No. 510 特集 Feature Articles タンパク質定量キットから抗体まで，幅広くご紹介！ 神経生理学関連製品特集 ･･････････････････････ p.4 遺伝子工学 磁性カラムを用いたウイルス導入用 Magnetofection 試薬 Viro-MICST ･･･････････････････････････････････････････ p.8 機器 小型倒立型蛍光顕微鏡 LumaScope 500･･････････････････････････････････････ p.11 遺伝子機能解析 第 3 世代のプライマー・プローブ pentabase を用いたプライマー・プローブ合成受託サービス ･･･ p.16 IRIS Dye の使用例（p.7 参照） 抗 GAR 抗 体（IRIS 2 標 識 ）， 抗 GAM 抗 体（IRIS 3 標 識 ） を 用 い た U2-OS 骨肉腫細胞の細胞イメージング 120315s_p01_i.indd 2 抗 GAM 抗体（IRIS 3 標識）を用いた ヒト神経芽細胞腫の細胞イメージング p.13 2012/03/02 14:41:14 2 2012 年 3 月 15 日号 遺伝子機能解析 CONTENTS 特 集 神経生理学関連製品特集 第 3 世代のプライマー・プローブ pentabase を用いたプライマー・プローブ合成受託サービス （PEN 社） ･･･････････････････････････････････････････ 16 α -Synuclein を迅速に定量するキット SensoLyte α -Synuclein ELISA Kit（ANA 社）････････････････ 4 創薬研究 アルツハイマー病関連因子クラステリンの定量キット Quantikine Mouse Clusterin ELISA Kit（RSD 社）･････････････ 各種物質の測定や活性評価を承ります 4 生体試料分析受託サービス（各社） 神経損傷のマーカー因子 Enolase 2 の定量キット Quantikine Human Enolase 2 ELISA Kit（RSD 社）････････････ 5 細胞培養 マウス Shh の N 末端ペプチドを定量するキット 微生物同定受託サービス（日鉄環境エンジニアリング（株）） Quantikine Mouse Sonic Hedgehog N-terminal ELISA Kit （RSD 社）･････････････････････････････････････････････ 5 Human Spadin EIA Kit（PLI 社）････････････････････････ 6 ･･･ 19 細胞情報伝達 神経疾患研究用抗体のゴールドスタンダード パーキンソン病関連抗体（BAB 社）････････････････････････ ･･･････････････････････ 18 オートファジー研究に有用な化合物ライブラリー 6 Autophagy Library（MOL 社）･････････････････････････････････ 19 神経細胞染色用トレーサー NEUROBIOTIN Tracer（VEC 社）････････････････････････････ 7 抗 体 脂質代謝関連研究に有用な高品質の抗体 脂質代謝関連抗体（NOV 社） ･･････････････････････････････････ 20 生化学用一般試薬 革新的な蛍光色素 IRIS Dye（MTT 社）･･･････････････････････････････････････････ 7 免疫化学 フローサイトメトリー用マルチカラー抗ヒト CD 抗体 （CGS 社）･･･････････････････････････････････････････････････ 21 遺伝子工学 Th2 細胞性免疫反応研究に有用なキット 磁性カラムを用いたウイルス導入用 Magnetofection 試薬 Viro-MICST（OZB 社）････････････････････････････････････････ Taq DNA ポリメラーゼを含むマイコプラズマ検出キット VenorGeM OneStep Mycoplasma Detection Kit for Endpoint PCR （MNV 社）････････････････････････････････････････････････ Mouse Anti-Ovalbumin IgG1 EIA Kit（CAY 社）･･･････････････････ 22 8 ヒト IgG1 / IgG4 を利用した薬物動態研究に有用なキット Human IgG1 / IgG4 Therapeutic EIA Kit（CAY 社）････････････････ 22 9 着色済みの一本鎖 RNA サイズマーカー DynaMarker® Prestain Marker for RNA（BDL 社）･････････････････ 10 細胞接着／細胞骨格 Human Glypican-3 ELISA Kit（BMI 社）････････････････････ 10 機 器 小型倒立型蛍光顕微鏡 5 種類の組織切片用処理試薬のセット Total Cutting Solution Kit（POL 社）････････････････････････････ 23 金コロイド染色に最適な組織切片用接着剤／封入剤 BIOBOND / BIOMOUNT（CRL 社）･･････････････････････････････ 23 その他 キャンペーン情報 ･･･････････････････････････････････････････ 3 展示会出展のお知らせ ･･･････････････････････････････････････ 3 フナコシニュースの送付先変更および 新規送付希望について ･････････････････････････････････････ 15 LumaScope 500（ETL 社）････････････････････････････････････ 11 タンパク質／酵素 NBR1 または p62 定量用 ELISA キット オートファジー関連因子 ELISA キット（ADV 社）････････････････ 12 PEG 化タンパク質を検出する ELISA キット PEGylated Protein ELISA Kit（ADV 社）･････････････････････････ 13 サイトカイン／増殖因子／ホルモン Progranulin ELISA Kit（KOM 社）･･･････････････････････････ 14 in vivo アッセイにも使用可能な組換え体 Progranulin Tag-free Progranulin（KOM 社）･･･････････････････････････････ 15 120315s_p02-03_i.indd 2 2012/03/02 14:41:45 2012 年 3 月 15 日号 キャンペーンおよびモニター内容，対象製品等の詳細は，上記のフナコシホームページをご 覧下さい。 バイオアカデミア（株） 新春汎用品（PCR 用酵素・ ホスファターゼ・抗タグ抗体）50％ OFF キャンペーン 3 フナコシは下記の学会等の展示会に出展いたします。会場にて 皆様のご来場をお待ちしております。なお，詳細については， 下記までお問い合わせ下さい。 当社展示会担当 Tel. 03-5684-1653 Fax 03-5684-1654 e-mail：marketing@funakoshi.co.jp 期間：∼平成 24 年 3 月 30 日 Roush Life Sciences 社 Autofil フィルターユニット 3 ケースご購入で 専用スタンドプレゼント キャンペーン 期間：∼平成 24 年 3 月 31 日 名 称 会 期 展示会場 日本農芸化学会 2012 年度大会 3 月 23 日∼ 3 月 25 日 京都女子大学 第 89 回 日本生理学会大会 3 月 29 日∼ 3 月 31 日 松本市総合体育館 BIO tech 2012 第 11 回 国際 4 月 25 日∼ 4 月 27 日 東京ビッグサイト バイオロジー展／技術会議 Epigentek Group 社 Bisulfite Conversion Kit 25% OFF キャンペーン 期間：∼平成 24 年 3 月 31 日 （株）トランスジェニック IR / MAR 遺伝子増幅法 DNA 試薬 50％ OFF キャンペーン 期間：∼平成 24 年 3 月 31 日 好評配布中 ! Cytoskelton 社 Ras / FtsZ / ECM 関連製品 30% OFF キャンペーン 期間：∼平成 24 年 4 月 30 日 GeneTex 社 インターナルコントロール用抗体セット プレゼント キャンペーン 期間：∼平成 24 年 4 月 30 日 2012 Polyclonal Antibody Portfolio （A4 変型版，約 104 ページ，英語版カタログ） Bethyl Laboratories 社の幅広いカテゴリー の抗体をまとめてご紹介しています。 MP-Biomedicals 社 FastPrep-24 System 試料ホルダープレゼント キャンペーン 期間：∼平成 24 年 5 月 31 日 好評配布中 ! Novus biological 社 Epi-Plus 抗修飾ヒストン抗体＆ ChromataChIP Kit 40% OFF キャンペーン 期間：∼平成 24 年 5 月 31 日 （A4 変型版，約 120 ページ，英語版カタログ） Oxford Biomedical Research 社 Total Antioxidant Power Kit Research Catalog-Target Products of Cancer Research 2012 無償トライアル キャンペーン （数量限定，なくなり次第終了） Spring Bioscience 社の高親和性を示すウサ ギモノクローナル抗体を始めとする免疫染色 用抗体および，免疫染色用キット，抗体アレ イをご紹介しています。 ※カタログをご希望の方は，フナコシホームページのオンライン請求か，当 社営業担当（Fax 03-5684-1634）までお申し込み下さい。 NO T E ※本紙に記載されている価格は，2012 年 3 月 15 日現在です。 ※本紙に掲載されている製品は，すべて研究目的用にのみ販売しています。医薬品，診断用医薬品， 食品，食品検査等の用途には使用できません。 ※M印の製品は，「遺伝子組換え生物等の使用等の規制による生物の多様性の確保に関する法律 （通称：カルタヘナ法）」使用規制対象となりますので，ご使用に際しては規制に則し，適切にお取 り扱い下さい。 ※D印の製品は，取り扱いに厳重な注意を要する製品であり，ご購入時に「使用目的確約書」が必 要になります。ご注文の際は，「使用目的確約書」に直筆でご記入の上，販売店経由で当社までお 送り下さい。確約書受領後に製品を発送させていただきます。また，これらの製品をご購入後は， 鍵の掛かる場所での保管をお願いいたします。 ※BC印の製品は,「毒物及び劇物取締法」に基づく医薬用外毒劇物です。法規制に従って，保管，廃 棄等して下さい。 ※c印の製品は，毒性があるため，取り扱いに注意または厳重な注意が必要です。 製品は，鍵の掛かる場所に保管して下さい。添付されているデータシートや商品ラベルをよくお読 み下さい。 ※d印の製品は，「消防法」により危険物第四類第三石油類に指定されており，取り扱いには注意 が必要です。法規制に従って，取り扱い，保管，廃棄等を行って下さい。 ※g印の製品は，「消防法」により危険物第四類アルコール類に指定されており，取り扱いには注 意が必要です。法規制に従って，取り扱い，保管，廃棄等を行って下さい。 ※A印の製品には安全にご利用いただくための警告ラベルが貼られています。表示に従って安全対策 を実施して下さい。 ※E印は，液体窒素中での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送していますが，製品到 着後，直ちに液体窒素中で保存して下さい。 120315s_p02-03_i.indd 3 ※−80 ℃ 印は，−80 ℃ での保存を要する製品です。ドライアイス包装で配送していますが，製品 到着後，直ちに−80 ℃ のフリーザー等に保存して下さい。 ※品名中の〈 〉は，別名を表します。（例 Anti - EGF〈Anti - Epidermal Growth Factor〉 ） ※説明文中の［ ］の数字は，Chemical Abstracts Service Registry Number（CAS番号）です。 ※略号：Mono : Monoclonal, Poly : Polyclonal, AAPu : Antigen Affinity Purified, PAPu : Protein A/G Affinity Purified, APu : Affinity Purified, Pu : Purified, AP : Alkaline Phosphatase, FAM : Mono - 5（and - 6）- Carboxyfluorescein, HRP : Horseradish Peroxidase, PE : Phycoerythrin, ChIP : Chromatin Immunoprecipitation, Dot : Dot Blotting, ELISA : Enzyme - linked Immunosorbent Assay, EMSA : Electrophoretic Mobility Shift Assay（Gel Shift Assay）, FCM : Flow Cytometry, IC : Immunocytochemistry, IF : Immunofluorescence, IHC : Immunohistochemistry, IP : Immunoprecipitation, Neut : Neutralization, RIA : Radio Immuno Assay, West : Western Blotting ※外観・仕様は改善のため，予告なく変更することがあります。 ※ライフサイエンス関連分野におけるPCR用酵素およびPCR用酵素を含む製品やTaqManなどの検出 用プローブは，Life Technologies 社が特許を有しています。 使用に当たっては同社の許可が必要な場合があります。 ※記載されている会社および商品名は，各社の商標または登録商標です。 ※本紙には各メーカーから提供された画像・図表が掲載されています。なお，画像・図表の著作権は 各メーカーが保有しています。 ※表示価格に，消費税等は含まれていません。一部価格が予告なく変更される場合がありますので， あらかじめご了承下さい。 ※ご注文の際は， ［品名，メーカー，商品コード，包装，数量］をお知らせ下さい。 2012/03/02 14:41:49 4 神経生理学関連製品特集 NEW 2012 年 3 月 15 日号 NEW NEW 神経／イオンチャネル パーキンソン病 神経／イオンチャネル ELISA 神経疾患 ELISA α -Synuclein を迅速に定量するキット アルツハイマー病関連因子クラステリンの定量キット SensoLyte α -Synuclein ELISA Kit Quantikine Mouse Clusterin ELISA Kit パーキンソン病との関連性が報告されているα -Synuclein を，サンドイッチ法により迅速に比色定量する ELISA キット です。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。 クラステリンとは α -Synuclein とは α -Synuclein は，パーキンソン病の神経細胞で観察される Lewy 小体の主要な構成成分で，140 個のアミノ酸残基からなる分子量 14.5 kDa のタンパク質です。分子間相互作用に関与すると考えられ ている N 末端領域と，酸性 C 末端領域から構成されており，天然変性 タンパク質として知られています。 α -Synuclein は主に脳で発現しており，特に小脳，視床，大脳新皮質， 海馬，線条体領域での発現量が高く，脳以外の組織での発現量は非常 に低いことがわかっています。 α -Synuclein の生理学的な役割はまだ解明されていませんが，脂 質との相互作用に関係する KTKEGV 繰り返し配列が不完全な形で存 在することから，シナプス小胞の恒常性への関与が示唆されています。 特 長 クラステリン（Clusterin）はアポリポタンパク質 J とも呼ばれる分 泌型多機能性タンパク質で，その名前は細胞凝集を誘導することに由 来しています。クラステリンは様々なタンパク質と結合し，ミスフォー ルディングした細胞外タンパク質のシャペロンとして作用します。そ の機能としては，βアミロイド原線維の蓄積を抑制し，アミロイド斑 によるアルツハイマー病へのダメージを防ぐことが挙げられます。 マウスのクラステリンは，2 つの coiled-coil ドメイン，2 つの核 局在化シグナル（NLS），および 1 つのヘパリン結合ドメインを有す る前駆体として合成されます。