資料 - 福岡大学

食塩依存性高血圧で降圧を示す
紅タデスプラウト
ヒトキマーゼ抑制作用を介した新規作用機序
福岡大学筑紫病院
循環器内科
浦田秀則
組織レニン・アンジオテンシン系
心血管系組織自体がレニン-アンジオテンシン系の因子全てを有し、
局所でアンジオテンシンIIを産生し、これが心血管障害の原因となる
循環（古典的）R-A系
組織R-A系
アンジオテンシノーゲン
アンジオテンシノーゲン
レニン(?)
レニン
アンジオテンシンI
アンジオテンシンI
ACE
キマーゼ
アンジオテンシン変換酵素(ACE)
アンジオテンシンII
高血圧
ｶﾃﾌﾟｼﾝG
アンジオテンシンII
？
福岡大学
臓器障害
1
ヒト心臓(左室)ホモジネート中AngⅡ産生
各種酵素阻害薬効果
コントロール
カプトプリル
EDTA
衝撃的事実として
ヒト心臓のAngII産生のうち、
約80%はACE非依存性であった
(キマーゼ依存性)
NEM
SBTI
PMSF
2
Urata H et al. Circ Res1990
キマーゼ阻害薬の初期対象疾患
１．心筋梗塞後心筋リモデリングや心不全抑制
Ihara 2000, Hoshino 2003, Wei 2010
２．線維化抑制が期待される病態
動脈硬化 Ihara 1999, Uehara 2000, 2002
腎硬化症 Toth 1999
不整脈 Nakashima 2000
３．糖尿病 Maeda 2010
４．高脂肪酸由来内皮機能障害 Azekoshi 2010
3
食塩付加マウス高血圧モデル開発
＆
キマーゼ阻害薬の効果
（TPC-806)
福岡大学
4
キマーゼ阻害剤の用量依存性降圧効果
収縮期血圧 (mmHg)
高食塩負荷(2%NaCl飲水)マウスモデル
165
高食塩水（2％NaCl飲水）
HS-control
高食塩水＋キマーゼ阻害剤25mg
HS-CI
25mg
高食塩水＋キマーゼ阻害剤50mg
HS-CI
50mg
高食塩水＋キマーゼ阻害剤75mg
HS-CI
75mg
高食塩水＋キマーゼ阻害剤100mg
HS-CI
100mg
145
125
105
週 0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
125
Devarajan S & Urata H Am J Physiol 2015
各種降圧薬のSBPへの効果
高食塩負荷(2%NaCl飲水)マウスモデル
165
SBP (mmHg)
高食塩水（2％NaCl飲水）
（利尿剤）
HS-control
高食塩水＋利尿薬
（ACE阻害剤）
HS-HCTZ
高食塩水＋ACE阻害薬
（AⅡ拮抗剤）
HS-captopril
（脂質低下剤）
高食塩水＋AⅡ拮抗薬
HS-losartan
（Ca拮抗剤）
高食塩水＋アルドステロン受容体拮抗薬
HS-EPL
高食塩水＋Ca拮抗薬
HS-amlodipine
NW-control
正常水のみ
145
**
125
105
週0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10 11 12
6
Devarajan S & Urata H Am J Physiol 2015
食塩負荷前後の各臓器AngⅡ産生能
(×102pg
（2%,NaCl飲水3ヶ月)
AⅡ/分/mg)
*
*
*, p<0.05
7
Devarajan S & Urata H Am J Physiol 2015
背景のまとめ
1. ヒト組織でAII産生の主体はヒトキマーゼ
2. 食塩依存性高血圧マウスモデルの確立
腸管キマーゼ活性化が昇圧に関与
3. 同モデルでキマーゼ阻害薬降圧効果証明
他の降圧薬の効能は著明ではなかった
福岡大学 Devarajan S & Urata H Am J Physiol82015
キマーゼ簡易測定法の確立
Nma／Dnp 型蛍光発色基質修飾アンジオテンシンI
NO2
Nma
Dnp
O
NO2
Asp-Arg-Val-Tyr-Tle-His-Pro-Phe -His-Lys-NH2
NH
切断
CH3
ヒトキマーゼ
Emittion 355 nm
Exitation 460 nm
Department of Cardiovascular Diseases, Fukuoka University Chikushi Hospital
9
Ferry G & Urata H Eur J Biochem 2001
