NOVA LiteTM IgG F-Actin

NOVA Lite® IgG F-Actin
708255
Προς Εξαγωγή Μόνο. Δεν διατίθεται προς πώληση στις Ηνωμένες Πολιτείες.
Για In Vitro Διαγνωστική Χρήση
CLIA Πολυπλοκότητα: Υψηλή
Ενδεικνυόμενη Χρήση
Το κιτ NOVA Lite® IgG F-Actin αποτελεί μια έμμεση ανάλυση ανοσοφθορισμού (IFA) στο επιθηλιακό
υπόστρωμα του εντέρου αρουραίων για τη διαλογή και τον ημιποσοτικό προσδιορισμό των αντισωμάτων
IgG αντι-F-ακτίνης στον ανθρώπινο ορό. Η παρουσία των αντισωμάτων gG αντιF-ακτίνης μπορεί να
χρησιμοποιηθεί σε συνδυασμό με κλινικά ευρήματα κι άλλες εργαστηριακές εξετάσεις, συνδράμοντας στη
διάγνωση των αυτοάνοσων ηπατικών νόσων, όπως της αυτοάνοσης ηπατίτιδας (AIH) και της
πρωτοπαθούς χολικής κίρρωσης (PBC).
Περίληψη και επεξήγηση της δοκιμασίας
Τα αντισώματα IgG αντι-F-ακτίνης αποτελούν το κύριο συστατικό των ονομαζόμενων αντισωμάτων αντιλείων μυών (ASMA).1-6 Αυτά τα αντισώματα εντοπίζονται σε ποσοστό μέχρι και 80% των ασθενών που
πάσχουν από αυτοάνοση ηπατίτιδα (AIH) και σε ποσοστό μέχρι και 30% των ασθενών που πάσχουν
από πρωτοπαθή χολική κίρρωση2,6, αλλά ενδέχεται, επίσης, να εντοπιστούν, συνήθως σε χαμηλούς
τίτλους, σε άτομα που δεν πάσχουν από τη νόσο AIH. Τα αντισώματα ASMA είναι ετερογενή και
περιλαμβάνουν αντισώματα σε ινώδη (F) και σφαιρική (G) μορφή ακτίνης, καθώς και συστατικά μη
ακτίνης, όπως η τουβουλίνη και τα ενδιάμεσα νημάτια.3,4,7 Αρκετά αυτοαντισώματα σχετίζονται με τη
νόσο AIH. Ωστόσο, τα αντισώματα IgG στην F-ακτίνη είναι τα πιο συγκεκριμένα αυτοαντισώματα για τη
νόσο AIH. 2,5
Ενώ οι δοκιμασίες ELISA για τα αντισώματα IgG F-ακτίνης, όπως το QUANTA Lite®Actin IgG ELISA,
επιτρέπουν τον εντοπισμό αντισωμάτων IgG αντι-F-ακτίνης με αντικειμενικό και ποσοτικό τρόπο, κάποια
εργαστήρια προτιμούν τη μέθοδο IFA για τη διαλογή αντισωμάτων IgG αντι-F-ακτίνης ή για την
επιβεβαίωση της παρουσίας τους, όταν εντοπίζονται από τμήματα ιστών νεφρού/στομάχου/ήπατος
(KSL) τρωκτικών. Η διαφοροποίηση της αντι-F-ακτίνης από τα άλλα αντισώματα σε συστατικά λείων
μυών είναι συχνά δύσκολη, όταν χρησιμοποιούνται συμβατικά υποστρώματα IFA, όπως τμήματα ιστών
KSL.2,5 Η αναγνώριση της αντι-F-ακτίνης αποτελεί ένα σημαντικό βοήθημα στη διάγνωση της νόσου
AIH. Αυτήν τη στιγμή δεν διατίθεται ένας "χρυσός κανόνας" για τη διάκριση της αντι-F-ακτίνης από άλλες
αντιδραστικότητες. 1,2 Τα πλακίδια που δημιουργούνται από επιθηλιακά κύτταρα εντέρου αρουραίων, τα
οποία προετοιμάζονται με χρήση μεθόδων ανάπτυξης και μονιμοποίησης, παρέχουν ένα νέο
υπόστρωμα για τον εντοπισμό των αντισωμάτων IgG αντι-F-ακτίνης από τη μέθοδο IFA. Αυτό το
υπόστρωμα ξεπερνά κάποιους περιορισμούς που αντιμετωπίζουν άλλες διαδικασίες IFA, καθώς το
μοτίβο IgG αντι-F-ακτίνης είναι διακριτό και τα άλλα αντισώματα που προκαλούν ένα μοτίβο παρεμβολής
σε πλακίδια KSL, δεν παρεμβάλλονται στο υπόστρωμα επιθηλιακών κυττάρων αρουραίων.