細胞内でシグナルペプチドが切断され ると，N- グリコシルされたα鎖およびβ鎖が生成し，これらがジスル フィド結合してヘテロ二量体を形成します。この成熟型マウスクラス テリンは，ヒトと 77％，ラットと 93％のアミノ酸相同性を有します。 特 長 ◆ 抗α -Synuclein 抗体がプレコートされた 96 ウェルストリッププ 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です レートが付属しています。 ◆ 天然型および組換え体マウスクラステリンのいずれも定量できます。 ◆ アッセイは 4.5 時間以内に完了します。 ◆ キットに含まれる試薬は Ready-to-use です。 ◆ 試料と検出用抗体を同時に添加するため，操作ステップが少なくなっ ています。 ◆ 測定動物種：マウス＊ 1 ◆ 測定試料：血清，血漿（EDTA，ヘパリン処理），細胞培養上清， 細胞ライセート＊ 2，尿 ◆ β - およびγ -Synuclein との交差性はありません。 ◆ 測定範囲：0.781 ∼ 50 ng/ml ◆ 測定動物種：ヒト，マウス，ラット お問い合わせ先 ◆ 測定試料：血清，血漿，細胞／組織ライセート，脳脊髄液 ◆ 必要試料量：10 ∼ 20 μl ◆ 感度：0.031 ng/ml ◆ 測定波長：450 nm（補正波長：540 または 570 nm） ＊ 1 ヒトおよびラット Clusterin の定量はできません。 ◆ 測定範囲：8 ∼ 500 pg/ml ＊ 2 細胞ライセート調製用の Cell lysis buffer の別売りもあります。 ◆ 感度：3 pg/ml 詳細は当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下 試薬 ◆ インキュベーション時間：4 時間＋ 15 ∼ 30 分 さい。 ◆ 測定波長：450 nm ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ ※ キ ッ ト 内 容 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. funakoshi.co.jp/node/17885）をご覧下さい。 ※ キ ッ ト 内 容 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. funakoshi.co.jp/node/17302）をご覧下さい。 品 名 品 名 メーカー 商品コード 各種マウス試料中のクラステリン（Clusterin）をサンドイッ チ法により定量する ELISA キットです。 包装 / 価格（￥） α -Synuclein, Human/Mouse/Rat, Quantitative ELISA Kit, Colorimetric, SensoLyte (96 well) ANA 55550 1 kit / 99,000 メーカー 商品コード Clusterin, Mouse, ELISA Kit, Quantikine (96 well) RSD MCLU00 包装 / 価格（￥） 1 kit / 74,000 ※ R&D Systems 社では，抗 Clusterin 抗体，組換え体 Clusterin， ※ AnaSpec 社では，抗 Synuclein 抗体および組換え体 Synuclein を Clusterin 測定用 ELISA 構築キットも取り扱っています。詳細はフ 各種取りそろえています。詳細はフナコシホームページをご覧下さ ナコシホームページ（http://www.funakoshi.co.jp/node/ い。 17302）をご覧下さい。 120315s_p04_k_n_i.indd 4 2012/03/02 14:42:10 2012 年 3 月 15 日号 ELISA 神経損傷のマーカー因子 Enolase 2 の定量キット Quantikine Human Enolase 2 ELISA Kit ヒト試料中の Enolase 2（Neuron-Specific Enolase）を サンドイッチ法により定量する ELISA キットです。 Enolase 2 濃度（ng/mg） 酵素 250 200 150 100 50 0 U-87-MG ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。 SK-Mel-28 MDA-MB-453 IMR-32 U-87-MG： ヒト膠芽腫細胞／星状細胞腫 由来細胞株 SK-Mel-28： ヒト悪性黒色腫由来細胞株 MDA-MB-453： ヒト乳癌由来細胞株 IMR-32： ヒト神経芽細胞腫由来細胞株 神経生理学関連製品特集 使用例 神経／イオンチャネル 5 細胞ライセート試料中のヒト Enolase 2 の濃度測定 上記に示した各細胞株のライセート中に含まれる Enolase 2 の濃度を，本製品を用いて 測定した。 品 名 Enolase 2 とは 包装 / 価格（￥） 神経／イオンチャネル 幹細胞 ELISA マウス Shh の N 末端ペプチドを定量するキット Quantikine Mouse Sonic Hedgehog N-terminal ELISA Kit マ ウ ス の 血 清， 血 漿， 細 胞 培 養 上 清 中 に 含 ま れ る Sonic Hedgehog（Shh）の N 末端ペプチドを，サンドイッチ法に より特異的に定量する ELISA キットです。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です Enolase（2-phospho-D-glycerate hydrolase） は 細 胞 質 に 存 在 す る 酵 素 で，2-phosphoglycerate を phosphoenolpyruvate へ変換する解糖経路において作用します。Enolase ファミリーには Enolase 1，2，3 が含まれ，それぞれ α，β，γ Enolase と呼ば れています。これらは二量体のイソ酵素（αα，αβ，ββ，αγ，γγ） として，神経や神経内分泌細胞に豊富に存在しているため，NeuronSpecific Enolase とも呼ばれます。 血清中の Enolase 2 濃度は健常人では低くなっていますが，神経 が損傷を受けると損傷細胞から脳脊髄液中へ放出され，体循環へと入 ります。 これまでの研究で，血清中の Enolase 2 濃度の上昇と，脳卒中，外 傷性損傷，多発性硬化症，ハンチントン病，アルツハイマー病といっ た様々な中枢神経系の損傷に関連性があることが報告されています。 また，神経内分泌細胞由来の悪性腫瘍でも Enolase 2 の産生が増加 しており，それに伴い血清中の濃度も上昇します。このような現象は， 小細胞肺癌， アプドーマ（APUD） ， 神経芽細胞腫でも確認されています。 以上のことから，血清および脳脊髄液中の Enolase 2 濃度の測定は， 頭部外傷や脳虚血により引き起こされる神経損傷の程度を示す指標と して利用されています。 メーカー 商品コード Enolase 2, Human, ELISA Kit, Quantikine (96 well)〈Neuron-Specific Enolase, ELISA Kit〉 RSD DENL20 1 kit / 76,000 B ※R&D Systems はテクネ コーポレイションの登録商標です。 特 長 特 長 ◆ 測定試料：血清，血漿（ヘパリン処理），細胞培養上清 ◆ 測定範囲：7.81 ∼ 500 pg/ml ◆ 感度：1.22 pg/ml 。 ◆ ヒト Enolase 1 および Enolase 3 との交差性はありません（200 ng/ml） ◆ 測定波長：450 nm（補正波長：540 または 570 nm） ◆ アッセイは 4.5 時間以内に完了します。 ※ キ ッ ト 内 容 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. ◆ 測定動物種：ヒト funakoshi.co.jp/node/17907）をご覧下さい。 ◆ 測定試料：血清，血漿（ヘパリン処理）＊ 1，細胞培養上清， ◆ 測定波長：450 nm（補正波長：540 または 570 nm） ＊ 1 Enolase 2 は血小板顆粒中に存在し，血小板が活性化することに より放出されます。Enolase 2 の血中濃度を測定するためには， 乏血小板血漿（PPP）を使用する必要があります。 ＊ 2 細胞ライセート調製用の Cell lysis buffer の別売りもあります。 詳細は当社テクニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下 さい。 ※ キ ッ ト 内 容 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. funakoshi.co.jp/node/17558）をご覧下さい。 120315s_p05_k_n_i.indd 5 140 120 100 80 60 40 20 0 各試料中の Shh（N 末端）濃度の 測定 マウスの血清，血漿（ヘパリン処理），お よびマウス ES 細胞（D3 株）を 7 ∼ 14 日培養した後の胚様体の培養上清を試料と 血清 血漿 7 日間培養 14 日間培養 し，本製品を用いて Shh（N 末端）濃度を （ヘパリン処理） 細胞培養上清 測定した。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ ◆ 感度：0.020 ng/ml Shh N 末端ペプチド（pg/mL） ◆ 測定範囲：0.313 ∼ 20 ng/ml 試薬 測定例 細胞ライセート＊ 2 お問い合わせ先 ◆ 天然型および組換え体ヒト Enolase 2 のいずれも定量できます。 Sonic Hedgehog, N-terminal, Mouse, ELISA Kit, Quantikine (96 well)〈Shh, ELISA Kit〉 RSD MSHH00 1 kit / 74,000 2012/03/02 14:42:27 6 2012 年 3 月 15 日号 神経生理学関連製品特集 NEW 神経／イオンチャネル ペプチド Spadin とは アッセイキット Spadin は Sortilin（NTSR3：neurotensin receptor 3）より産 生される分泌型ペプチドで，TREK-1 と呼ばれる 2 つの孔を有するカ リウムチャネルに特異的に結合することにより，その機能を阻害しま す。また，電気生理学的な解析では COS-7 細胞，培養海馬錐体ニュー ロン，海馬 CA3 領域のニューロンにおける TREK-1 活性を効果的に 阻害することが明らかにされています。更に in vivo においては背側縫 Human Spadin EIA Kit ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 特 長 線核の 5HT ニューロン発火頻度の上昇を誘導します。 ◆ 測定動物種：ヒト ◆ 測定試料：血清，血漿，尿など NEW 品 名 メーカー 商品コード ◆ 測定範囲：0.2 ∼ 200 ng/ml 包装 / 価格（￥） Spadin, Human, EIA Kit, High Sensitivity PLI S-1442 B ◆ 感度：3.4 ng/ml 1 kit / 134,000 ◆ 測定波長：450 nm NEW 抗体 神経疾患 家族性パーキンソン病に関与する遺伝子について 組織染色 神経疾患研究用抗体のゴールドスタンダード パーキンソン病関連抗体 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 抗 LRRK2 抗体 （クローン： MC.028.83.76.242， #SIG-39840-100）を用 いて免疫組織染色を行っ たヒト膵島細胞。 抗 DJ-1 抗体（クローン： E2.19，#SIG-39830200）を用いて免疫組織 染色を行ったヒト乳腺組 織。 抗α -Synuclein 抗体（ク ローン：LB509，#SIG39725-200）による黒 質ニューロンのレビー小 体染色像。 お問い合わせ先 試薬 免疫動物 （クローン） 標識 適用 メーカー 商品コード Human Mouse-Mono （4B12） − ELISA, IHC, West BAB SIG-39730-200 0.2 ml 111,000 Human Mouse-Mono （4D6） − IHC BAB SIG-39720-200 0.2 ml 104,000 Human Mouse-Mono （LB509） − ELISA, IHC, West BAB SIG-39725-200 0.2 ml 104,000 Mouse-Mono （E2.19） − ELISA, West BAB SIG-39830-200 0.2 ml 104,000 − ELISA, IHC, West BAB SIG-39835-050 50μg 117,000 Mouse-Mono ELISA, − IHC, West （MC.028.83.76.242） BAB SIG-39840-100 0.1 ml 24,000 品 名 抗原種 Anti- α -Synuclein 性状：Pu，クラス：IgG，交差性：Human Anti- α -Synuclein 性状：Pu，クラス：IgG，交差性：Human/Mouse/Rat Anti- α -Synuclein 性状：Pu，クラス：IgG，交差性：Human Anti-DJ-1 性状：Pu，クラス：IgM，交差性：Human/Zebrafish ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ Anti-DJ-1 Rabbit-Poly 性状：APu，交差性：Human/Rodent Anti-LRRK2 Mouse 性状：Pu，クラス：IgG，交差性：Dog/Human/Mouse/Primate/Rat Anti-Parkin 性状：Pu，クラス：IgG，交差性：Human/Mouse Anti-Parkin 性状：Pu，クラス：IgG，交差性：Human/Mouse 120315s_p06_k_n_i.indd 6 パーキンソン病（Perkinson Disease：PD）は神経変性疾患の一 種で，その発症には環境的要因や遺伝的素因が関与しており，ミトコ ンドリアの機能やプロテアソーム系に異常をきたしていると考えられ ています。パーキンソン病はそのほとんどが孤発性（sPD）ですが， 一部には遺伝性のものがあり，家族性パーキンソン病（fPD）と呼ば れ ま す。fPD の 発 症 に は α -Synuclein，DJ-1，Parkin，PINK1， UCHL1，LRRK2 などの遺伝子が関与していると考えられています。 パーキンソン病の病理学的な特徴として，中脳黒質のドーパミンニュー ロンが変性死し，生き残っている細胞にはレビー小体と呼ばれる細胞 質内封入体が認められます。 抗 Leucine-Rich Repeat Kinase 2（LRRK2） 抗 体（#SIG39840-100）は，マイケル・J・フォックス パーキンソン病研究財 団（Michael J. Fox Foundation for Parkinson's Research）の資 金援助を得て作製された抗体です。内因性 LRRK2 タンパク質を発現 していないマウスに免疫させることで，より強い抗原反応と高いアフィ ニティを有しています。 包 装 価格（￥） Mouse-Mono （Prk 109） − ELISA, IHC, West BAB SIG-39523-200 200μl 77,000 Mouse-Mono （Prk 8） − ELISA, IHC, West BAB SIG-39530-200 200μl 77,000 2012/03/02 14:42:47 2012 年 3 月 15 日号 神経 生化学用一般試薬 トレーサー 蛍光色素 神経細胞染色用トレーサー 革新的な蛍光色素 NEUROBIOTIN Tracer IRIS Dye NEUROBIOTIN Tracer は神経の細胞内染色に有用なビオ チンのアミノ誘導体です。Biocytin などの一般的なトレーサー と比較して水溶性が高く，導入効率に優れています。 標識試薬 IRIS Dye は，シアニン色素に分類される蛍光色素で，高い 吸光度・量子収量・光安定性を有しており，抗体・タンパク質・ 核酸の標識，分子イメージング，in vivo 蛍光イメージング， 細胞イメージングまで非常に幅広く適用できます。 神経生理学関連製品特集 NEW 神経／イオンチャネル 7 参考文献 Kita, H., Armstrong, W., J. Neurosci. Methods, 37 (2), 141∼150 (1991). ◆ 既存の蛍光色素と類似したスペクトルを示します（下表参照）。 ◆ NHS エステルを有しており， タンパク質や抗体の標識に適しています。 ◆ 化学式：N -(2-Aminoethyl) Biotinamide Hydrochloride ◆ マイクロアレイ解析，RT-PCR，FISH，細胞ソーティング，分子イメー ◆ 細胞内に長く留まりますが細胞毒性は ジングに適用できます。 ありません。 ◆ 水，エタノール，メタノール，DMF，DMSO に可溶です。 ◆ ホルマリンまたはグルタールアルデヒ ドで固定するため，免疫染色と併用で きます。 ◆ 検出はアビジンービオチンシステムを 利用するため，発色と蛍光のいずれで も観察可能です。 NEUROBIOTIN Tracer に よ る 神経細胞の染色画像 操作方法概略（脳スライス標本の場合） 色素名 励起（nm） 蛍光（nm） 類似蛍光色素 IRIS 2 490 510 Fluorescein, Alexa Fluor® 488 IRIS 3 550 562 Cy3, Alexa Fluor® 546, Tetramethylrhodamine IRIS 3.5 590 605 Cy3.5, Rhodamine, Alexa Fluor® 594 IRIS 5 648 667 Cy5, Alexa Fluor® 647 IRIS 5.5 675 694 Cy5.5, Alexa Fluor® 580, IR-Dye 700 IRIS 7G 791 818 Alexa Fluor® 790 生化学用一般試薬 特 長 特 長 NEW 1. 記録電極の作製 ミクロフィラメントの入ったガラスキャピラリー（外径：1 ∼ 2 mm）を牽引し，記録電極を作製する。これに電極内液として 2％ 塩化カリウム）溶液を充填させる。 2. 細胞内への導入 脳スライス標本中のニューロンに記録電極を刺入し，脱分極性の 矩形波を 2 ∼ 10 分間通電することにより NEUROBIOTIN Tracer を細胞内に拡散させる。 抗 GAR 抗 体（IRIS 2 標 識 ）， 抗 GAM 抗 体（IRIS 3 標識）を用いた U2-OS 骨肉腫 細胞の細胞イメージング 抗 GAM 抗体（IRIS 3 標識）を用いたヒ ト神経芽細胞腫の細胞イメージング 脳スライス標本を 4％ PFA で一晩固定し，Vibratome で薄切す 品 名 IRIS 2, NHS Active Ester MTT 2WS-02 IRIS 3, NHS Active Ester MTT 3WS-02 IRIS 3.5, NHS Active Ester MTT 35WS-02 IRIS 5, NHS Active Ester MTT 5WS-02 IRIS 5.5, NHS Active Ester MTT 55WS-02 IRIS 7G, NHS Active Ester MTT 7GWS-02 4. 各種染色法による検出 ・VECTASTAIN ABC 試薬＋ DAB 基質（発色による観察） ・アビジン＋酵素標識ビオチン＋ DAB 基質（発色による観察） ・蛍光標識アビジン（蛍光による観察） 品 名 メーカー 商品コード NEUROBIOTIN Tracer VEC SP-1120 包装 / 価格（￥） 50 mg / 18,000 神経細胞トレーサー PHA-L PHA-L はインゲンマメ凝集素で，神経突起特異的な順行性輸送型 （anterograde）トレーサーです。取り込まれた PHA-L は抗 PHA-L 抗体と ABC システムにより光学顕微鏡で検出できます。 120315s_p07_k_n_i.indd 7 包装 / 価格（￥） 1 mg / 36,000 1 mg / 36,000 1 mg / 36,000 1 mg / 36,000 1 mg / 38,000 1 mg / 68,000 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ メーカー 商品コード Triton-X100/PBS 溶液で 1 ∼ 2 時間処理する。 試薬 る か 凍 結 切 片（40 μ m） を 作 製 す る。PBS で 洗 浄 後，0.4 ％ お問い合わせ先 3. 切片の作製 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です NEUROBIOTIN Tracer/1.0 M メチル硫酸カリウム（または 1.0 M 2012/03/02 14:43:06 8 2012 年 3 月 15 日号 遺伝子工学 操作方法概略 NEW 遺伝子工学 ウイルスベクター 導入試薬 1. ウイルス粒子と Viro-MICST をピペッティングにより混合し，血清 フリーの培地を加えた後，室温で 20 分インキュベートする。 磁性カラムを用いたウイルス導入用 Magnetofection 試薬 2. Cell separation column にウイルス粒子と Viro-MICST の混合を 加え，column 中のマトリックス（スフィア）に十分拡散させ，Cell NEW Viro-MICST separation column を Magnetic separator にセットする。 Viro-MICST reagent は I-MICST（Integrated Magnetic Immuno-cell Sorting and Transfection / Transduction） テ ク ノ ロ ジ ー に 最 適 化 さ れ た， Magnetofection 技 術 を 用 い た 新 し い ナ ノ 粒 子 試 薬 で す。 Miltenyi 社 製 MACS® column，Magnetic separator， 目 的細胞に特異的な抗体が標識された Magnetic microbeads と組み合わせて使用します。磁気ビーズによる目的細胞の分離 と Magnetofection を組み合わせたため，感染多重度（MOI： multiplicity of infection）が低い場合でも，高い効率での導 入が可能です。 3. Cell separation column に Magnetic microbeads を結合させた 目的細胞を加え，column 中のマトリックスに十分拡散させた後， column を培地で洗浄し，室温で 30 分インキュベートする。 4. Cell separation column を Magnet separator から外し，細胞を column から流出させる。 ウイルス粒子／ Viro-MICST 複合体の形成 Virus Viro-MICST (106 VP) reagent (10μl) Magnetic microbeads を 結合させた目的細胞 ※本製品は単独では使用できません。上記の Miltenyi 社製品および抗体標 識 Magnetic microbeads を別途ご用意下さい。 ※MACS® は Miltenyi 社の登録商標です。 ※MACS® technology による細胞分離の原理や，MACS microbeads の 詳細は，フナコシホームページ（http://www.funakoshi.co.jp/node/ 17808）をご覧下さい。 室温で 20 分間インキュベート ウイルス粒子を カラムに加える Viro-MICST を用いたウイルス感染の原理 Modified Column 細胞をカラムに加える Magnetic Separator 室温で 30 分間インキュベート 細胞を流出させる 24 ∼ 72 時間後， アッセイを行う Magnetic microbeads を 結合させた細胞 Viro-MICST を 結合させたウイルス粒子 使用例 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 目的細胞には，特異的な抗体で標識された Magnetic microbeads を結合させる。 Viro-MICST を結合させたウイルス粒子と，Magnetic microbeads を結合させ た細胞を，MACS® column 中でインキュベートすることで，目的細胞が分離され， 同時にウイルスと細胞が会合することにより，ウイルスが細胞に感染します。 eGFP 発現細胞数（%） 25 20 15 10 5 100μm 0 未感染 お問い合わせ先 ◆ 迅速かつ簡便な操作が可能です。 試薬 ◆ 細胞分離プロセスに干渉しません。 特 長 ◆ 目的細胞の分離と，細胞へのウイルス感染による遺伝子導入をひと Viro-MICST- Viro-MICST2μl 10μl eGFP 遺伝子が組み込まれたレンチウイルスを hCB-HSC 細胞に導入し，3 日後の遺伝 子導入効率をフローサイトメトリー解析により比較した。 hCB-HSC 細胞には，抗 CD105 抗体標識 Magnet microbeads を結合させた。 細胞：1.5 × 105 cells/ml MOI：10 品 名 つの系で行うことができます。 メーカー 商品コード ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ Viro-MICST Reagent OZB VMX250 ◆ 細胞表現型に影響を与えません。 ◆ 細胞毒性はありません。 包装 / 価格（￥） 250μl / 42,000 500μl / 77,000 25 ∼ 50 アッセイ分（細胞数 1 × 106，MOI ＝ 1）。 ◆ 適用細胞：株化細胞や初代細胞などをはじめとする，すべての細胞＊ ◆ 適用ウイルス：AAV，アデノウイルス，レンチウイルスやレトロウ ＊ イルスなどをはじめとする，すべてのウイルス ＊ 使用実績のある細胞とウイルスの詳細は，フナコシホームページ （http://www.funakoshi.co.jp/node/17808）をご覧下さい。 120315s_p08_k_n_i.indd 8 通常の 感染法 Viro-MICST Reagent OZB VMX500 50 ∼ 100 アッセイ分（細胞数 1 × 106，MOI ＝ 1）。 Viro-MICST Reagent OZB VMX1000 1,000μl / 141,000 100 ∼ 200 アッセイ分（細胞数 1 × 106，MOI ＝ 1）。 2012/03/02 14:43:29 2012 年 3 月 15 日号 遺伝子工学 使用例 NEW 遺伝子工学 PCR 汚染検出 Taq DNA ポリメラーゼを含むマイコプラズマ検出キット VenorGeM OneStep Mycoplasma Detection Kit for Endpoint PCR 細胞培養液，各種生体試料およ び培地などに含まれるマイコプラ ズ マ DNA を， エ ン ド ポ イ ン ト PCR 法により直接検出・定量でき るキットです。ポリメラーゼを含 む反応液（OneStep Mix）が付属 しているため，従来品と比較して 簡便にマイコプラズマ汚染を検出することができます。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 9 ←マイコプラズマ特異的増幅（265 ∼ 278 bp） ←内部標準（191 bp） NEW M 1 2 3 4 5 6 M：DNA マーカー 4：未汚染試料 1：ネガティブコントロール（バッファーのみ） 5：汚染試料 2：ポジティブコントロール 6：高度汚染試料 3：ポリメラーゼ反応が阻害された試料 本製品によるマイコプラズマの検出 汚染試料および高度汚染試料において，270 bp 付近にマイコプラズマ特異的なバンドが 検出されていることがわかる。ネガティブコントロールの非特異的バンド（80 ∼ 90 bp）はプライマーの自己アニーリングによるものと考えられる。 操作方法概略 1. 90 ∼ 100％コンフルエントの細胞培養上清を加熱し，遠心分離処 理した後，上清を回収する。 特 長 2. OneStep Mix を Rehydration buffer で再溶解する。 ◆ ポリメラーゼおよび内部標準 DNA を含む反応液（凍結乾燥粉末） ， ポジティブコントロール用 DNA，およびバッファーがセットになっ たマイコプラズマ検出キットです。 3. 1. で 得 ら れ た 試 料 を 入 れ た PCR チ ュ ー ブ に 2. で 調 製 し た OneStep Mix を加え，PCR 反応を行う。 4. アガロースゲル電気泳動によりマイコプラズマ DNA の有無を確認する。 ◆ エンドポイント PCR 法により，マイコプラズマ汚染を高感度に検出 します（バンドサイズ：265 ∼ 278 bp）。 品 名 メーカー 商品コード ◆ 内部標準 DNA は，増幅反応により 191 bp の位置にバンドが出現 します。 ◆ 真核生物やバクテリアの DNA は増幅されません。 ◆ 約 3 時間で操作が終了します。 包装 / 価格（￥） Mycoplasma Detection Kit for Endpoint PCR, OneStep, VenorGeM 11-8025 MNV 25 tests 1 kit / 28,000 11-8050 MNV 50 tests 1 kit / 51,000 11-8100 MNV 100 tests 1 kit / 88,000 11-8250 MNV 250 tests 1 kit / 187,000 ◆ dTTP の代わりに dUTP を使用するため，必要に応じてウラシル− 減少させることもできます＊。 細胞培養用のマイコプラズマ除去試薬 MynoxGold ＊ ウラシル− DNA グリコシラーゼは本キットには含まれていません。 一 般 的 な 抗 生 物 質 と， 生 物 学 的 試薬を組み合わせた，強力なマイコ プ ラ ズ マ 除 去 試 薬 で す。 培 養 開 始 時 に 添 加 す る Starter treatment と， 継 代 す る 際 に 添 加 す る Main treatment の 2 種 類 の 試 薬 か ら 構 成されており，マイコプラズマをほ ぼ完全に除去できます。詳細はフナコシホームページ（http://www. funakoshi.co.jp/node/14032）をご覧下さい。 検出可能なマイコプラズマ 試薬 実験台・クリーンベンチ用のマイコプラズマ除去スプレー Mycoplasma-Off キット内容／個数 商品コード OneStep Mix Rehydration buffer (1.3 ml) Positive control DNA 10 mM Tris buffer (2.0 ml) 120315s_p09_k_n_i.indd 9 11-8025 1 1 11-8050 2 1 11-8100 4 2 1 1 11-8250 10 3 マイコプラズマを除去するスプレータイプの製品 です。実験台，クリーンベンチ，インキュベーター など，研究室のあらゆる場所に吹きかけるだけでマ イコプラズマ汚染を防ぎます。腐食性，発癌性成分 を使用していません。詳細はフナコシホームページ （http://www.funakoshi.co.jp/node/12032） をご覧下さい。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ Mycoplasma orale Mycoplasma arginini Mycoplasma hominis Mycoplasma pneumoniae Mycoplasma spermatophilum Mycoplasma genitalium Mycoplasma penetrans Mycoplasma opalescens Mycoplasma bovigenitalium Mycoplasma pirum Mycoplasma primatum Mycoplasma caprine Acholeplasma laidlawii Mycoplasma bovis Mycoplasma agalactica Mycoplasma fermentans Mycoplasma cloacale Mycoplasma timone Mycoplasma hyorhinis Mycoplasma hyosynoviae Spiroplasma citri Mycoplasma pulmonis Mycoplasma synoviae Mycoplasma faucium Mycoplasma falconis Mycoplasma salivarium Mycoplasma arthritidis お問い合わせ先 ◆ 検出感度：＜ 20 ゲノム／ PCR 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です DNA グリコシラーゼにより無関係な PCR 産物を除去し，偽陽性を 2012/03/02 14:43:50 10 2012 年 3 月 15 日号 遺伝子工学 品 名 メーカー 商品コード 遺伝子工学 電気泳動 マーカー 包装 / 価格（￥） DynaMarker, Prestain Marker for RNA High BDL DM260 −80℃ 180μl / 25,000 150μl / 20,000 150μl / 25,000 約 30 回分。 着色済みの一本鎖 RNA サイズマーカー DynaMarker® Prestain Marker for RNA 細胞接着／細胞骨格 着色済みの核酸で構成され た， 新 し い タ イ プ の 一 本 鎖 RNA サイズマーカーです。変 性ゲル電気泳動のモニタリン グや，ノーザンブロッティン グに最適です。 約 30 回分。 DynaMarker, Prestain Marker for Small RNA Plus BDL DM253 約 30 回分。 