu L68-I256,272 Ms IgG2b,κ Alexa Fluor 647 50 tests 560256 40,000 PE 50 tests 560255 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558554 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558555 40,000 PE 50 tests 558548 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558589 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558590 40,000 PE 50 tests 558549 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560431 40,000 NEW Alexa Fluor 647 50 tests 560432 40,000 NEW PE 50 tests 560430 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 50 tests 560434 40,000 NEW Alexa Fluor® 647 50 tests 560435 40,000 NEW PE 50 tests 560433 40,000 NEW PE 50 tests 560462 40,000 NEW Alexa Fluor® 647 50 tests 560465 40,000 NEW PE 50 tests 560389 40,000 NEW Alexa Fluor 647 50 tests 560390 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 50 tests 558439 40,000 Rb (pS780) Rb (pS807/pS811) S6 (pS240) Hu Hu Hu J146-35 J112-906 N4-41 Ms IgG1,k Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ ® ® S6 (pS235/pS236) S6 (pS244) SHP2 (pY542) Hu Hu, Ms Hu N7-548 N6-676 L99-921 Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ ® SLP-76 (pY128) SLP-76 Src (pY418) Stat1 (pY701) Hu Hu Hu Hu, Ms J141-668,36,58 H3 K98-37 4a Ms IgG1,κ Ms IgG2a,κ Ms IgG1,κ Ms IgG2a Alexa Fluor® 647 50 tests 558438 40,000 PE 50 tests 558437 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560056 40,000 NEW Alexa Fluor® 647 50 tests 560057 40,000 NEW PE 50 tests 560058 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560095 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560096 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 612596 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 612597 40,000 PE 50 tests 612564 40,000 PerCP-Cy5.5 50 tests 560113 40,000 TM 50 tests 560310 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558560 40,000 PE 50 tests 558537 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560191 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560190 40,000 PE 50 tests 560069 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558085 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558099 40,000 PE 50 tests 558557 40,000 50 tests 557814 40,000 Pacific Blue Stat1 (N-Terminus) Hu 1/Stat1 Ms IgG1 Stat1 (pS727) Hu K51-856 Ms IgG1,κ Sat3 (pS727) Hu 49/p-Stat3 Ms IgG1 M59-50 Stat3 (pY705) Hu, Ms 4/P-STAT3 Ms IgG2a Alexa Fluor® 488 Alexa Fluor 647 50 tests 557815 40,000 PE 50 tests 612569 40,000 PerCP-Cy5.5 50 tests 560114 40,000 TM 50 tests 560312 40,000 NEW PE 50 tests 560391 40,000 NEW APC 50 tests 560392 40,000 NEW Alexa Fluor® 488 50 tests 558136 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558137 40,000 PE 50 tests 558249 40,000 ® Pacific Blue Stat3 Stat4 (pY693) Hu Hu, Ms M59-50 38/p-Stat4 Ms IgG1,λ Ms IgG2b NEW www.bd.com/jp/ 8 Product List Antibodies - Single Color Description Stat5 (pY694) React Hu, Ms Clone 47 Isotype Ms IgG1 Format Size 50 tests 612598 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 612599 40,000 PE 50 tests 612567 40,000 PE-Cy7 50 tests 560117 40,000 PerCP-Cy5.5 50 tests 560118 40,000 TM 50 tests 560311 40,000 Alexa Fluor 647 50 tests 560000 40,000 PE 50 tests 560001 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 612600 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 612601 40,000 PE 50 tests 612701 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558243 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558242 40,000 Pacific Blue Stat6 Stat6 (PY641) Hu Hu Ms 18/P - Stat6 J71-773,58,11 Ms IgG1 Ms IgG2a Ms IgG1,κ Syk (pY348) Hu I120-772 Ms IgG1,κ TBK1 (pS172) Hu J133-587 Ms IgG1,κ TBK1 Hu 637Ig11.2 Ms IgG1,κ ® PE 50 tests 558252 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560081 40,000 50 tests 558529 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558602 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558603 40,000 PE 50 tests 558604 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558697 40,000 NEW Alexa Fluor® 647 50 tests 558698 40,000 NEW NEW PE 50 tests 558696 40,000 K91-860 Ms IgG1,κ Alexa Fluor® 647 50 tests 560051 40,000 TIE2 (pY1102) (TEK,VMCM,CD202b)Hu K93-754 Ms IgG2a,κ Alexa Fluor® 488 50 tests 560053 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560054 40,000 PE 50 tests 560052 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558674 40,000 WIP (pS488) Hu K32-824 Ms IgG1,κ ZAP70 (pY292) Hu J34-602 Ms IgG1,κ 4EBP1 (pT36/pT45) 4EBP1 (pT69) www.bd.com/jp/ Hu, Ms Hu Hu 17A M31-16 M34-273 Ms IgG1 Ms IgG1,κ Ms IgG1,κ NEW PE TIE2 (pY992) (TEK,VMCM,CD202b) Hu ZAP70 (pY319) /Syk (pY352) 9 23/Stat6 Cat. No. 希望小売価格(円) Alexa Fluor® 488 PE 50 tests 558673 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558516 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558515 40,000 PE 50 tests 558510 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 557818 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 557817 40,000 PE 50 tests 557881 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 560287 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560286 40,000 PE 50 tests 560285 40,000 Alexa Fluor 488 50 tests 560290 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 560289 40,000 PE 50 tests 560288 40,000 ® Antibodies - Dual Color React Description Dual-Color Pan/Phopho-Syk (Y352) Kit Hu Clone 4D10 17A/p-ZAP70 Isotype Format Ms IgG2a Ms IgG1 FITC PE Size 50 tests Cat. No. 希望小売価格(円) 557952 78,000 2nd Step Reagents Description React Clone Isotype Format Rabbit IgG PE F(ab')2 Rabbit Polyclonal Donkey PE Size 50 tests Cat. No. 希望小売価格(円) 558416 25,000 BDTM Phosflow Reagents 周辺試薬 (細胞固定試薬、細胞膜透過試薬 など) 希望小売価格(円) Description Size Cat. No. BDTM Phosflow Fix Buffer I 250 mL 557870 30,000 劇 BD Phosflow Lyse/Fix Buffer 250 mL 558049 30,000 劇 BDTM Phosflow Perm/Wash Buffer I 125 mL 557885 25,000 BDTM Phosflow Perm Buffer II 125 mL 558052 25,000 BDTM Phosflow Perm Buffer III 125 mL 558050 25,000 BD Phosflow Perm Buffer IV 10x 50 mL 560746 35,000 NEW TM TM BD Cytofix/Cytoperm Fixation/Permeabilization Solution 125 mL 554722 36,000 劇 BD CytofixTM Fixation Buffer 100 mL 554655 30,000 劇 BD PharmingenTM Stain Buffer (BSA) 500 mL 554657 32,000 BD PharmingenTM Stain Buffer (FBS) 500 mL 554656 30,000 TM ※ サンプル、リン酸化タンパク質、同時に測定したい細胞表面抗原などによって周辺試薬の組み合わせが異なる場合があります。 (詳しくはアプリケーションハンドブックをご覧ください。) 劇 医薬用外劇物 Isotype Controls Description Mouse IgG1,κ Isotype Control Format Alexa Fluor® 488 50 tests 557782 40,000 Alexa Fluor 647 50 tests 557783 40,000 Alexa Fluor® 488 50 tests 558055 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558053 40,000 PE 50 tests 558595 40,000 Alexa Fluor 488 50 tests 558716 40,000 Alexa Fluor® 647 50 tests 558713 40,000 ® Mouse IgG2a,κ Isotype Control Mouse IgG2b,κ Isotype Control MOPC-173 27-35 Size Cat. No. 希望小売価格(円) Clone MOPC-21 ® ■ ご不明な点などございましたら以下お問い合わせ窓口へご連絡ください。 E-Mailによるお問い合わせ : tech_cell@bd.com お電話によるお問い合わせ : 0120-4890-77 www.bd.com/jp/ 10 * BD、BDロゴおよびその他の商標はBecton, Dickinson and Companyが保有します。 ©2008 BD 66-005-03 R0-1001-001-200
© Copyright 2024 Paperzz