Αρχές της Διαδικασίας
Στην έμμεση μέθοδο ανοσοφθορισμού, τα δείγματα επωάζονται με υπόστρωμα αντιγόνου και τα μη
δεσμευμένα αντισώματα απομακρύνονται με πλύση. Στη συνέχεια, το υπόστρωμα επωάζεται με ειδικό
σύζευγμα σημασμένο με φθοριεσκίνη και κατόπιν, το μη δεσμευμένο αντιδραστήριο απομακρύνεται με
πλύση. Όταν προβάλλονται μέσω μικροσκοπίου φθορισμού, τα δείγματα εμφανίζουν φθορισμό στο
χρώμα του πράσινου μήλου που αντιστοιχεί στις περιοχές, όπου έχει δεσμευτεί το αυτοαντίσωμα. Ένα
δείγμα θεωρείται θετικό, εάν παρατηρηθεί ειδική χρώση στις ίνες F-ακτίνης που περιβάλλουν τα
περισσότερα κύτταρα σε εξαγωνικό μοτίβο και ορισμένες φορές και στις ίνες που διασταυρώνονται πάνω
από τα κύτταρα.
Αντιδραστήρια
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
Πλακίδια F-ακτίνης, 6 πηγαδάκια ανά πλακίδιο με αφυγραντικό
Αντι-ανθρώπινο IgG σύζευγμα, 1 φιαλίδιο (αίγας) συνδεδεμένο με φλουοροσκεΐνη σε ρυθμιστικό
διάλυμα που περιέχει χρωστική Evans Blue και 0,09% αζίδιο του νατρίου
Θετικός πρότυπος ορός ελέγχου (control) IgG F-ακτίνης, 1 φιαλίδιο ρυθμιστικού διαλύματος που
περιέχει 0,09% αζιδίου του νατρίου και αντισώματα ανθρώπινου ορού σε F-ακτίνη,
προαραιωμένο
Αρνητικός πρότυπος ορός ελέγχου (control) συστήματος IFA, 1 φιαλίδιο ρυθμιστικού διαλύματος
που περιέχει 0,09% αζιδίου του νατρίου χωρίς αντισώματα ανθρώπινου ορού σε F-ακτίνη,
προαραιωμένο
Συμπυκνωμένο διάλυμα PBS (40x), 2 φιαλίδιο
Μέσο συγκόλλησης (mounting medium) που περιέχει 0,09% αζιδίου του νατρίου, 1 φιαλίδιο
Καλυπτρίδες
1
Προειδοποιήσεις
1.
2.
3.
4.
Όλα τα ανθρώπινα υλικά που χρησιμοποιήθηκαν στην προετοιμασία των πρότυπων ορών για
αυτό το προϊόν έχουν εξεταστεί και βρέθηκαν αρνητικά για αντισώματα HIV, HBsAg και HCV από
εγκεκριμένες μεθόδους FDA. Ωστόσο, καμία μέθοδος ελέγχου δεν μπορεί να προσφέρει πλήρη
διασφάλιση για την απουσία των HIV, HBV, HCV ή άλλων μολυσματικών παραγόντων. Για αυτόν
το λόγο, ο θετικός ορός ελέγχου IgG F-ακτίνης και ο αρνητικός ορός ελέγχου συστήματος IFA
πρέπει να τυγχάνουν της ίδιας μεταχείρισης με ένα πιθανώς μολυσματικό προϊόν.8
Το αζίδιο του νατρίου χρησιμοποιείται ως συντηρητικό. Το αζίδιο του νατρίου είναι δηλητήριο και
δύναται να είναι τοξικό σε περίπτωση κατάποσης ή απορρόφησης μέσω του δέρματος ή των
ματιών. Το αζίδιο νατρίου μπορεί να αντιδράσει με μολύβδινες ή χάλκινες σωληνώσεις με
αποτέλεσμα την πρόκληση δυνητικά εκρηκτικών μεταλλικών ενώσεων αζιδίων. Αν για την
απόρριψη του αντιδραστηρίου χρησιμοποιούνται λεκάνες απόπλυσης, η συγκέντρωση των
αζιδίων μπορεί να αποφευχθεί ξεπλένοντας με άφθονο νερό.