base 8,000 2,000 NEW BioMosaics 4,000 転写後 細胞接着／細胞骨格 細胞外マトリックス 1,000 500 200 腫瘍マーカー Human Glypican-3 ELISA Kit ゲル組成： 0.8％ アガロース， 2.2 M ホルムアルデヒド 1×MOPS buffer NEW DynaMarker, Prestain Marker for Small RNA BDL DM250 メンブレン DynaMarker® Prestain Marker for RNA High（#DM260） ヒト試料中の Glypican-3（GPC3）をサンドイッチ法によ り定量する ELISA キットです。Glypican-3 は初期の肝細胞 癌のマーカーとして注目されている，ヘパラン硫酸プロテオグ リカンです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 base base 100 75 50 40 30 転写後 20 50 40 30 転写後 Glypican-3（GPC3）とは 20 ゲル組成： メンブレン 12.5％ ポリアクリルアミド， 7.5 M 尿素／1 × TBE ゲル組成： 10％ ポリアクリルアミド， 7.5 M 尿素／1 × TBE メンブレン 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です DynaMarker ® Prestain Marker for DynaMarker ® Prestain Marker for Small RNA（#DM250） Small RNA Plus（#DM253） 特 長 Glypican（GPC）は，GPI アンカーを介して細胞膜表面に結合し ている，ヘパラン硫酸プロテオグリカン（HSPGs）ファミリーに属 しています。哺乳動物では，これまでに GPC1 ∼ 6 の 6 種類が確認 されており，主に発生段階において発現しています。 Glypican-3（GPC3）は，Simpson-Golabi-Behmel 症候群（SGBS） において変異が見られる腫瘍胎児抗原として発見されました。この X 連鎖症候群は，臨床所見で過成長を示すという特徴があります。 GPC3 は，肝細胞癌（HCC）患者の血清中で検出されることから， 初期の HCC のバイオマーカーとして有用であると考えられています。 また，肺扁平上皮癌，悪性黒色腫，精巣生殖細胞腫瘍などへの関与も 示唆されています。 ◆ 低分子有機色素とは違い，独自の色素結合方法により核酸鎖へ直接 色素を導入しているため，使用ゲル濃度が変わっても正確な分子量 特 長 お問い合わせ先 を示します。 ◆ 電気泳動中にも分離状況を確認できるため，最適な時間で泳動を停 止できます。 ◆ 96 ウェルプレートにプレコートされた抗ヒト GPC3 マウスモノク ローナル抗体で試料中のヒト GPC3 を捕捉し，ビオチン標識抗ヒト ◆ ナイロンメンブレンへの転写も可能で，RNA が転写されているかど うかを確認することができます。 GPC3 抗体，HRP 標識二次抗体で検出し，TMB 基質で発色させます。 ◆ アッセイは 6 時間以内に完了します。 試薬 ◆ 青と赤（または青と紫）の配色で，視認性に優れています。 ◆ 加熱変性操作せずに，そのままアプライできます。 ◆ 測定試料＊：血清，細胞培養上清 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ ◆ 測定試料数（二重測定）：40 試料（標準曲線 1 本の場合） ◆ 未着色 RNA マーカーと高い一致率を示します。 32 試料（標準曲線 2 本の場合） ◆ 各バンドのサイズが異なる 3 種類の製品があります。 DynaMarker® Prestain Marker for RNA シリーズの仕様 品 名 商品コード RNA High DM260 Small RNA DM250 Small RNA Plus DM253 バンドのサイズ （base） 200 ∼ 8,000 20 ∼ 50 20 ∼ 100 バンドの色 適用ゲル 青，紫 変性アガロース 青，赤 変性ポリアクリルアミド 対応する未標識 RNA マーカー RNA High （#DM160） Small RNA Ⅱ（#DM192） 用 途 120315s_p10_k_n_i.indd 10 高分子量 RNA の 電気泳動 ◆ 測定範囲：62.5 ∼ 4,000 pg/ml ◆ 感度：200 pg/ml ◆ 測定波長：450 nm（補正波長：550 または 595 nm） ＊ 採取後 1 か月以内の試料をご使用下さい。 ※ キ ッ ト 内 容 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. funakoshi.co.jp/node/17743）をご覧下さい。 品 名 Small RNA 研究 miRNA 前駆体 までカバー メーカー 商品コード 包装 / 価格（￥） Glypican-3, Human, ELISA Kit (96 well)〈GPC3, ELISA Kit〉 BMI B1507 1 kit / 118,000 2012/03/02 14:44:11 2012 年 3 月 15 日号 機 器 NEW 機器 顕微鏡 11 蛍光観察 メーカー名：Etaluma, Inc. URL：http://etaluma.com/ Etaluma 社は米国カリフォルニア州カールスバッドに 本拠を置くライフサイエンス用機器を取り扱っている メーカーです。世界中のより多くの研究者が使用できる ような，シンプルで安価な製品を提供しています。 小型倒立型蛍光顕微鏡 LumaScope 500 ルーチンの細胞観察などに最適な，小型で廉価な倒立型蛍光 顕微鏡です。パソコンに USB 接続し，パソコンの画面上で観 察します。青色 LED による蛍光色素の励起・検出に加え，明 視野での観察もできます。 実験台での使用例 インキュベーター内での使用例 NEW 仕 様 サイズ 質 量 センサー 光 源 倍率（対物レンズ） フィルターセット 対応 OS 190W × 125D × 115H mm 約 3 kg CMOS LED 20 ×（標準装備） GFP / FITC / Alexa Fluor® 488 用 Windows XP / 7 電 源 AC / DC アダプター（110 V AC / 120 V DC） または USB ケーブルを接続したパソコン本体 観察例 明視野観察用照明 マイクロポジショナー 観察用スライド 明視野観察用 LED スイッチ 焦点ノブ 蛍光観察用 LED スイッチ ヒト皮膚組織を HE 染色し，明視野（左図）および蛍光（右図）で観察した。 倍率：20 × メーカー 商品コード LumaScope 500, with 20×Objective, 488 filter ETL 500w/488-MA833 A 特 長 ◆ 20 ×の対物レンズが標準装備されています。別売りの対物レンズ （4 ×，10 ×，40 ×，100 ×）に交換することも可能です。 ◆ eGFP / FITC / Alexa Fluor 488 用フィルターセットが内蔵され ています。 ◆ 簡単に高解像度の画像を撮影することができます。タイムプラス撮 影も可能です。 コン本体から供給されるため，屋外でも使用可能です＊ 1。 ■ 対物レンズ別売品 品 名 メーカー 商品コード MicroScope Objective, for LumaScope 500 MA830 ETL 2.5 × MA965 ETL 4× MA966 ETL 10 × MA968 ETL 40 × MA970 ETL 100 × 包装 / 価格（￥） 1 piece / 1 piece / 1 piece / 1 piece / 1 piece / 90,000 20,000 20,000 35,000 60,000 置できます。 ◆ インキュベーション中の細胞の計数や血球の増殖の観察などを，イ ＊2 ンターネット経由で研究室の外でも行えます 。 ＊ 1 USB 接続の場合はパソコン本体の USB ポートに接続して下さい。 USB ハブは使用できません。また，AC / DC アダプターを使用 しない場合は励起光の輝度が制限されます。 ＊ 2 ポジションや焦点の調整，光源の切り換えなどは LumaScope 本 体で行う必要があるため，研究室の外で観察する場合は微調整が LumaScope 500 のイメージギャラリー Etaluma 社のホームページでは，LumaScope 500 で撮影した画 像を数多く掲載しています。 LumaScope 500 のイメージギャラリー http://www.funakoshi.co.jp/node/17904 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ ５ - ６４３ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６１９ ◆ 小型のため，実験台やインキュベーター内，クリーンベンチ内に設 機器 ◆ 電源は AC / DC アダプターに加え，USB ケーブルを接続したパソ 1 unit / 700,000 お問い合わせ先 ® 包装 / 価格（￥） 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 品 名 できません。 120315s_p11_k_n_i.indd 11 2012/03/02 14:44:31 12 使用例 NEW タンパク質／酵素 オートファジー Bafilomycin A1 処理 ELISA 未処理 NBR1 または p62 定量用 ELISA キット オートファジー関連因子 ELISA キット ヒト，マウス，ラットの細胞ライセート中に含まれるオート ファジー（自食作用）関連因子である NBR1 または p62 を， サンドイッチ法により定量できる ELISA キットです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 1：2 3,500 NBR1 量（pg/ml） タンパク質／酵素 NEW 2012 年 3 月 15 日号 1：4 1：8 1：16 1：32 1：64 3,000 2,500 2,000 1,500 1,000 500 0 1：32 HeLa 細胞を，オートファジータンパク質分解に対する阻害作用がある Bafilomycin A1 （800 nM）で 24 時間（37℃）処理した。細胞を PBS で洗浄後，プロテアーゼ阻害物 質と共に RIPA バッファーで溶解し，各希釈系列を作製した後，ウエスタンブロッティン グにより NBR1 を検出した（右上図） 。グラフは本製品を用いて測定した結果を示す。 Bafilomycin A1 で処理した細胞では，NBR1 の分解が阻害されていることが確認できた。 また，本製品を使用することにより，ウエスタンブロッティングよりも高感度に検出でき ることがわかる。 18 相対 p62 量（倍） ■ NBR1 NBR1（Neighbor of BRCA1 gene 1）は，966 個のアミノ酸 で構成される長鎖のタンパク質で，マクロオートファジーにおける選 択的な基質です。NBR1 は，自身の UBA ドメインを介してモノユビ キチンおよびポリユビキチン鎖（K48, K63 結合型）と相互作用しま す。また，LIR ドメインを介して LC3 / GABARAP タンパク質と相 互作用します。 NBR1 は，アルコール性脂肪性肝炎の特徴であるユビキチン／ p62 陽性マロリー体で検出されることから，遺伝性筋疾患や，ミスフォー ルドタンパク質の蓄積が関与する疾患のバイオマーカーとなる可能性 が示唆されています。また，出生後の骨形成や，p38 MAPK 活性の 負の制御因子とも考えられています。 61,072 ng/ml 16 希釈倍率 1：40 1：40 1：160 14 p62 12 理 処 未 10 理 n処 yci m apa R 理 n処 yci om fil Ba 8 6 4 2 3,389 ng/ml 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 0 ■ p62 お問い合わせ先 試薬 p62 は，Sequestosome 1（SQSTM1）とも呼ばれるタンパク 質で，スキャフォールド（足場）タンパク質およびタンパク質輸送の 両方の機能を持ち，タンパク質分解において作用しています。p62 が 有するドメインの機能としては，自身の PB1 ドメインを介して自己 凝集し，UBA（Ubiquitin-Associated）ドメインを介してユビキチ ン化タンパク質と相互作用します。また，LIR ドメインを介して LC3 Ⅱタンパク質と結合することが明らかになっています。 p62 はオートファジーが抑制されると蓄積し，逆にオートファジー が誘導されると減少します。従って，p62 はオートファジーの変化の 指標として利用できる可能性があります。また，パーキンソン病，ア ルツハイマー病などの神経変性疾患や，骨ページェット病のような骨 疾患における治療の標的分子となっています。 1：128 マクロオートファジーの阻害効果の検証 NBR1 と p62 について オートファジーによるタンパク質分解には，ユビキチン結合レセプ ターである NBR1 と p62 が必要であることが明らかになっていま す。NBR1 は p62 と非常に相同性の高いドメイン構造を持っており， それぞれが PB1（Phox and Bem 1）ドメインを有し，NBR1 の PB1 ドメインは p62 の PB1 ドメインに結合します。これらの類似 性にも関わらず，個々の機能にはお互いの存在を必要としていません。 1：64 希釈倍率 未処理 2,721 ng/ml Rapamycin 処理 Bafilomycin 処理 オートファジー誘導物質による効果の検証 HeLa 細胞を，オートファジー誘導作用のある Rapamycin（800 nM），またはオートファ ジータンパク質分解に対する阻害作用がある Bafilomycin（800 nM）で 24 時間処理 した。細胞を洗浄後，RIPA バッファーで溶解し，各希釈系列を作製した後，ウエスタン ブロッティングにより p62 を検出した（左上図）。グラフは本製品を用いて測定した結果 を，未処理の試料の p62 量を 1 とした場合の相対倍率を算出したもの。ウエスタンブロッ ティングでは結果が判別しにくいが，本製品では Rapamycin 処理により p62 が約 25％減少し，Bafilomycin 処理により約 1,600％増加したことが確認できた。 キット内容 ● Assay buffer 13 ● Standard ＊1 ● Antibody ＊ 1 ● Conjugate ＊ 2 ● Clear microtiter plate coated with a monoclonal antibody ＊ 1 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ 特 長 商品コード 測定因子 測定動物種 測定試料 測定試料数（二重測定） 測定範囲 感 度 測定波長 測定時間 120315s_p12_k_n_i.indd 12 ADI-900-211 ADI-900-212 NBR1 p62 ヒト，マウス，ラット 細胞ライセート 38 試料 40 試料 125 ∼ 8,000 pg/ml 0.625 ∼ 40 ng/ml 65.57 pg/ml 100 pg/ml 450 nm 約 2 時間 約 3 時間 ● Wash buffer concentrate ● TMB substrate ● Stop solution 2 ● RIPA cell lysis buffer 2 ● Plate sealer ＊ 1 キットにより内容が異なります。 ＊ 2 #ADI-900-212-0001 のみに含まれています。 品 名 メーカー 商品コード NBR1, Human/Mouse/Rat, ELISA Kit (96 well) ADV ADI-900-211-0001 p62, Human/Mouse/Rat, ELISA Kit (96 well) ADV ADI-900-212-0001 −80℃ 包装 / 価格（￥） 1 kit / 78,000 1 kit / 78,000 2012/03/02 14:44:53 2012 年 3 月 15 日号 タンパク質／酵素 1.5 NEW タンパク質／酵素 薬物動態 1.0 吸光度 ELISA PEG 化タンパク質を検出する ELISA キット 0.5 PEGylated Protein ELISA Kit PEG（ポリエチレングリコール）で修飾したタンパク質を検 出する ELISA キットです。PEG を特異的に認識するモノクロー ナル抗体をコートしたプレートと，ビオチン標識 PEG，HRP 標識ストレプトアビジンを用い，競合法により生体試料中の PEG 化タンパク質を検出します。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 13 NEW 0.0 0.1 1 10 100 PEG（ng/ml） 1,000 10,000 分子量や形状（直鎖型，分枝型）の異なる PEG を試料とし，本製品を用いて測定した。 