食品抽出物のヒトキマーゼ阻害活性スクリーニング
福岡県工業技術センター生物食品研究所(久留米)
が県産品・未利用資源を中心に約1000食材収集
食品などを水・熱水・EtOH抽出法を規格化、
→食材ライブラリ－化
2010年からヒトキマーゼ阻害
活性食品探索に生物食品研
究食材ライブラリーを活用
キマーゼ阻害活性を有する機能性食品として
福大筑紫病院でキマーゼ阻害食材のin vitro探索
10
キマーゼ阻害活性の一次スクリーニング（in vitro）
基質
ヒトキマーゼ
+
食品抽出物
阻害効果の確認
（水・熱水・EtOH）
段階希釈
（2、4、… 32倍希釈）
水、熱水抽出物原液：抽出物10mg/ml in dH2O
エタノール抽出物原液：1g素材/30ml in EtOH
50%以上の
阻害活性を持つもの
抽出物
水
熱水
エタノール
スクリーニング数
782
782
928
4倍希釈
117（15.0%）
148（18.9％）
148（15.9％）
32倍希釈
27（3.5％）
16（2.0％）
7（0.8％）
（）内は、各抽出物スクリーニングサンプル中に占める割合
11
キマーゼ阻害活性の一次スクリーニング（in vitro）
抽出物の阻害効果（抜粋）
100
EtOH
Water
60
40
20
※ 32倍希釈したサンプルの阻害効果
水、熱水抽出物原液：抽出物10mg/ml dH2O
エタノール抽出物原液：1g素材/30ml EtOH
サンプル
福岡大学
J
I
H
G
E
D
C
紅タデ
A
0
ﾌﾞﾙｰ
K
ﾍﾞﾘ…
阻害率（％）
80
12
紅タデスプラウト
福岡県の特産品の（全国
の約３／４は福岡県朝倉
産）「紅たで」は香辛料とし
て薬味や刺身のつまとして
食され、「たで酢」としても
川魚の塩焼きなどに使用
されている。
食経験があり、基本的な安全性は確認されている。
13
“タデスプラウト”含有フラボノイド
ヒペロシド
37.8%
イソケルシトリン
3.3%
イデイン
7.4%
ルチン
1.1%
ケルシトリン
7.3%
ケルセチン
12.2%
14
タデ含有キマーゼ阻害フラボノイド
ルチン
ルチン
O-Glc-Rha
O-Gal
イデイン
ケルセチン
ヒペロシド
O-Gal
イソケルシトリン
O-Glc
イソケルシトリン
ケルシトリン
O-Rha
ケルシトリン
Gal : ガラクトース
Glc : グルコース
15
Rha : ラムノース
各種食品のヒペロシド含有量
植物名
対タデスプラウト
ヒペロシド含量
ヒペロシド比
タデスプラウト
15.09 mg/g
成長タデ（葉）
2.22 mg/g
－
6.7倍
オトギリソウ
1.73 mg/g
8.7倍
ラフマ
1.47 mg/g
サンザシ
0.03 mg/g
10.2倍
503.0倍
16
食塩依存性高血圧マウスの収縮期血圧
経口タデ乾燥粉末投与
用量効果検定
・500,250mg/kg群2週目以降有意
・125mg/kg群では3週目以降有意
・62.5mg/kg群では有意差なし
経口ヒペロシド投与
用量効果検定
・20,10mg/kg群では1週目以降有意差
・5mg/kg群では2週目以降有意
・2.5mg/kg群では1～8週目で有意差なし
Devarajan S & Urata H 2015
17
家庭早朝血圧収縮期
140
mmH g
130
（ｎ=11，M:F=8:3）
131
129
130
127
P=0.04
126
P=0.02
120
110
プラセボ
タデスプラウト
200mg
タデスプラウト
400mg
タデスプラウト
800mg
血圧値はデータ自動送信機能付き血圧計にて測定
（オムロン自動血圧計 HEM-7251G）
タデスプラウト
2000mg
18
浦田 2015
1日推定食塩摂取量(2番スポット尿法）
全体 12.4±3.6g/日
18.1g以上
(4.7%)
6g未満
(1.2%)
6.1g～8g
(5.8％)
18.1g以上
(6.8%)
6g未満
(0%) 6.1g～8g
16.1g～18g
(13.6%)
14.1g～16g
(11.4%)
16.1g～18g
(14%)
8.1g～10g
(18.6%)
(2.3％)
男性（目標10ｇ以下）
13.0±3.2g/日
8.1g～10g
(18.2%)
10.1g～12g
(20.5%)
12.1g～14g
(27.3%)
14.1g～16g
(14%)
12.1g～14g
(22.1%)
10.1g～12g