Να χρησιμοποιείτε τον κατάλληλο ατομικό προστατευτικό εξοπλισμό όταν δουλεύετε με τα
αντιδραστήρια που παρέχονται.
Αντιδραστήρια που έχουν χυθεί πρέπει να καθαρίζονται αμέσως. Τηρείτε όλους τους
ομοσπονδιακούς, εθνικούς και τοπικούς περιβαλλοντικούς κανονισμούς για την απόρριψη
αποβλήτων.
Προφυλάξεις
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Αυτό το προϊόν είναι για in vitroδιαγνωστική χρήση.
Η προσθήκη αζιδίου ή άλλων συντηρητικών στα δείγματα ορού μπορεί να επηρεάσουν τα
αποτελέσματα.
Η μη πλήρης ή η αναποτελεσματική πλύση των πλακών IFA ενδέχεται να προκαλέσει υψηλά
ποσοστά παρασιτικών αποτελεσμάτων.
Η λειτουργία αυτής της μεθόδου σε αυτόματο αναλυτή και άλλες συσκευές διανομής, μπορεί να
δώσει διαφορετικά αποτελέσματα από αυτά που λαμβάνονται στη χειρωνακτική διαδικασία. Είναι
στην ευθύνη του κάθε εργαστηρίου να καθορίσει τις αποδεκτές τιμές και όρια της αυτόματης
διαδικασίας.
Η απόδοση της ανάλυσης επηρεάζεται από μια ποικιλία παραγόντων. Αυτοί συμπεριλαμβάνουν
τη θερμοκρασία εκκίνησης των αντιδραστηρίων, την ένταση της λυχνίας του μικροσκοπίου, την
ακρίβεια και επαναληψιμότητα της τεχνικής χορήγησης με πιπέττα, τη λεπτομερή πλύση και τη
διάρκεια των χρόνων επώασης κατά την ανάλυση. Προσεκτική τήρηση της συνοχής είναι
απαραίτητη για τη λήψη ορθών και επαναλήψιμων αποτελεσμάτων.
Συνιστάται η ακριβής τήρηση του πρωτοκόλλου.
Συνθήκες Αποθήκευσης
1.
2.
Αποθηκεύστε όλα τα αντιδραστήρια στους 2-8°C. Να μην παγώνουν. Είναι σταθερά για χρήση
μέχρι τη λήξη τους εάν αποθηκεύονται σύμφωνα με τις οδηγίες.
Το αραιωμένο ρυθμιστικό διάλυμα PBS είναι σταθερό για 4 εβδομάδες στους 2 - 8°C.
Συλλογή Δείγματος
Η διαδικασία πρέπει να πραγματοποιηθεί με δείγματα ορού. Η προσθήκη αζιδίου ή άλλων συντηρητικών
στα δείγματα της δοκιμασίας μπορεί να επηρεάσει αρνητικά τα αποτελέσματα. Μικροβιακή μόλυνση,
θέρμανση, αιμολυθέντα ή λιπαιμικά δείγματα περιέχοντα ορατά ξένα στοιχεία δεν πρέπει να
χρησιμοποιούνται.
Μετά τη συλλογή του δείγματος, ο ορός θα πρέπει να διαχωρίζεται άμεσα από το ολικό αίμα. Το CLSI
(NCCLS) Document Η18-Α3 συνιστά τις ακόλουθες συνθήκες φύλαξης για τα δείγματα: 1) Τα δείγματα
πρέπει να διατηρούνται σε θερμοκρασία δωματίου όχι περισσότερο από 8 ώρες. 2) Εάν η δοκιμασία δεν
ολοκληρωθεί μέσα σε 8 ώρες, καταψύξτε το δείγμα στους 2-8°C. 3) Εάν η δοκιμασία δεν ολοκληρωθεί
μέσα σε 48 ώρες ή απαιτείται η αποστολή του δείγματος, καταψύξτε στους –20°C ή χαμηλότερα. Τα
κατεψυγμένα δείγματα πρέπει να αναμιχθούν καλά μετά την απόψυξη και πριν από την εξέταση.