PEG の種類 ED50（ng/ml） 直鎖型 PEG（1 kDa） 1,711 直鎖型 PEG（2 kDa） 1,146 直鎖型 PEG（5 kDa） 30 直鎖型 PEG（10 kDa） 16 PEG の種類 ED50（ng/ml） 直鎖型 PEG（20 kDa） 12 直鎖型 PEG（40 kDa） 10 4 分枝型 PEG（10 kDa） 37 8 分枝型 PEG（40 kDa） 11 品 名 PEG 化とは タンパク質や化合物などを PEG（ポリエチレングリコール）で修飾 すると，免疫原性の低下，各種酵素による分解からの保護，半減期の 増大などにより，生体内での安定性を高める効果が得られます。その ため，薬効の期待されるタンパク質を PEG 化し，薬物動態を評価す る研究が行われています。 メーカー 商品コード PEGylated Protein, ELISA Kit (96 well) ADV ADI-900-213-0001 包装 / 価格（￥） 1 kit / 75,000 ペプチドなどを PEG 化する試薬 各種 PEG 化試薬 特 長 ◆ 直鎖型および分枝型の，幅広い分子量の PEG 鎖を検出できます。 ◆ タンパク質と結合した状態の PEG だけでなく，遊離型の PEG も検 出できます。 ◆ 約 2 時間で測定できます。 ペプチドやタンパク質などの生体小分子や化合物を PEG 化（ポリ エチレングリコール化）する試薬です。すべての試薬は水系の溶媒中 で合成され，有機溶媒や毒性のある試薬を含んでいません。PEG 化 による薬理活性などの変化を調べるだけでなく，ドラッグデリバリー などの研究に有用です。詳細はフナコシホームページ (http://www. funakoshi.co.jp/node/16857) をご覧下さい。 ◆ 測定試料：血清，血漿（EDTA 処理），組織ライセート ◆ 測定試料数：35 試料（二重測定） 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ◆ 測定範囲：1.75 ∼ 225 ng/ml ◆ 感度：＜ 1 ng/ml ＊ ◆ 測定波長：450 nm ＊ 測定感度は，修飾されている PEG の分子量（鎖長） ，個数によって 異なります。 ※ キ ッ ト 内 容 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. お問い合わせ先 『菱文様』は 2 本の平行線が重なってできた菱形 funakoshi.co.jp/node/17897）をご覧下さい。 を基本単位とする文様です。 この形自体は縄文時代 使用例 の土器にも描かれており，自然発生的に生み出され 1.5 吸光度 0.5 後に，水生植物であるヒシ科植物の葉や実の形 に似ていることから， この文様は『菱』 と呼ばれるよう になりました。桃の節句に食する「菱餅」は，菱形に なっているだけでなく，菱の実から取れるデンプン や，菱の実そのものを加える場合もあります。 0.0 1 10 100 PEG-BSA（ng/ml） 1,000 分子量 10 kDa の直鎖型 PEG を，比率を変えて BSA に結合させた修飾体を試料とし， 本製品を用いて測定した。BSA に結合している PEG の量が多いほど感度が増大してい ることがわかる。 120315s_p13_k_n_i.indd 13 菱文様には，菱の中をさらに 4 分割した「幸菱文」 や，菱を花の形にデフォルメした「花菱」など，多様 なバリエーションがあります。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ 1.0 試薬 た幾何学文様と言われています。 PEG-BSA（1：1） PEG-BSA（3：1） PEG-BSA（5：1） PEG-BSA（10：1） PEG-BSA（15：1） 2012/03/02 14:45:12 14 サイトカイン／増殖因子／ホルモン NEW 2012 年 3 月 15 日号 品 名 NEW メーカー 商品コード サイトカイン／増殖因子／ホルモン 成長因子 ELISA Progranulin ELISA Kit ヒトまたはマウスの Progranulin をサンドイッチ法により 比色定量する ELISA キットです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 (96 well) Twin plex (2 × 96 well) Penta plex (5 × 96 well) 1 kit / 91,000 1 kit / 136,000 1 kit / 289,000 (96 well) Twin plex (2 × 96 well) Penta plex (5 × 96 well) 1 kit / 92,000 1 kit / 138,000 1 kit / 295,000 肥満／糖尿病関連因子 ELISA キット Progranulin とは ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 Progranulin は 593 個のアミノ酸残基からなる糖タンパク質で， 主に上皮細胞で発現している成長因子です。皮膚組織が傷害を受ける と，Progranulin が好中球，マクロファージ，血管，線維芽細胞を集 積させ，創傷の回復を促進します。また，腫瘍形成にも関連すること が知られています。 これに対して視床下部に存在する Progranulin は，二形性（sexual dimorphism）の発達や，食欲・体重の調節に関与していると考えら れています。視床下部 Progranulin の発現量は，低エネルギー状態（飢 餓状態で 2-deoxy-D-glucose 投与）では減少し，高エネルギー状態（食 事後）では増加するという報告があります。視床下部 Progranulin を 抑制すると，食欲が増加し，体重増加を引き起こすことから，食欲抑 制因子として機能していることが示唆されています。 ■ Adiponectin ELISA Kit 測定動物 ヒ ト マウス ラット 商品コード AG-45A-0002EK-KI01 AG-45A-0001EK-KI01 AG-45A-0004EK-KI01 AG-45A-0005EK-KI01 アッセイ法 競合法 サンドイッチ法 測定試料 血清，血漿，細胞培養上清 測定感度 1 ng/ml 100 pg/ml 50 pg/ml 測定範囲 1 ∼ 1,000 ng/ml 0.5 ∼ 32 ng/ml 0.125 ∼ 8 ng/ml 0.375 ∼ 24 ng/ml 測定波長 450 nm ■ Visfatin ELISA Kit 測定動物 ヒ ト マウス／ラット 測定部位 細胞外 細胞内 細胞外 細胞内 商品コード AG-45A-0006EK-KI01 AG-45A-0008EK-KI01 AG-45A-0007EK-KI01 AG-45A-0009EK-KI01 アッセイ法 サンドイッチ法 測定試料 血清 細胞ライセート 血清 細胞ライセート 測定感度 30 pg/ml 50 pg/ml 測定範囲 0.125 ∼ 8 ng/ml 0.0625 ∼ 16 ng/ml 0.5 ∼ 32 ng/ml 測定波長 450 nm 特 長 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 測定動物 商品コード ヒ ト AG-45A-0018EK-KI01 マウス AG-45A-0019EK-KI01 測定試料 血清，血漿（EDTA，クエン酸， ヘパリン処理），細胞培養上清 血清，細胞培養上清 0.063 ∼ 4 ng/ml 32 pg/ml 0.125 ∼ 8 ng/ml 60 pg/ml 測定範囲 感 度 測定波長 包装 / 価格（￥） Progranulin, Human, ELISA Kit AG-45A-0018EK-KI01 KOM AG-45A-0018TP-KI01 KOM AG-45A-0018PP-KI01 KOM Progranulin, Mouse, ELISA Kit AG-45A-0019EK-KI01 KOM AG-45A-0019TP-KI01 KOM AG-45A-0019PP-KI01 KOM ※詳 細 は フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www.funakoshi.co.jp/ node/14168）をご覧下さい。 450 nm 好評配布中 ! キット内容 AdipoGen 社製品カタログ お問い合わせ先 ● Antibody coated 96-well plate ● Wash concentrate ● Diluent ● Secondary antibody ● Detector ● Standard ● QC sample ● Substrate ● Stop solution ● Plate sealer （A4 版，約 100 ページ，英語版カタログ） ELISA キット，抗体，組換え体タンパク質， 低分子化合物などを広くご紹介しています。 試薬 ※カタログをご希望の方は，フナコシホームページのオンライン請求か，当社 営業担当（Fax 03-5684-1634）までお申し込み下さい。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ ■ 抗 Progranulin 抗体 品 名 抗原種 Anti-Progranulin Human 形状：PBS 溶液，クラス：IgG，交差性：Human Anti-Progranulin Human 形状：PBS 溶液，交差性：Human Anti-Progranulin Mouse 形状：PBS 溶液，クラス：IgG，交差性：Mouse Anti-Progranulin 形状：PBS 溶液，交差性：Mouse 120315s_p14_k_i_n.indd 14 Mouse 免疫動物 （クローン） 標識 適用 メーカー 商品コード 包 装 KOM AG-20A-0052-C100 100μg 41,000 ELISA, West KOM AG-25A-0112-C100 100μg 41,000 Rat-Mono ELISA, − （PG319-1） West KOM AG-20A-0077-C050 AG-20A-0077-C100 50μg 100μg 29,000 41,000 KOM AG-25A-0093-C100 100μg 41,000 Mouse-Mono ELISA, IHC, − （PG359-7） IP, West Guinea PigPoly Rat-Poly − − ELISA, West 価格（￥） 2012/03/02 14:46:10 2012 年 3 月 15 日号 サイトカイン／増殖因子／ホルモン 成長因子 組換え体 kDa M 1 サイトカイン／増殖因子／ホルモン NEW 2 97 72 in vivo アッセイにも使用可能な組換え体 Progranulin 48 Tag-free Progranulin 35 15 NEW タグが付加されていないヒトおよびマウスの組換え体 Progranulin です。タグ付きの Progranulin よりも高い活性 を示し，エンドトキシンレベルも低い（＜ 0.1 EU/ μg）ため， in vivo での使用も可能です。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 特 長 ◆ 天然型 Progranulin 配列に基づいており，余分な付加配列はありま 19 M：マーカー レーン 1：脱グリコシル化処理前 レーン 2：脱グリコシル化処理後 Tag-free ヒト Progranulin（#AG-40A-0188）を，PNGase（Peptide：N -Glycanase） により脱グリコシル化処理し，抗 Progranulin 抗体を用いたウエスタンブロッティング で解析した。処理前後の試料における移動度の違いから，Tag-free ヒト Progranulin は 翻訳後修飾によりグリコシル化されていることを確認した。 ■ Tag-free 組換え体 Progranulin 品 名 せん。 ◆ N 末端シークエンシングにより正確なプロセッシングを確認してい ます。 ◆ アフィニティ精製品です。 メーカー 商品コード Progranulin (1-593), Untagged, Human, Recombinant KOM AG-40A-0188-C010 KOM AG-40A-0188-C050 包装 / 価格（￥） 10μg / 50μg / 28,000 60,000 タグフリーの組換え体 Progranulin。産生：HEK293 細胞，M.W.：∼ 65 kDa（SDS-PAGE）， 純度：≧ 95％（SDS-PAGE），形状：PBS を含む凍結乾燥品， 使用例 エンドトキシンレベル：＜ 0.1 EU/ μg（LAL 法） Progranulin (1-589), Untagged, Mouse, Recombinant KOM AG-40A-0189-C010 KOM AG-40A-0189-C050 1.75 食餌摂取量（g） 1.50 1.25 1.00 ** 0.75 0.50 0.25 0.00 ** * * * 4 時間 10μg / 50μg / 28,000 60,000 タグフリーの組換え体 Progranulin。産生：HEK293 細胞，M.W.：∼ 65 kDa（SDS-PAGE）， 純度：≧ 95％（SDS-PAGE），形状：PBS を含む凍結乾燥品， エンドトキシンレベル：＜ 0.1 EU/ μg（LAL 法） ** ■ FLAG タグ融合組換え体 Progranulin 品 名 メーカー 商品コード 8 時間 Tag-free マウス Progranulin Tag-free ヒト Progranulin FLAG タグ融合ヒト Progranulin 包装 / 価格（￥） 10μg / 50μg / 24,000 53,000 10μg / 50μg / 24,000 53,000 1 体重変化 −1 マ ウ ス の 第 三 脳 室（ICV） お よ び 視 床 下 部 内 側 基 底 部 両 側（iMBH） に，2-deoxy-Dglucose（ 糖 利 用 阻 害 物 質 ），AICAR（AMPK 活 性 化 物 質 ）， お よ び 各 組 換 え 体 Progranulin を投与し，食餌摂取量（上図）および体重の変化（下図）を観察した。 Progranulin により食餌摂取量および体重が減少していることがわかる。 使用文献 Kim, H. K., et al., Endocrinology , 152 (12), 4672 ∼ 4682 (2011). 120315s_p15_k_n_i.indd 15 な お，フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www.funakoshi.co.jp/） からオンラインで行うこともできます。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ −3 組換え体 Progranulin によるマウスの食餌摂取量および体重の変化 試薬 −2 フナコシニュースを確実にお手元にお届けするために，ニュース の送付先に変更が生じた場合には，お早めに下記宛にご連絡下さい。 また，当社ではフナコシニュース定期送付の新規申し込みも随時 受け付けています（無料）。研究者の皆様のお役に立つ最新情報を満 載したフナコシニュースを，ぜひお知り合いの方にもご紹介下さい。 フナコシニュース定期送付の送付先変更・新規申し込み受付けは 当社営業担当まで。 Fax：03-5684-1634 e-mail：sales@funakoshi.co.jp お問い合わせ先 0 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です コントロール Progranulin, FLAG-tagged, Human, Recombinant KOM AG-40A-0068-C010 KOM AG-40A-0068-C050 Progranulin, FLAG-tagged, Mouse, Recombinant KOM AG-40A-0080-C010 KOM AG-40A-0080-C050 2012/03/02 14:46:31 16 EasyBeacons NEW 遺伝子機能解析 プローブ 合成受託 pentabase 蛍光強度 目的配列あり メーカー名：PentaBase A/S URL：http://www.pentabase.com/ PentaBase 社はデンマークのオーデンセに本拠を置 き，独自の pentabase を含むプライマー・プローブを 合成する受託サービスを行っています。 温度（℃） クエンチャー 蛍光色素 目的配列に結合していない状態の EasyBeacons EasyBeacons の模式図 pentabase を用いたプライマー・ プローブ合成受託サービス 独自の pentabase を含むプライマー・プローブを合成する 受 託 サ ー ビ ス で す。 用 途 に 応 じ て，EasyBeacons， HydrolEasy Probes，SuPrimers の 3 種類の製品がありま す。 