コントロールグループ Sグループ 屠殺 清水先生 肝臓摘出・切だし 測定 玉泉 （佐藤先生ヘルプ有？） メモ 運搬 ヘルプ 徳田 メモ 運搬 ヘルプ 田中 肝臓ホモジナイズ Sri 高速遠心・超遠心 竹野 肝臓摘出・切だし 測定 宮本 肝臓ホモジナイズ Enos 肝臓マスターの仕事 ミクロソーム用肝臓の摘出 ①清水先生から脱血済みのラットボディーをもらい、肝 臓を摘出。その際、小さな肝臓片も残さず摘出する。全 肝重量を測定（ヘルパーと一緒に） ②2g（大体でよい）の肝臓を切り出して重量を測定（ヘ ルパーと一緒に）→→→→ホモジナイザーに渡す 残りの肝臓について ①0.5gの肝臓を2個切り出して、アルミホイル上で精秤した 後、包んで液体窒素で凍結 ②残りの肝臓はアルミホイルに包んで液体窒素で凍結 ホモジナイザーの仕事 ①肝臓マスターから2g肝をもらいうけ、ガラスホモ ジナイザーへ移す。そこにバッファー6mlを加えホ モジナイズ ②ホモジネートをメンブレンをつけた漏斗で濾過し、 遠沈管に直接流し込む ③ガラスホモジナイザーをバッファー6mlで洗い、 漏斗で濾過し、遠沈管に流し込む ④ヘルパーが遠沈管を遠心マスターへもっていく 注意点：ホモジナイズ操作は常にガラスホモジナイザーを氷で冷 やしながら行うこと また出来た遠沈管は氷中で冷やしつづけること Homogenizing 1: Put 2g of rat liver into the glass homogenizer. Add 6ml of phosphate buffer and homogenize with rat liver. 2: Filtrate the homogenate through the funnel with membrane to the centrifuging tube. 3: Wash the glass homogenizer with 6ml of phosphate buffer 4 : Do the same as 2 Attention: Be sure to keep the glass homogenizer with ice when u r homogenizing the liver. And also,keep the centrifuging tubes cool with ice. 遠心マスターの仕事 ①遠沈管に入ったホモジネートが8本たまった時点で栄養 化学にもち込み、高速遠心 ②上清を超遠心チューブ（１号館畜産から拝借）にとり、1 号館畜産へと急ぐ。超遠心をかける ③３号館実験室に戻り、次なる高速遠心の準備、及びヘル プ的役割を果たす。 ④残り１０本そろい次第、②と同様の作業を行う ヘルパーの仕事 主として、肝臓重量測定、記録、運搬を担当 意外と一番重要で難しい役回りかもしれません 作業の流れをつかんで動いてください グループの肝臓マスターとホモジナイザーとはよく打ち合わ せをしておいてください（誰が何をするか等） その後の作業 ①超遠心終了後の、ミクロソームの調製 竹野 玉泉 ②実験室、飼育ケージ及び飼育部屋の片付け 清水 田中 Sri Enos ③血清つくり及びHDLの分画 宮本 徳田 貴重なお時間をいただきありがとうございます がんばっていきましょう
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