Διαδικασία
Υλικά που παρέχονται
5
1
1
1
2
1
1
Πλακίδια F-ακτίνης με 6 πηγαδάκια
7mL FITC αντι-ανθρωπίνου IgG συζεύγματος
0,8mL θετικού ορού ελέγχου IgG F-ακτίνης
0,5mL αρνητικού ορού ελέγχου συστήματος IFA
25mL συμπυκνωμένου διαλύματος PBS (40x)
7mL μέσου συγκόλλησης (Mounting Medium)
Πακέτο 10 καλυπτρίδων
2
Υλικά που απαιτούνται αλλά δεν παρέχονται
Μικροπιπέτες για μεταφορά όγκου 15-1000μL
Απιονισμένο ή αποσταγμένο νερό
Πιπέττες Pasteur ή μπουκάλια που λυγίζουν
Θάλαμος υγρασίας
Δοχείο 1L (για τη διάλυση του PBS)
Δοχείο Coplin
Μικροσκόπιο φθορισμού με διεγέρτη 495nm ή και προστατευτικό φίλτρου 515nm
Μέθοδος
Πριν ξεκινήσετε
1.
2.
3.
Όλα τα αντιδραστήρια και τα δείγματα θα πρέπει να βρίσκονται σε θερμοκρασία δωματίου (2026oC).
Αραίωση του συμπυκνωμένου διαλύματος PBS: ΣΗΜΑΝΤΙΚΟ: Αραιώστε το συμπυκνωμένο
διάλυμα PBS σε 1:40 προσθέτοντας το περιεχόμενο του φιαλιδίου συμπυκνωμένου διαλύματος
PBS σε 975 ml αποσταγμένου ή απιονισμένου νερού και αναμίξτε το καλά. Το ρυθμιστικό
διάλυμα PBS χρησιμοποιείται για την αραίωση δειγμάτων ασθενών και ως διάλυμα πλύσεων. Το
αραιωμένο ρυθμιστικό διάλυμα μπορεί να φυλαχθεί έως και 4 εβδομάδες στους 28oC.
Αραίωση δειγμάτων ασθενών:
α.
Αρχική διαλογή: Αραιώστε δείγματα ασθενών με αναλογία 1:40 με αραιωμένο ρυθμιστικό
διάλυμα PBS (δηλ. προσθέστε 50μL ορού σε 1,95mL ρυθμιστικού διαλύματος PBS).
β.
Τιτλοποίηση: Κάντε διαδοχικές διπλές αραιώσεις από την αρχική αραίωση διαλογής σε
όλα τα θετικά δείγματα με αραιωμένο ρυθμιστικό διάλυμα PBS (πχ 1:80, 1:160,
1:320...έως το τελικό σημείο).
Διαδικασία ανάλυσης
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Προετοιμασία των πλακιδίων υποστρώματος: Αφήστε το πλακίδιο υποστρώματος να έρθει σε
θερμοκρασία δωματίου πριν να το αφαιρέσετε από τη συσκευασία του. Σημαδέψτε το με μολύβι
και τοποθετήστε το σε κατάλληλο θάλαμο υγρασίας. Προσθέστε 1 σταγόνα (20-25μL) από τον μη
αραιωμένο θετικό και τον αρνητικό ορό ελέγχου στα πηγαδάκια 1 και 2 αντίστοιχα. Προσθέστε 1
σταγόνα (20-25μL) από το αραιωμένο δείγμα ασθενή στα υπόλοιπα πηγαδάκια.
Επώαση πλακιδίου: Επωάστε το πλακίδιο για 30 ± 5 λεπτά σε ένα θάλαμο υγρασίας (μια
βρεγμένη χαρτοπετσέτα στον πυθμένα ενός κλειστού πλαστικού ή γυάλινου δοχείου μπορεί να
διατηρήσει την κατάλληλη υγρασία). Μην αφήσετε να στεγνώσει το υπόστρωμα κατά τη
διαδικασία ανάλυσης.
Πλύση πλακιδίων: Μετά από την επώαση ξεπλύνετε τον ορό με αραιωμένο ρυθμιστικό διάλυμα
PBS χρησιμοποιώντας ένα πλαστικό μπουκάλι που λυγίζει ή μια πλαστική πιπέττα. Τοποθετήστε
το πλακίδιο και τη ροή του ρυθμιστικού διαλύματος PBS σε τέτοια θέση, έτσι ώστε να
ελαχιστοποιείται η μεταφορά των δειγμάτων από τη μια θέση στην άλλη κατά το πλύσιμο.