EasyBeacons アプリケーション 目的配列あり 14 13 12 11 10 9 目的配列なし 8 7 6 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 目的配列に結合した状態の EasyBeacons 第 3 世代のプライマー・プローブ 製品名 50 45 40 35 30 25 20 15 10 目的配列なし 5 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 Molecular Beacons 蛍光強度 遺伝子機能解析 NEW 2012 年 3 月 15 日号 TaqMan，TaqMan MGB， その他ヌクレアーゼ活性 を利用した蛍光プローブ HydrolEasy Probes ・リアルタイム PCR SuPrimers ・通常のプライマーを用いた 通常のプライマー PCR EasyBeacons と Molecular Beacons における目的配列の有無 による温度プロファイルの比較 特 長 ◆ 蛍光色素およびクエンチャーそれぞれのすぐ内側に疎水性の pentabase が配置されています。そのため，目的配列に結合してい ない状態の EasyBeacons では，pentabase 同士の疎水性相互作 用により，蛍光色素およびクエンチャーが近接しています（上記模 対応する従来製品 ・3 ステップリアルタイム PCR ・PCR 産物のエンドポイント解析 Molecular Beacons ・in situ ハイブリダイゼーション 温度（℃） 式図参照） 。その結果，幅広い温度範囲においてバックグラウンドが 極めて低くなっています（上記グラフ参照）。 ◆ 標 的 配 列 に 結 合 し た EasyBeacons で は， プ ロ ー ブ 中 の pentabase により，標的配列への結合を安定化させます。 ◆ Molecular Beacons と異なり，プローブ内部のステム配列が不要 なため，幅広い温度範囲でのプローブのデザインが可能です。 ◆ ヌクレアーゼ耐性を有するため，PCR 産物のエンドポイント解析に も使用できます。 アプリケーション pentabase とは ● 3 ステップリアルタイム PCR ● PCR 産物のエンドポイント解析 ● in situ ハイブリダイゼーション 適した用途 ● SNP，アリルのメチル化など，ほとんど同じ配列の識別 参考文献 健常型 Christensen, U. B., Methods Mol. Biol. , 429, 137 ∼ 160 (2008). 0.10 ヘテロ接合体 蛍光強度 お問い合わせ先 ● 定量的アッセイのコントロール 0.05 変異型 受託 Threshold 0.00 共通の特長 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ ６ - ５３９ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６４５ 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 サイクル数 ◆ 従来のプライマー・プローブよりも低バックグラウンドで，S/N（シ 0.07 ◆ 特別な試薬・装置・消耗品は不要で，従来品からの切り替えが容易 です。 ■ EasyBeacons 変異型 0.06 0.05 グナル／ノイズ）比を向上させます。 蛍光強度 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です pentabase は，平面的ヘテロ芳香族特性を有する疎水性の分子で す。PentaBase 社のプライマー・プローブは一般的なオリゴヌクレ オチド中の任意の位置に pentabase を共有結合させて合成されます が，オリゴヌクレオチドの配列に影響を及ぼしません。pentabase 修飾したオリゴヌクレオチドは，目的配列との二本鎖形成時にエント ロピーが増大し，安定性が向上しています。また，オリゴヌクレオチ ドの両末端を pentabase 修飾した場合，pentabase 同士の疎水性 相互作用によりヘアピン構造をとることが可能ですが，分子内相補配 列によるヘアピン構造と異なり温度による影響を受けません。 0.04 ヘテロ接合体 0.03 0.02 Threshold 0.01 健常型 0.00 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 サイクル数 両端に蛍光色素とクエンチャーを結合させたプローブです。プローブ EasyBeacons を用いたリアルタイム PCR での SNP の検出 が目的配列に結合すると，蛍光色素とクエンチャーの距離が離れ，蛍光 健常型に対するプローブ（上），変異型に対するプローブ（下）をそれぞれ用いた。 を生じます。Molecular Beacons と同様に使用でき，幅広い温度範囲 でのプローブのデザインが可能です。 120315s_p16-17_k_i.indd 16 2012/03/02 15:42:28 2012 年 3 月 15 日号 配列内に蛍光色素とクエンチャーを結合させた，pentabase を含む プローブです。プローブが目的配列に結合すると，DNA ポリメラーゼ 配列設計 配列設計は，豊富な知識と経験を有する PentaBase 社スタッフが が有するエンドヌクレアーゼ活性により，蛍光色素がプローブから切り デザインします。 離されて蛍光を生じます。TaqMan，TaqMan MGB および，その他 1. 既存のテクノロジーからの切り替え（無料） のヌクレアーゼ活性を利用した蛍光プローブと同様に使用できます。 蛍光強度 または，HydrolEasy Probes のデザインをご提供します。 SNP 配列 野生型配列 複数のジェノタイプの識別用やコンセンサス配列を標的とプロー ブのデザインを行います。 10 15 20 25 サイクル数 30 35 40 45 50 蛍光強度 ※ 上記の配列設計の 2. ∼ 3. については，別途デザイン料を申し受けま す。詳細は当社受託・特注品業務担当までお問い合わせ下さい。 TaqMan MGB Probe SNP 配列 合成可能なプローブ／プライマー 野生型配列 ■ プローブ 5 10 15 20 25 30 サイクル数 35 40 45 50 HydrolEasy Probes と TaqMan MGB における特異性の比較 SNP 特異的なプローブを SNP 配列，野生型配列に対してそれぞれ使用した。 HydrolEasy Probes では，野生型配列での増幅がほとんど見られない。 特 長 ◆ 目 的 配 列 に 結 合 し て い な い 状 態 の HydrolEasy Probes で は， pentabase 同士の疎水性相互作用により，蛍光色素およびクエン 合成スケール 保証収量 10 nmol 10 nmol 50 nmol ＞ 15 nmol 200 nmol ＞ 25 nmol EasyBeacons （下記 Group 1 の場合） ￥28,000 ￥44,000 ￥56,000 EasyBeacons （下記 Group 2 の場合） ￥60,000 ￥78,000 ￥94,000 HydrolEasy Probes （下記 Group 1 の場合） ￥28,000 ￥44,000 ￥56,000 HydrolEasy Probes （下記 Group 2 の場合） ￥60,000 ￥78,000 ￥94,000 EasyBeacons / HydrolEasy Probes の蛍光色素・クエンチャーの組み合わせ Group 1 チャーが近接しています。その結果，バックグラウンドが極めて低 くなっています。高感度，高特異性を有します。 FAM-BHQ1, FAM-TAMRA, FAM-Dabcyl, HexBHQ1, Hex-TAMRA, Hex-Dabcyl, SIMA-BHQ1, SIMA-TAMRA, SIMA-Dabcyl のいずれか Cal Fluor Red 610-BHQ2, Quasar 570/Cy3-BHQ2, Quasar 670/Cy5-BHQ2, Quasar 710/Cy5.5-BHQ2 のいずれか ※ Cal Fluor Red 610 は Texas Red および ROX と類似の蛍光色素 アプリケーション ■ プライマー ● リアルタイム PCR pentabase を含むプライマーです。通常のプライマーと同様に使用 できます。 200 nmol ＞ 25 nmol ￥100 / base ￥3,000 ￥1,100 1 μmol ＞ 100 nmol ￥330 / base ￥2,800 ■ プライマー修飾（追加料金が発生します＊） 修飾の種類 特 長 温度レンジが広くなります。 ＊ 各修飾の合成スケールおよび追加料金については，フナコシホーム SuPrimers ページ（http://www.funakoshi.co.jp/node/17905）をご覧下さい。 DNA primer 5 10 15 20 25 30 35 40 45 サイクル数 SuPrimers と通常のプライマーの特異性比較 PCR 産 物 を SYBR® Green で 検 出 し た。Forward，Reverse 双 方 の プ ラ イ マ ー に SuPrimers を用いた場合，高感度かつ高いシグナルが得られた。Forward，Reverse プ ライマーの一方に SuPrimers を，もう一方に通常のプライマーを用いた場合，組み合わ せによっては，シグナルが得られた。Forward，Reverse 双方のプライマーに通常のプ ライマーを用いた場合，シグナルが得られなかった。 PCR 条件：95℃ 2 分，（95℃ 10 秒，50℃ 60 秒）×45 サイクル 120315s_p16-17_k_i.indd 17 3'-Biotin TEG 3'-Wobble 5'-Cy3 5'-HEX Amino-CX Modification Inosine Modification ご注文方法／納期 ご注文方法，納期等の詳細は，お気軽に当社受託・特注品業務担当へ お問い合わせ下さい。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ ６ - ５３９ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６４５ 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0 3'-Biotin 3'-Phosphate 5'-Cal Flour Red 5'-FAM 5'-TET Phosphorthioat 受託 ◆ プライマーダイマーの形成を減少させ，感度，特異性を向上させ， 3'-Amino-C7 Modification 3'-Dideoxy Nucleotide 5'-Biotin 5'-Cy5 5'-Phosphate dC-Brancher お問い合わせ先 ■ SuPrimers 合成スケール 50 nmol 保証収量 ＞ 15 nmol DNA Primer（カラム精製） ￥60 / base HPLC 精製（追加料金） SuPrimers への変換（追加料金） ￥800 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です Group 2 ※ 蛍光色素として ROX は使用できません。 蛍光強度 NEW 2. 目的配列に対するデザイン 3. マルチプルアッセイ用配列のデザイン 5 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 目 的 配 列 に 対 す る Molecular Beacons ま た は，TaqMan， TaqMan MGB のプローブをご使用の方に，対応した EasyBeacons HydrolEasy Probes 0.55 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 遺伝子機能解析 ■ HydrolEasy Probes 17 ※ FAQ については，フナコシホームページ（http://www.funakoshi. co.jp/node/17906）をご覧下さい。 2012/03/02 15:42:31 18 2012 年 3 月 15 日号 創薬研究 ヒト血液や尿などの生体試料に含まれる各種物質の測定や， 活性の測定・評価を行う受託サービスです。 創薬研究 バイオマーカー ※本サービスは研究用です。臨床用途には利用できません。 解析受託 ご注文方法 各種物質の測定や活性評価を承ります ご注文方法，お見積りの依頼などの詳細については，当社受託・特注 生体試料分析受託サービス 目的・適用例 測定項目・対象因子 品業務担当までお問い合わせ下さい。 測定試料 必要試料量 測定方法 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 価格（￥） メーカー 7,000（尿） DNA の酸化損傷 8-OHdG 尿，血清 1 ml ELISA 9,500（血清） 細胞膜の酸化損傷 イソプラスタン 尿 1 ml ELISA 8,000 8,000（尿） JCA 脂質の過酸化度 ヘキサノイルリジン 尿，血清 1 ml ELISA 10,000（血清） 抗酸化物質 コエンザイム Q10 血清 0.6 ml HPLC 7,000 抗酸化能 PAO : Potential Anti Oxidant 血清 0.5 ml 比色法 8,000 脂質代謝 脂質代謝関連項目プロファイル 血清 2 ml 以上 酵素法，電気泳動法 50,000 ＊ 1 KMM リゾホスファチジルコリン 血清，血漿（EDTA 処理） 0.5 ml 酵素法 ご照会下さい 動脈硬化 ホモシステインチオラクトナーゼ活性 血清 0.5 ml 比色法 ご照会下さい AFR 血漿 （EDTA処理） 0.5 ml 酵素法 ご照会下さい 総ホモシステイン 血清＊2， ストレス バイオピリン 尿 1.0 ml ELISA ご照会下さい 炎 症 HMGB1 血清，血漿 0.5 ml ELISA ご照会下さい SNT Antigen-captured ELISA ご照会下さい 過敏性肺炎 抗トリコスポロン・アサヒ抗体 血清 0.1 ml 250 μl 以上（血漿）， 炎症，アレルギー性疾患 サブスタンス P 血漿，尿 ELISA 10,000 1 ml 以上（尿） 炎症，一酸化窒素産生 ニトロチロシン 血漿 100 μl 以上 ELISA 18,000 アトピー性皮膚炎重症度 TARC 血清 200 μl 以上 ELISA 15,000 アトピー性皮膚炎かゆみ NGF 血清，尿 500 μl ELISA 15,000 25,000（血清） KMM 腎機能 Trp-Man（MPT） 血清，尿 300 μl 以上 HPLC 20,000（尿） 各種物質代謝 ビタミン C（アスコルビン酸） 血清，血漿 200 μl 酵素法 3,400 500 μl 以上 ウイルス感染 MxA タンパク質 全血（EDTA 処理） （安定化剤で希釈し ELISA 9,000 たもの） 大腸癌，泌尿器癌，皮膚 2 ml（全血）， 1 分子蛍光分析 セプチン 4 GTPase 全血，血清 25,000 ＊ 1 BDN 癌 200 μl（血清） システム 消化器疾患，大腸癌 ラクトフェリン 便 − 金コロイド凝集法 ご照会下さい 大腸癌 ジアセチルスペルミン 尿 0.5 ml 金コロイド凝集法 ご照会下さい AFR スフィンゴミエリン 血清，血漿（EDTA 処理） 0.5 ml 酵素法 ご照会下さい 基礎研究 遊離コリン 血漿（EDTA 処理） 0.5 ml 酵素法 ご照会下さい 炎症性腸疾患 カルプロテクチン 便 − ELISA ご照会下さい 腸管機能 ジアミンオキシダーゼ活性 血清，腸管組織 − − ご照会下さい MPI 腸管細胞増殖 GLP-1，GLP-2，グレリン 血清，腸管組織 − ELISA ご照会下さい ＊ 1 ：1 回のご依頼での試料数に応じた価格で承ります。詳細はお問い合わせ下さい。 お問い合わせ先 ＊ 2 ：一般に EDTA 処理血漿の使用が推奨されています。 ■ 日研ザイル株式会社日本老化制御研究所（メーカー：JCA） 独自の技術を活かした，酸化ストレス関連の受託 検査を行っています。生体の酸化状態や抗酸化物質 ■ シノテスト サイエンス・ラボ（SSL）（メーカー：SNT） 株式会社シノテストで開発された試薬を用いた生 体試料分析受託サービスを行っています。 受託 の評価に最適です。 ※ ヒト以外に，マウスなどの試料からも測定・評価を承ります。 ■ 株式会社ブラディオン医科学研究所（メーカー：BDN） ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ ６ - ５３９ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６４５ ヒトの大腸癌，泌尿器癌および皮膚癌の特異的 ■ 協和メデックス株式会社（メーカー：KMM） 診断薬開発で培った技術と精度を活かし，腎疾患 マーカーの測定受託サービスを行っています。同時 に TGF- β 1，SCD，PSA の測定も実施しています。 や炎症のマーカーの受託分析を行っています。 ■ 自然免疫応用技研株式会社（メーカー：MPI） ■ アルフレッサ ファーマ株式会社（メーカー：AFR） アルフレッサ ファーマ株式会社 120315s_p18_i.indd 18 生活習慣病関連のバイオマーカーの研究開発に取 り組んでおり，動脈硬化症や癌などのマーカーの受 自然免疫活性化能を持つ安全な機能性糖脂質を製 造している企業で，マクロファージ活性化能試験や 糖脂質関連解析サービスも行っています。 