(25.6%)
女性（目標8ｇ以下）
11.9±3.9g/日
福岡大学
18.1g以上
(2.4%)
16.1g～18g
(7.1%)
14.1g～16g
(16.7%)
12.1g～14g
(14.3%)
6g未満
(2.4%)
6.1g～8g
(9.5％)
8.1g～10g
(19.0%)
10.1g～12g
(28.6%)
19
（A群）プラセボ群
（B群）ポリゴナム400mg
（C群）ポリゴナム800mg
前観察期
（2週間）
-2W
受診①
0W
受診⑤
食品開始
4W
8W
受診③
受診④
後観察期
（2週間）
12W
受診⑤
食品終了
14W
受診⑤
家庭血圧測定(毎日)
＊家庭血圧は本試験用の血圧計を用いて
①起床後1時間以内(排尿後、朝食前)に１～２分間の安静後2回測定する。
②就寝前に１～２分安静後2回測定する。
＊受診日は絶食で来院して下さい(水・白湯はOK)
＊お薬手帳をお持ちの方は、受診時に持ってきて下さい。
＊降圧薬、降圧作用がある健康食品は期間中禁止です。
＊試験前より使用している医薬品、健康食品は期間中変更しない限り継続可能です。
A群、B群、C群、
●ﾎﾟﾘｺﾞﾅﾑ400mg ●ﾎﾟﾘｺﾞﾅﾑ800mg
●ﾌﾟﾗｾﾎﾞ(偽薬)800mg のいずれかです。
試験終了時まで、参加者・医師ともに誰がどの
群を服用しているか分かりません。
ﾌﾟﾗｾﾎﾞ(偽薬)を服用された方には試験終了時に
ﾎﾟﾘｺﾞﾅﾑｻﾌﾟﾘﾒﾝﾄ3ヶ月分を差し上げます。
20
前向き2重盲検対照比較試験(家庭収縮期)
早朝家庭収縮期血圧
 朝の家庭収縮期血圧は、タデ
400mg摂取後の6、7、11で統計
的有意差あり。
 その他の週も、タデ400mg摂取
の方が低値を示した。
142→136, -6 mmHg
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
就寝前家庭収縮期血圧
136→125, -11 mmHg
 夜の家庭収縮期血圧は、タデ
400mg摂取後の1-3,6,7,9-13週
目で統計的有意差あり。
 その他の週も、タデ400mg摂取
の方が低値を示した。
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
21
前向き2重盲検対照比較試験(家庭拡張期)
早朝家庭拡張期血圧
 朝の家庭拡張期血圧は、タデ
400mg摂取後に統計的有意差が
確認されなかった。
 しかし平均値は、タデ400mg摂
取の方が低値を示した。
89→86, -3 mmHg
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
就寝前家庭拡張期血圧
80→77, -3 mmHg
 夜の家庭拡張期血圧は、タデ
400mg摂取後の全ての週で統計
的有意差が確認された。
前
間 2
週
12週間の血圧観察
後
間 2
週
22
前向き2重盲検対照比較試験（家庭心拍数）
早朝家庭心拍数
前
間 2
週
12週間の心拍観察
 夜の家庭心拍数は、タデ400mg
摂取後の全ての週で統計的有
意差が確認されなかった。
 しかし平均値は、タデ400mg摂
取の方が低値を示した。
 朝の家庭心拍数は、タデ400mg
摂取後の全ての週で統計的有
意差が確認されなかった。
 しかし平均値は、タデ400mg摂
取の方が低値を示した。
後
間 2
週
就寝前家庭心拍数
前
間 2
週
12週間の心拍観察
後
間 2
週
23
食塩・キマーゼ仮説
食塩過剰摂取
腸管キマーゼ活性化
ソルト・ｷﾏｰｾﾞ系の提唱
骨格筋キマーゼ活性化
高血圧
皮膚キマーゼ活性化
AⅡ関与？
ｱﾙﾄﾞｽﾃﾛﾝ関与？
24
交感神経関与？
福岡大学
25
まとめ
１．ヒトキマーゼ阻害作用を介す紅タデスプラウトの健康補助
降圧食品の新規開発
２．既存の健康降圧食品と異なる新規機序
３．食塩過多摂取血圧軽度上昇症例（推定約4000万人）で
有効性を示す
４．紅タデスプラウト含有フラボノイドは創薬シーズになり得る
福岡大学
26
お問い合わせ先
福岡大学研究推進部
担当コーディネーター
産学官連携センタ―
芳賀慶一郎
ＴＥＬ 092－871－6631（内線 2809）
ＦＡＸ 092－866－2308
e-mail sanchi@adm.fukuoka-u.ac.jp
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