Αποφύγετε να κατευθύνετε τη ροή απευθείας πάνω στα πηγαδάκια, έτσι ώστε να μην
καταστραφεί το υπόστρωμα. Εάν θέλετε, τοποθετήστε τα πλακίδια σε ένα δοχείο Coplin με
αραιωμένο ρυθμιστικό διάλυμα PBS για χρονικό διάστημα έως και 5 λεπτών.
Προσθήκη φθορίζοντος συζεύγματος: Απομακρύνετε το ρυθμιστικό διάλυμα PBS που έχει
απομείνει. Τοποθετήστε το πλακίδιο σε θάλαμο υγρασίας και καλύψτε αμέσως κάθε πηγαδάκι με
μια σταγόνα φθορίζοντος συζεύγματος. Επωάστε τα πλακίδια για επιπλέον 30 ± 5 λεπτά.
Πλύση πλακιδίων: Επαναλάβετε το βήμα 3.
Καλυπτρίδα: Οι διαδικασίες τοποθέτησης καλυπτρίδας διαφέρουν από εργαστήριο σε
εργαστήριο. Παρολαυτά, προτείνεται η παρακάτω διαδικασία:
α.
Τοποθετήστε μια καλυπτρίδα σε μια χαρτοπετσέτα.
β.
Προσθέστε μέσο συγκόλλησης (mounting medium) σε μια συνεχή γραμμή στο κάτω άκρο
της καλυπτρίδας.
γ.
Αφαιρέστε το επιπλέον ρυθμιστικό διάλυμα PBS και τοποθετήστε το κάτω άκρο του
πλακιδίου στο άκρο της καλυπτρίδας. Τοποθετήστε προσεκτικά το πλακίδιο πάνω στην
καλυπτρίδα με τέτοιο τρόπο ώστε το μέσο συγκόλλησης να μεταφερθεί στο πάνω μέρος
του πλακιδίου χωρίς να δημιουργηθούν φυσαλίδες.
Έλεγχος Ποιότητας
Ο θετικός ορός ελέγχου IgG F-ακτίνης και ο αρνητικός ορός ελέγχου συστήματος IFA πρέπει να
χρησιμοποιούνται σε κάθε πλακίδιο, ώστε να διασφαλίζεται ότι όλα τα αντιδραστήρια και οι διαδικασίες
έχουν λειτουργήσει σωστά. Πρόσθετοι κατάλληλοι οροί ελέγχου μπορούν να προετοιμαστούν διαιρώντας
σε υποπολλαπλάσια δείγματα ανθρώπινου ορού πολλαπλών δοτών και αποθηκεύοντας σε θερμοκρασία
< -70oC. Για να είναι τα αποτελέσματα της δοκιμασίας έγκυρα, πρέπει να πληρούνται όλα τα παρακάτω
κριτήρια. Εάν κάποιο από αυτά τα κριτήρια δεν πληρούται, τα αποτελέσματα της δοκιμασίας πρέπει να
θεωρούνται άκυρα και η ανάλυση πρέπει να επαναληφθεί.
1.
Ο μη αραιωμένος θετικός ορός ελέγχου IgG F-ακτίνης πρέπει να έχει τιμή > 3+.
2.
Ο αρνητικός ορός ελέγχου συστήματος IFA πρέπει να έχει αρνητική τιμή.
3
Ερμηνεία των Αποτελεσμάτων
Αρνητική αντίδραση: Ένα δείγμα θεωρείται αρνητικό όταν η ειδική χρώση που περιγράφεται
παρακάτω, στην ενότητα "Θετική αντίδραση", είναι μικρότερη ή ίση με τον αρνητικό ορό ελέγχου
συστήματος IFA. Τα δείγματα μπορεί να παρουσιάζουν διάφορους βαθμούς ειδικής χρώσης ή χρώσης
παρασκηνίου σε άλλα κυτταρικά στοιχεία, αλλά πρέπει να είναι αρνητικά για τα αντισώματα IgG αντι- Fακτίνης.