託検査を行っています。 2012/03/02 14:47:10 2012 年 3 月 15 日号 微生物 ● 純粋培養された菌株試料（シャーレ，スラントなど）を，冷蔵状態 でお送り下さい。 細胞培養 ご注意事項 細胞培養 19 ● 病原性（バイオセーフティーレベル 2 以上）を有する可能性のある菌 微生物同定受託サービス 体試料につきましては，お受けすることができませんのでご了承下さい。 DNA 塩基配列情報に基づき，微生物種の簡易同定を迅速・ 安価に行う受託サービスです。 ● 複数の菌種が混在している場合は，本分析では良好な結果を得るこ とができません。「クローン解析」をご検討下さい。詳細は当社受託・ 特注品業務担当までお問い合わせ下さい。 ● お送りいただいた試料は，解析結果報告後に処分させていただきます。 ● 菌株試料より DNA を抽出し，rRNA 遺伝子またはスペーサー領域 ● 良好な結果が得られない場合は，最大 2 回まで分析を行います。作 業を 2 回行っても結果が得られない場合には，作業を中止させてい （ITS）の DNA 塩基配列を解析します。 ● 既知の微生物の塩基配列データベースとの相同性検索を行い，近縁 ただきます。 ● 作業が途中で終了した場合は，それまでの実費を申し受けます。 種と推定される微生物種のリストを報告いたします。 細胞情報伝達 受託内容 ご注文方法 受託手順 詳細は当社受託・特注品業務担当までお気軽にお問い合わせ下さい。 菌株試料から DNA を抽出する ↓ 対象遺伝子を PCR 増幅する ↓ PCR 増幅産物の DNA 塩基配列を解析する ↓ 相同性検索をする （DNA 塩基配列データベースとの照合） ↓ 相同性上位の菌種リストを報告 NEW 微生物群集 構造解析／特定微生物の 定量分析受託サービス 日鉄環境エンジニアリング（株）は，遺伝子解析技術を活用し，微生 物群集の解析や特定微生物の定量の受託サービスを行っています。 ■ 微生物群集の構造解析受託サービス 土壌や地下水など環境試料の細菌叢（フローラ）を解析するサービ スです。細菌の集団構成パターンの比較や変化の追跡を調べます。 詳 細 は フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www.funakoshi.co.jp/ node/17913）をご覧下さい。 ■ 特定微生物の定量分析受託サービス 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 土壌や地下水浄化，活性汚泥の評価指標となる特定微生物を高精度 に定量分析します。 詳 細 は フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www.funakoshi.co.jp/ node/17911）をご覧下さい。 NEW オートファジー 価 格 項 目 ￥24,000 / 1 試料 16S rRNA 遺伝子 全長配列解析 （片鎖 約 1,500 bp） ￥53,000 / 1 試料 16S rRNA 遺伝子 全長配列解析 （両鎖 約 1,500 bp） ￥75,000 / 1 試料 ITS1 配列解析 ￥45,000 / 1 試料 28S, 26S rRNA 遺伝子 D1/D2 配 列解析 ￥24,000 / 1 試料 ITS1 配列解析 ￥24,000 / 1 試料 Autophagy Library 既知のオートファジー活性化／阻害物質を計 96 種集めたラ イブラリーです。細胞内や in vitro における各化合物の作用機 序や動態の解析に最適です。 特 長 ◆ 各化合物は 10 mM の DMSO 溶液＊として，96 ウェルプレートの 各ウェルに 100 μl または 500 μl ずつ分注されています。 標準納期 試料受取後，10 ∼ 15 営業日（お急ぎの場合はご相談下さい） ＊ Bafilomycin A（1 mM）を除く。 ※ プレートのマップデータ（SD ファイル）が添付されています。 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ ６ - ５３９ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６４５ 真 菌 16S rRNA 遺伝子 部分配列解析 （両鎖 約 750 bp） オートファジー研究に有用な化合物ライブラリー 受託 細 菌 価 格 ライブラリー お問い合わせ先 細胞情報伝達 ※ ライブラリーの内容は，変更される場合があります。詳細は当社テ クニカルサポート（試薬担当）までお問い合わせ下さい。 120315s_p19-20_i.indd 19 2012/03/02 14:47:28 20 2012 年 3 月 15 日号 細胞情報伝達 含まれる化合物の例 化合物名 NVP-BEZ235 [915019-65-7] ［CAS 番号］ BIOMOL 社各種ライブラリー PI-103 [371935-74-9] O リガンド，阻害物質，モジュレーター等，様々な生理活性物質のラ イブラリーです。いずれの製品も 96 ウェルプレートフォーマットの ため，ハイスループットな解析に対応できます。 N O 化学構造式 N N N O N N N OH N N NEW ※ライブラリーの内容については，変更される可能性があります。詳 細は当社テクニカルサポート（欄外参照）までお問い合わせ下さい。 阻害活性 PI3K 阻害，mTOR 阻害 PI3K 阻害，mTOR 阻害 化合物名 ［CAS 番号］ Rapamycin [53123-88-9] Timosaponin A Ⅲ [41059-79-4] HO 約 480 種類の生物活性物質ライブラリーです。 O 抗 体 ■ Bioactive Lipid Library H O HO N O HO O H O O O O HO O O OH O HO O O H H HO 化学構造式 ■ ICCB Known Bioactives Library H O 約 200 種類の生理活性脂質ライブラリーです。 H ■ Endocannabinoid Library H O カンナビノイドレセプターおよびバニロイドレセプターのリガンド 類約 60 種類のライブラリーです。 O HO OH OH 阻害活性 mTOR 阻害 mTOR 阻害，ER ストレスの誘導 ※上記以外のライブラリーも取りそろえております。詳細はフナコシ ホームページ（http://www.funakoshi.co.jp/node/12969）を 品 名 NEW メーカー 商品コード ご覧下さい。 包装 / 価格（￥） Autophagy Library MOL BML-2837-0100 −80℃ C 100 μl/well MOL BML-2837-0500 −80℃ C 500 μl/well 1 plate / ご照会下さい 1 plate / ご照会下さい NEW 抗体 脂質 脂質代謝 肥満やそれに関連した疾患の発生率が増加していることを受 け，脂質代謝関連研究に有用な，Novus Biologicals 社の高 品質な抗体をご紹介します。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 脂質代謝関連研究に有用な高品質の抗体 脂質代謝関連抗体 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です Novus Biologicals 社 Catalog of Antibodies for Lipid and Methabolism Research （A4 版，16 ページ，英語版カタログ） 脂質・代謝研究関連抗体の新製品がクローズ アップされています。 お問い合わせ先 HeLa 細 胞 を， 抗 ATF6 抗 体（#NBP175478）および FITC 標識二次抗体（緑色） を用いて免疫蛍光染色した。青色は DAPI による核染色。 ヒ ト 精 巣 組 織 の mtTFA を， 抗 mtTFA 抗 体（#NBP1-71648） を 用いて免疫染色した。 試薬 品 名 抗原種 免疫動物 （クローン） Anti-ATF6 Human Rabbit-Poly ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ 抗原：aa 200 ∼ 350，性状：APu，交差性：Human Anti-C11orf59 Human 抗原：aa 50 ∼ 250，性状：APu，交差性：Bovine/Human/Mouse/Rat Anti-DGAT2 Rabbit-Poly Human Rabbit-Poly Human Rabbit-Poly Human 抗原：aa 1 ∼ 103（full length），性状：APu，交差性：Human Rabbit-Poly 抗原：aa 100 ∼ 200，性状：APu，交差性：Human/Mouse Anti-DGAT2 抗原：aa 200 ∼ 300，性状：APu，交差性：Human/Mouse Anti-G0S2 Anti-mtTFA〈Anti-Transcription Factor A, Mitochondrial〉 Human 性状：PAPu，クラス：IgG，交差性：Human Anti-ROBLD3 抗原：N 末端領域，性状：APu，交差性：Human/Mouse 120315s_p19-20_i.indd 20 Human ※カタログをご希望の方は，フナコシホームページのオンライン請求か，当社 営業担当（Fax 03-5684-1634）までお申し込み下さい。 標識 − − − − − メーカー 商品コード 包 装 IC, IF 適用 NOV NBP1-75478SS NBP1-75478 0.025 ml 0.1 ml 19,000 49,000 IC, IF, IHC, West NOV NBP1-71689 0.05 ml 58,000 West NOV NBP1-71700SS NBP1-71700 0.025 ml 0.1 ml 19,000 49,000 West NOV NBP1-71701SS NBP1-71701 0.025 ml 0.1 ml 19,000 49,000 IC, IF NOV NBP1-71690 0.05 ml 58,000 NOV NBP1-71648SS NBP1-71648 0.025 ml 0.1 ml 19,000 49,000 NOV NBP1-71687 0.05 ml 65,000 Mouse-Mono IC, IHC, − （18G102B2E11） West Rabbit-Poly − IC, IF, IHC 価格（￥） 2012/03/02 14:47:33 TRANSFORMED SSC -> 0 256 512 768 1,024 フローサイトメトリー 0 256 512 768 1,024 FSC-Height SPN 1 -> ACM7896.001 T 細胞や B 細胞などの同定に有用な，フローサイトメトリー 用の抗ヒト CD マウスモノクローナル抗体のセットです。試料 の 調 製 に は，Cytognos 社 の 赤 血 球 溶 解 試 薬 で あ る QUICKLYSIS の使用をお勧めします。 100 101 102 CD3-PECy5 -> ACM7896.001 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ※フローサイトメトリー用の赤血球溶解試薬 QUICKLYSIS の詳細は，フナコシ ホームページ（http://www.funakoshi.co.jp/node/14146）をご覧下さい。 101 102 100 CD4-FITC -> 103 104 103 104 104 104 103 100 101 102 CD8-PE -> ACM7896.001 103 ACM7896.001 CD4-FITC -> 100 101 102 TRANSFORMED SSC -> 0 256 512 768 1,024 フローサイトメトリー用 マルチカラー抗ヒト CD 抗体 100 101 102 CD8-PE -> ACM7896.001 103 104 104 NEW 100 101 102 CD8-PE -> ACM7896.001 103 104 FITC 標 識 抗 CD4 抗 体，PE 標 識 抗 CD8 抗 体，PECy5 標 識 抗 CD3 抗 体 の セ ッ ト （#CYT-4F6-8PE4-3C4）による解析例。 ■ 2 カラー抗体 標識抗体 1 （クローン） 103 CD3-PECy5 -> 100 101 102 TRANSFORMED SSC -> 0 256 512 768 1,024 血液学 ［メーカー：CGS］ 標識抗体 2 （クローン） 用 途 商品コード 包装 価格 （￥） CD3-FITC （Cris-7） CD4-PE （Edu-2） Helper / Inducer T 細胞（CD3 ＋，CD4 ＋）の認識に有用。 CYT-3F8-4PE9 1 ml 50,000 CD3-FITC （Cris-7） CD8-PE （17D8） Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD3 ＋，CD8 ＋）の認識に有用。 CYT-3F8-8PE4 1 ml 50,000 CD3-FITC （Cris-7） CD16-PE （3G8） T 細胞（CD3 ＋）や NK 細胞（CD3 −，CD16 ＋）の認識に有用。 CYT-3F8-16PE7 1 ml 53,000 CYT-3F8-16PE7+56PE 1 ml 55,000 CD3-FITC （Cris-7） CD16-PE（3G8） T 細胞（CD3 ＋）や NK 細胞（CD3 −，CD16 ＋，CD56 ＋）の認識に有用。 CD56-PE（C5.9） T 細胞（CD3 ＋）や B 細胞（CD19 ＋）の認識に有用。 CYT-3F8-19PE5 1 ml 48,000 CD3-FITC （Cris-7） CD56-PE （C5.9） T 細胞（CD3 ＋）や NK 細胞（CD3 −，CD56 ＋）の認識に有用。 CYT-3F8-56PE 1 ml 50,000 CD3-FITC （Cris-7） HLADR-PE （423L） 活性化抗原を有する T 細胞（CD3 ＋，HLA-DR ＋）の認識に有用。 CYT-3F8-DRPE 1 ml 55,000 CD5-FITC （MCD5） CD19-PE （HD37） CD5 ＋の細胞と CD19 ＋の B 細胞の認識に有用。 CYT-5F4-19PE5 1 ml 55,000 CD4-FITC （Edu-2） CD8-PE （17D8） Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD4 −，CD8 ＋） Helper / Inducer T 細胞（CD4 ＋，CD8 −）や， CYT-4F6-8PE4 の認識に有用。Helper / Suppressor 比（CD4 ＋ / CD8 ＋）の決定も可能。 1 ml 48,000 CD4-FITC （Edu-2） CD45-PE （D3/9） Helper / Inducer T 細胞（CD4 ＋）の認識に有用。CD45（LCA：白血球共通抗原）はリンパ球， CYT-4F6-45PE4 単球，顆粒球などの造血系細胞で発現している。リンパ球のフェノタイピングに有用。 1 ml 48,000 CD8-FITC CD16-PE （UCH-T4） （3G8） NK 細胞サブセット（CD16 ＋，CD8 ＋および CD16 ＋，CD8 −）の認識に有用。 CYT-8F8-16PE7 1 ml 52,000 CD8-FITC CD56-PE （UCH-T4） （C5.9） NK 細胞サブセット（CD56 ＋，CD8 ＋および CD56 ＋，CD8 −）の認識に有用。 CYT-8F8-56PE 1 ml 53,000 CD45-FITC CD14-PE （EO1） （47-3D6） リンパ球，単球，顆粒球などの細分に有用。 CYT-45F5-14PE3 1 ml 61,000 ■ 3 カラー抗体 ［メーカー：CGS］ 標識抗体 1 標識抗体 2 標識抗体 3 （クローン） （クローン） （クローン） − 商品コード ＋ CD19-PECy5 T 細胞（CD3 ），NK 細胞（CD3 ，CD56 ）および B 細胞（CD19 ）の認識 CYT-3F8-56PE-19C2 （J4.119） に有用。 CD8-PE （17D8） CD3-PECy5 （UCHT1） CD4-FITC （Edu-2） CD8-PE （17D8） CD45-PECy5 （IMMU19.2） ＋ Helper / Inducer T 細胞（CD3 ，CD4 ）や Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD3 ， CYT-4F6-8PE4-3C4 CD8 ＋）の認識に有用。Helper / Suppressor 比（CD4 ＋ / CD8 ＋）の決定も可能。 ＋ − − Helper / Inducer T 細胞（CD4 ， CD8 ）や Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD4 ， CD8 ＋）の認識に有用。