Θετική αντίδραση: Ένα δείγμα θεωρείται θετικό, εάν παρατηρηθεί ειδική χρώση σε μεγαλύτερη ένταση
από τον αρνητικό ορό ελέγχου συστήματος IFA στις ίνες F-ακτίνης που περιβάλλουν τα περισσότερα
κύτταρα σε εξαγωνικό μοτίβο και ορισμένες φορές και στις ίνες που διασταυρώνονται πάνω από τα
κύτταρα.
Προσδιορίστε το βαθμό ή την ένταση φθορισμού χρησιμοποιώντας τα εξής κριτήρια:
4+
Πολύ έντονος φθορισμός "πράσινου μήλου"
3+
Έντονος φθορισμός "πράσινου μήλου"
2+
Ευδιάκριτος θετικός φθορισμός
1+
Ελάχιστος ειδικός φθορισμός που επιτρέπει τη σαφή διαφοροποίηση της χρώσης
F-ακτίνης από τον φθορισμό παρασκηνίου.
Ερμηνεία μοτίβου: Ενδέχεται να παρουσιαστεί μια ποικιλία μοτίβων πυρηνικής ή/και κυτοπλασμικής
χρώσης ανάλογα με τους τύπους και τις σχετικές ποσότητες αυτοαντισωμάτων που εμφανίζονται στο
δείγμα. Μόνο το μοτίβο που περιγράφεται παραπάνω, στην ενότητα "Θετική αντίδραση", πρέπει να
θεωρείται θετικό για τα αντισώματα IgG αντι-F-ακτίνης. Όλα τα άλλα μοτίβα πρέπει να θεωρούνται
αρνητικά.
Περιορισμοί της Διαδικασίας
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Υψηλός τίτλος του μοτίβου IgG αντι-F-ακτίνης είναι συνδεδεμένος με τη νόσο AIH, αλλά δεν
πρέπει να θεωρείται διαγνωστικός. Το αποτέλεσμα IgG αντι-F-ακτίνης πρέπει να αξιολογηθεί σε
συνδυασμό με άλλα εργαστηριακά αποτελέσματα, καθώς και με το γενικό κλινικό ιστορικό του
ασθενούς.
Διάφοροι
εξωτερικοί
παράγοντες
επηρεάζουν
την
ευαισθησία
της
δοκιμασίας,
συμπεριλαμβανομένου του τύπου μικροσκοπίου φθορισμού που χρησιμοποιείται, της έντασης και
της παλαιότητας της λυχνίας, της μεγέθυνσης που χρησιμοποιείται, του συστήματος φίλτρου και
του παρατηρητή.
Σε περίπτωση που χρησιμοποιείται ένα ζωνοπερατό φίλτρο αντί ενός φίλτρου φραγής 515nm,
ενδέχεται να παρατηρηθεί αυξημένη τεχνητή χρώση.
Χρησιμοποιείτε μόνο μολύβι για την σήμανση των πλακιδίων. Η χρήση οποιουδήποτε άλλου
γραφικού υλικού ενδέχεται να προκαλέσει τεχνητή χρώση.
Όλα τα δοχεία coplin που χρησιμοποιούνται για το ξέπλυμα των πλακιδίων θα πρέπει να
καθαρίζονται πλήρως από κατάλοιπα χρώματος. Αν χρησιμοποιηθούν δοχεία coplin που
περιέχουν κατάλοιπα χρώματος, ενδέχεται να προκληθεί τεχνητή χρώση.
Τα χαρακτηριστικά επιδόσεων της ανάλυσης δεν έχουν διαπιστωθεί για το πλάσμα ή άλλους
τύπους δειγμάτων εκτός του ορού.
Αναμενόμενες Τιμές
Η ικανότητα της μεθόδου NOVA Lite® IgG F-Actin να ανιχνεύει τα αντισώματα IgG F-ακτίνης εκτιμήθηκε
σε σύγκριση με τη μέθοδο QUANTA Lite® F-Actin IgG ELISA (INOVA Diagnostics, Inc) που κυκλοφορεί
στο εμπόριο. Τα αποτελέσματα ELISA αξιολογήθηκαν ως θετικά, εάν το δείγμα των ασθενών ήταν 20
μονάδες ή μεγαλύτερο και ως αρνητικά εάν ήταν μικρότερο από 20 μονάδες.
Φυσιολογικές Τιμές
Αναλύθηκαν τετρακόσια ενενήντα τρία δείγματα από δότες φυσιολογικού αίματος με χρήση της μεθόδου
NOVA LiteTM IgG F-Actin. Εκτός από 4 από τα 493 κανονικά δείγματα (ειδικότητα 99,2%), τα υπόλοιπα
ήταν αρνητικά σύμφωνα με τη μέθοδο NOVA Lite® IgG F-Actin.
Σύγκριση μεταξύ των μεθόδων NOVA Lite® IgG F-Actin IFA και QUANTA
Lite® F-Actin IgG ELISA
Για τον προσδιορισμό του ποσοστού συμφωνίας θετικών και αρνητικών δειγμάτων από τις αναλύσεις,
αναλύθηκαν 992 δείγματα που περιείχαν αντισώματα σε ένα ευρύ φάσμα αντιγόνων με τις μεθόδους
NOVA Lite® IgG F-Actin IFA και QUANTA Lite® Actin IgG ELISA. Αυτά τα δείγματα περιελάμβαναν 493
δότες φυσιολογικού αίματος, 60 ασθενείς που έπασχαν από κλινικά καθορισμένες νόσους (ρευματοειδή
αρθρίτιδα, διάχυτο ερυθηματώδη λύκο και σκληροδερμία), 40 δείγματα με καθορισμένα αντισώματα
(μολυσματικές νόσους και αυτοαντισώματα) και 399 δείγματα από ασθενείς με υποψία ηπατικής νόσου.
4
Αρ.=992
NOVA Lite® IgG F-Actin
Θετικό
NOVA Lite® IgG F-Actin
Αρνητικό
Σύνολο
% συμφωνίας θετικών
% συμφωνίας αρνητικών
% συνολικής συμφωνίας
QUANTA Lite® Actin IgG
ELISA
Θετικό
269
QUANTA Lite® Actin IgG
ELISA
Αρνητικό
21**
69*
338
290
633
702
654
992
269/338 (80%)
633/654 (97%)
902/992 (91%)
*39 από τα 69 δείγματα διαγνώστηκαν σχεδόν θετικά σύμφωνα με τη μέθοδο ELISA
**14 από τα 21 δείγματα διαγνώστηκαν ως 1+ με τη μέθοδο IFA (χαμηλή αντιδραστικότητα)
QUANTA Lite, NOVA Lite και INOVA Diagnostics είναι σήματα κατατεθέντα Copyright 2011 All Rights Reserved©
5
Σύνολο
Βιβλιογραφία
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
Chretien-Leprince P, Ballot E, Andre C, et al. Diagnostic value of anti-F-actin antibodies in a
French multicenter study. Ann NY Acad Sci 1050: 266-273, 2005.
Villalta D, Bizzaro N, Da Re M, et al. Diagnostic accuracy of four different immunological methods
for the detection of anti-F-actin autoantibodies in type 1 autoimmune hepatitis and other liver
related disorders. Autoimmunity 41: 105-110, 2008.
Czaja A, Norman G: Autoantibodies in the diagnosis and management of liver disease. J Clin
Gastroenterol 37: 315-329, 2003.
Toh BH. Smooth muscle autoantibodies and autoantigens. Clin exp Immunol 38: 621-628, 1979.
Fusconi M, Cassani F, Zauli D, et al. Anti-actin antibodies: a new test for an old problem. Journal
of Immunological Methods 130: 1-8, 1990.
Granito A, Muratori L, Muratori P, et al. Antibodies to filamentous actin (F-actin) in type 1
autoimmune hepatitis. J Clin Path 59: 280-284, 2006.
Dighiero G, Lymberi P, Monot C. Sera with high levels of anti-smooth muscle and antimitochondrial antibodies frequently bind to cytoskeleton proteins. Clin exp Immunolol 82: 52-56,
1990.
Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. Centers for Disease Control/National
Institute of Health, 2007, Fifth Edition.
Κατασκευαστής:
INOVA Diagnostics, Inc.
9900 Old Grove Road
San Diego, CA 92131
United States of America
Technical Service (U.S. & Canada Only) :
877-829-4745
Technical Service (Outside the U.S.) : 00+ 1 858-805-7950
support@inovadx.com
Aντιπροσωπευτικός:
Medical Technology Promedt Consulting GmbH
Altenhofstrasse 80
D-66386 St. Ingbert, Germany
Tel.: +49-6894-581020
Fax.: +49-6894-581021
www.mt-procons.com
628255GRC
August 2011
Revision 0
6

Download Report