Helper / Suppressor 比（CD4 ＋ / CD8 ＋）の決定も可能。 CYT-4F6-8PE4-45C3 抗原 CD45（LCA：白血球共通抗原）はリンパ球，単球，顆粒球などの造血系 細胞で発現している。リンパ球のフェノタイピングに有用。 Helper / Inducer T 細胞（CD3 ＋，CD4 ＋）や Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD3 ＋， CYT-8F8-4PE9-3C4 CD8 ＋）の認識に有用。Helper / Suppressor 比（CD4 ＋ / CD8 ＋）の決定も可能。 ＋ − − Helper / Inducer T 細胞（CD4 ，CD8 ）や Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD4 ， CD8 ＋），B 細胞（CD19 ＋）の認識に有用。Helper / Suppressor 比（CD4 ＋ / CD8 ＋）CYT-8F8-4PE9-19C2 の決定も可能。 Helper / Inducer T 細胞（CD4 ＋， CD8 −）や Suppressor / Cytotoxic T 細胞（CD4 −， CD8 ＋）の認識に有用。Helper / Suppressor 比（CD4 ＋ / CD8 ＋）の決定も可能。 CYT-8F8-4PE9-45C3 抗原 CD45（LCA：白血球共通抗原）はリンパ球，単球，顆粒球などの造血系 細胞で発現している。リンパ球のフェノタイピングに有用。 CD8-FITC CD4-PE （UCH-T4） （Edu-2） CD3-PECy5 （UCHT1） CD8-FITC CD4-PE （UCH-T4） （Edu-2） CD19-PECy5 （J4.119） CD8-FITC CD4-PE （UCH-T4） （Edu-2） CD45-PECy5 （IMMU19.2） CD10-FITC CD5-PE （SN5c） （MCD5） CD19-PECy5 直接免疫蛍光染色による CD19 ＋の B 細胞および悪性 B 細胞の認識や，白血病 CYT-10F1-5PE4-19C2 （J4.119） とリンパ腫のフェノタイピングに有用。 120315s_p21_k_n_i.indd 21 1.5 ml 69,000 ＋ 1.5 ml 69,000 1.5 ml 69,000 1.5 ml 69,000 1.5 ml 68,000 1.5 ml 68,000 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ CD4-FITC （Edu-2） ＋ 包装 価格 （￥） ＋ 試薬 CD56-PE （C5.9） 用 途 ＋ お問い合わせ先 CD19-PE （HD37） 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です CD3-FITC （Cris-7） CD3-FITC （Cris-7） 21 免疫化学 NEW 免疫化学 TRANSFORMED SSC -> 0 256 512 768 1,024 2012 年 3 月 15 日号 1.5 ml 76,000 2012/03/02 14:47:57 22 2012 年 3 月 15 日号 免疫化学 NEW NEW NEW 免疫化学 薬物動態 免疫化学 ELISA 薬物動態 アッセイキット Th2 細胞性免疫反応研究に有用なキット ヒト IgG1 / IgG4 を利用した薬物動態研究に有用なキット Mouse Anti-Ovalbumin IgG1 EIA Kit Human IgG1 / IgG4 Therapeutic EIA Kit マウス血清・血漿試料中の抗 Ovalbumin IgG1 抗体を，サ ンドイッチ法により定量できる ELISA キットです。 サル血清中のヒト IgG1 またはヒト IgG4 を，サンドイッチ 法により定量できる ELISA キットです。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用できません。 抗 Ovalbumin IgG1 抗体とは ヒト IgG について ニワトリ卵アルブミン（ovalbumin：OVA）をアジュバントである 水酸化アルミニウム（aluminum hydroxide：alum）と混合して複合 体を形成させ，マウスへ免疫することは，強力な Th2 細胞性免疫反応 1∼6 を誘導する極めて有効な手法です 。 OVA / alum 免疫マウスを利用した研究では，免疫効果や薬剤活性， 特定遺伝子を欠損させた時の影響などを検証するために，血清・血漿 中の抗 OVA 抗体の濃度測定が必要とされる場合があります。この抗 OVA 抗体のアイソタイプは IgG1 です。 OVA 特異的な IgG1 の血漿濃度は，OVA 特異的な IgE の 1,000 倍以上です。そのため抗 OVA IgG1 の測定は，Th2 細胞性免疫反応 の強さを評価するための一般的な手法となっています。 薬剤の前臨床評価において，アカゲザルやカニクイザルといった霊 長類が実験動物として使用されることがありますが，サル血清中のヒ ト抗体の動態解析を行うためには，内在性のサル IgG と導入したヒト IgG とを区別する必要があります。これらの相同性が非常に高いこと から両者を区別することは困難であるとされてきましたが，本製品は ヒト IgG のみを特異的に測定することができます。 IgG1 はエフェクター細胞表面の Fc レセプターに強い親和性を有 し，抗体依存性細胞傷害活性（ADCC）を誘導します。また，補体を 活性化して補体依存性細胞傷害活性（CDC）を誘導します。これに対 し IgG4 は Fc レセプターへの親和性が低いことから，ADCC および CDC 誘導が望ましくない場合に利用されています。 参考文献 1. Pichavant, M., et al., Curr. Protoc. Immunol. , 79 , 15.18.1 ∼ 15.18.19 (2007). 特 長 2. Saito, H., et al., Immunology , 104 (2), 226 ∼ 234 (2001). 3. Hogan, S. P., et al., J. Clin. Invest. , 99 (6), 1329 ∼ 1339 (1997). ◆ 96 ウェルストリッププレートフォーマットです。 4. Sawada, K., et al., Clin. Exp. Allergy , 27 (2), 225 ∼ 231 (1996). ◆ 試料の前処理は必要ありません。 5. Kennedy, J. D., et al., Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. , 12 (6), 613 ∼ ◆ 測定試料＊ 1：血清，血漿（EDTA，ヘパリン処理） 623 (1995). ◆ 測定動物種＊ 1：サル，げっ歯類 ◆ 測定範囲：3.13 ∼ 200 ng/ml（#500910） (1994). 7.8 ∼ 500 ng/ml（#500920） ◆ 測定波長：450 nm 特 長 ＊ 1 カニクイザル血清およびラット血清を測定した実績があります。 ※ キット内容の詳細は，フナコシホームページ（http://www.funakoshi. co.jp/node/17893）をご覧下さい。 ◆ 96 ウェルストリッププレートフォーマットです。 1.8 1.6 ◆ 測定動物種：OVA / alum 免疫マウス 試薬 吸光度（450 nm） お問い合わせ先 ◆ 測定試料：血清，血漿（EDTA，ヘパリン処理） ◆ 測定範囲：1.56 ∼ 200 ng/ml ◆ 検出限界：1.56 ng/ml ◆ 測定波長：450 nm 1.4 1.2 1.0 ◆ 0.6 0.4 0.2 ◆ ◆ ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ 10 100 ヒト IgG1 濃度 (ng/ml) 1,000 1.2 1.0 カニクイザル血清 0% 1% 5% 10% 0.8 ◆ 0.4 0.0 ◆ ◆ 0.6 0.2 ◆ ◆ ◆ ◆ 10 100 ヒト IgG4 濃度 (ng/ml) 1,000 各濃度のカニクイザル血清を含む試料を用い，ヒト IgG1（左）およびヒト IgG4（右）の 標準曲線を作成した。血清の影響をほとんど受けないことが確認できた＊ 2。 ● Anti-ovalbumin IgG1 (mouse) EIA standard ● Immunoassay buffer B concentrate ● Polysorbate 20 ● Wash buffer concentrate ● HRP stop solution ● TMB substrate solution ● 96-well cover sheet 品 名 120315s_p22_k_n_i.indd 22 ◆ 1.4 血清濃度と標準曲線の関係 ● Ovalbumin precoated 96-well strip plate メーカー 商品コード ◆ ◆ ● Goat anti-mouse IgG1 HRP detection antibody Anti-Ovalbumin IgG1, Mouse, EIA Kit CAY 500830 B 1.6 ◆ 0.8 0.0 キット内容 1.8 カニクイザル血清 0% 1% 5% 10% 吸光度（450 nm） 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です 6. Kung, T. T., et al., Int. Arch. Allergy Immunol. , 105 (1), 83 ∼ 90 包装 / 価格（￥） 96 tests / 56,300 ＊ 2 測定試料に 5％以上のカニクイザル血清を含む場合は，あらかじめ希 釈して下さい。 品 名 メーカー 商品コード IgG1, Human, Therapeutic EIA Kit CAY 500910 B IgG4, Human, Therapeutic EIA Kit CAY 500920 B 包装 / 価格（￥） 96 tests / 86,300 96 tests / 86,300 2012/03/02 14:48:22 2012 年 3 月 15 日号 免疫化学 切片作製 切片作製 組織染色 5 種類の組織切片用処理試薬のセット 金コロイド染色に最適な組織切片用接着剤／封入剤 Total Cutting Solution Kit BIOBOND / BIOMOUNT 組織切片用のユニークな 5 種類の 処理試薬をセットにした製品です。 3 種類の軟化試薬と，2 種類の脱灰 試薬が含まれており，様々な組織切 片を処理する際に有用です。 免疫化学 NEW 免疫化学 23 NEW 金コロイド標識試薬を使用した組織染色に最適な，組織切片 用接着剤（BIOBOND）および封入剤（BIOMOUNT）です。 ■ BIOBOND 特 長 ※本製品は研究用です。臨床用途には使用で きません。 ◆ 本製品でスライドガラス表面をコーティングすることで，組織切片 を強固に接着させることができます。 各処理試薬の特長 ◆ スライドガラス表面への金コロイド標識試薬の非特異結合＊ 1 を防ぐ ■ Histoheme ため，バックグラウンドシグナルが低減します。 アンモニアベースの軟化試薬で，血液含有量が多い組織から切片を作 製するのに有用です。胎盤破片，骨髄生検，肝臓，脾臓，子宮内膜など 血液の含有量が多い組織は，処理・乾燥後に硬化します。これらの組織 から組織切片を作製すると，試料が砕けたり，血液が多い部分が剥がれ ◆ インキュベーション中にスライドガラスから組織切片が剥離するの を防ぎます。 ◆ パラフィン包埋切片，レジン包埋切片，細胞塗抹標本，サイトスピ ン標本，凍結切片など，ほとんどの組織試料に適用可能です。 落ちて，ウォーターバス，ミクロトームや実験台全体が汚れてしまいま ◆ 抗原の構造・性質を維持したまま接着できます。 す。Histoheme により，これらの問題を解決できます。 ◆ 再現性のある結果が得られます。 ■ Soft Block ◆ 本 製 品 で 接 着 し た 切 片 は ， 組 織 染 色 （ 光 学・電 子 顕 微 鏡 観 察 ）， パラフィン包埋組織用の軟化試薬です。硬くて切断が困難な組織は， in situ ハイブリダイゼーションに使用できます。 脱灰処理を行うと，硬化してしまうことがあります。また，アルコール ◆ 本製品 20 ml で 1,000 枚以上のスライドを処理できます。 およびキシレン処理を行うと，骨，爪，および筋肉組織からの切片の切 ＊ 1 金コロイド標識試薬を使用する場合，poly-L-lysine，Elmer's blue， Chrome alum などの接着剤はバックグラウンドシグナルを引き起こ すため，使用しないで下さい。 り出しが困難になります。パラフィンブロックの表面を数 μm 切り出 した後，ブロック表面を Soft Block に浸すだけで，切片の切り出しが ■ Soft Nail 毛髪，爪，皮膚，角，蹄，羽のような硬い角質化組織を軟化する試薬 です。角質化組織は，切片を切り出してスライドに貼り付けると，曲がっ たり，丸まったりします。また，処理後に組織が更に硬化し，切片を切 り 出 す こ と が 困 難 に な り ま す。Soft Nail は， ユ ニ ー ク な 組 成 の Ready-to-use の溶液で，脱灰とは異なる手法で角質を軟化させるため， メーカー 商品コード BIOBOND Tissue Adhesive CRL BB20 包装 / 価格（￥） 20 ml / 11,000 ■ BIOMOUNT お問い合わせ先 切片の切り出しが容易になります。 品 名 特 長 ■ Super Decalcifier Ⅰ／Ⅱ 骨などの硬組織試料からカルシウム塩を脱灰する，Ready-to-use の ◆ 銀増感後のスライドにも使用できます＊ 2。 脱灰に適した Super Decalcifier Ⅰ , Delicate と，堅固な緻密骨など ◆ 一般的な対比（核）染色後の封入にも対応しています。 の試料を長時間脱灰するのに最適な Super Decalcifier Ⅱ , Heavy ◆ パラフィン包埋切片およびレジン包埋切片の封入に適しています。 Duty の 2 種類の試薬があります。 ＊ 2 銀増感を行った場合に，切片表面に形成される半透明のカルボン酸銀 により，観察しにくくなることがあります。キシレン透徹により賦活 化できますが，この操作には手間がかかります。本製品は低酸化性の ため，カルボン酸銀の生成を抑制することができます。 ※ 本製品はキシレンに溶解性があるため，脱水・キシレン透徹後にご使用下 さい。 ● Histoheme ● Super Decalcifier Ⅰ , Delicate ● Soft Block ● Super Decalcifier Ⅱ , Heavy Duty ● Soft Nail ● 10 multi-well block holders 品 名 メーカー 商品コード 品 名 メーカー 商品コード Total Cutting Solution Kit POL 25388 包装 / 価格（￥） 1 kit / BIOMOUNT Tissue Mounting Medium CRL BM100 包装 / 価格（￥） 100 ml / 9,000 ＦＡＸ ０３ ５ - ６８４ １ - ７７５ ＴＥＬ ０３ ５ - ６８４ １ - ６２０ ◆ 保管中の退色を防ぎ，染色強度とコントラストを維持します。 試薬 液体試薬です。免疫組織化学染色などの特殊染色に使用する組織試料の キット内容 本紙に掲載されている 製品はすべて研究用です ※ 操 作 方 法 概 略 に つ い て は， フ ナ コ シ ホ ー ム ペ ー ジ（http://www. funakoshi.co.jp/node/17903）をご覧下さい。 容易になります。 29,000 ※ キット別売品もあります。詳細はフナコシホームページ（http://www. funakoshi.co.jp/node/17899）をご覧下さい。 120315s_p23_k_n_i.indd 23 2012/03/02 14:48:40 24 2012 年 3 月 15 日号 タッチパネル式！ 販売店 〒113-0033 東京都文京区本郷2丁目9番7号 http://www.funakoshi.co.jp/ e-mail : info＠funakoshi.co.jp 印刷用の紙にリサイ クルできます 不要となった際は， 古紙回収・リサイク ルに出してください ※本紙に記載されている価格は，2012 年 3 月 15 日現在です。 120315s_p24_i.indd 24 試薬に関して : Tel.03-5684-1620 Fax 03-5684-1775 e-mail : reagent＠funakoshi.co.jp 機器に関して : Tel.03-5684-1619 Fax 03-5684-5643 e-mail : kiki＠funakoshi.co.jp ZB-V03N-02（ 2012.3, № 510 ） 2012/03/02 14:49:05
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